Transcrição e processamento de RNA em eucariotos

Apresentação em tema: "Transcrição e processamento de RNA em eucariotos"— Transcrição da apresentação:

1 Transcrição e processamento de RNA em eucariotos
Prof. Odir Dellagostin Disciplina de Biologia Molecular

2 Transcrição em eucariotos

3 RNA – Ácido ribonucléico
- mRNA - tRNA - rRNA - hnRNA - snRNA

4 Estrutura de um gene eucarioto
Sítio de PoliA Promotor Região Codificadora hnRNA AAAAAAAAAA mRNA Exon Intron DNA RNA CAP

5 Transcrição em eucariotos
RNA pol I Nucleólo rRNA 28S, 18S, 5,8S Várias subunidades 50-70% RNA pol II Nucleoplasma hnRNA (transcrito primário) snRNA Várias subunidades % RNA pol III rRNA 5S tRNAs 10% RNA pol Mitocondrial Mitocôndria 01 subunidade RNA pol de Cloroplastos Cloroplasto Similar as bacterianas Requerem proteínas auxiliares: fatores de transcrição

6 Estrutura de Promotores da RNA Pol II

7 Promotores de genes transcritos pela RNApol II
Tata Binding Protein

8 RNA polimerase II TFIID = TBP + 10 TAFs

9 Formação do complexo de transcrição da Polimerase II

10 Enhancers (Reforçadores)

11 Proteínas necessárias para transcrição a partir de promotores reconhecidos pela RNA Pol II

12 RNA polimerase III

13 Processamento de RNA

14 Precursores de RNA (hnRNA) RNAs funcionais (mRNA)
Introdução Transcrito primário Pré-RNA Precursores de RNA (hnRNA) Processamento RNAs funcionais (mRNA)

15

16 Algumas informações sobre íntrons
3,7 íntrons por kb de região codificadora No homem o número médio é de 5 íntrons por gene 94% dos genes contém íntrons O tamanho médio dos íntrons é de 125 pb O tamanho médio dos éxons é de 90 a 120 pb (30 a 40 aa)

17 Splicing de íntrons de mRNA
Características de íntrons de mRNA - Adenina localizada 20 a 50 nt da extremidade 3’ do íntron - Região rica em pirimidinas na extremidade 3’ do íntron - Regra GU-AG

18 Íntrons na região codificadora

19 Splicing Spliceossomo: formado por proteínas e snRNPs
Estrutura montada assim que o íntron é transcrito Reação em cascata direcionada pelo pareamento de bases

20 Cis-splicing

21 Trans-splicing Ascaris lumbricoides Tripanossomas

22 Splicing alternativo

23 Splicing alternativo

24 Transporte ativo para o citoplasma
Spliceossomo – 3000 kDa

25 Erros no processo de splicing
Mecanismo de proteção contra RNAs incorretos Localização do códon de terminação

26 4- Splicing de íntrons de tRNA

27 Então, por que a evolução nos presenteou com estas seqüências?
A presença de íntrons nos genes eucarióticos, aparentemente, representa um enorme desperdício celular Então, por que a evolução nos presenteou com estas seqüências? Mecanismo de proteção contra mutações? Diversidade: genomas e proteomas (splicing alternativo)? Regulação gênica?...

28 Adição do CAP Fosfo-hidrolase Guanilil-transferase

29 Cauda poli A Poli(A)-polimerase

30 Processamento dos rRNAs

31 Processamento de precursores de tRNA
tRNA maduro Modificação das bases Processamento

32 Modificação de nucleotídeos
- rRNA e tRNA - Metilação de bases, da ribose (C2) - Catalizadas por várias enzimas