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DOSAGEM C-Hb e M-Hb. CO-OXIMETRO CO-OXIMETRO Princípio do método: Amostras de sangue total são quimicamente hemolisadas por íntimo contato com agente.

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1 DOSAGEM C-Hb e M-Hb

2 CO-OXIMETRO CO-OXIMETRO Princípio do método: Amostras de sangue total são quimicamente hemolisadas por íntimo contato com agente surfactante não iônico. O sangue hemolisado é então analisado espectrofotometricamente, através de um fluxo em cubeta termostática. O sangue total é aspirado pelo instrumento, misturado com diluente, hemolisado, e mantido em temperatura constante na cubeta. O sangue total é aspirado pelo instrumento, misturado com diluente, hemolisado, e mantido em temperatura constante na cubeta. A absorbância é gerada através de medida de luz monocromática em seis comprimentos de onda específicos (isolados no range de 530 a 670nm) que passa através da cubeta captada por um foto-detector. A absorbância é gerada através de medida de luz monocromática em seis comprimentos de onda específicos (isolados no range de 530 a 670nm) que passa através da cubeta captada por um foto-detector.

3 O microcomputador mede Hemoglobina Total (tHb), percentual de Oxihemoglobina (%O2Hb), percentual de Carboxihemoglobina (%COHb), percentual de Metahemoglobina (%MetHb) e percentual de Deoxyhemoglobina (%HHb). Absorbâncias: Medida do branco – obtida com seis leituras de absorbância da solução zero (zeroing solution); Medida da amostra – amostra diluída e hemolisada (sangue, controle ou calibrador) obtida com seis leituras de absorbância;

4 Cálculo da absorbância – As seis absorbâncias do branco são subtraídas das seis absorbâncias obtidas para a amostra: A(NET) = A(SAMPLE) – A(BLANK) Onde A = abs obtida em cada comprimento de onda Cálculo da concentração: È calculado através da concentração fracional de várias hemoglobinas presentes na amostra: A  = K  1C1+  2C2+  3C  C  C = concentração de diferentes espécies de Hb K = escala constante utilizada para calibração do processo tHb  = coeficiente da matrix A = Valor de absorbância no sangue nos diferentes comprimentos de onda

5 Concentrações são utilizadas para determinar tHb e percentual relativo de espécies de Hb. O valor de concentração da hemoglobina total (g/dL) é a soma das quatro concentrações: CtHb = C(HHb)+C(O2Hb)+C(COHb)+C(MetHb) Parâmetros de medida ( como todos os parâmetros são calculados): Concentração de Hemoglobina Total: A concentração de hemoglobina total é a soma da concentração das espécies de hemoglobina HHb, O2Hb, COHb e MetHb. Valor de referência para adultos: 12.0 a 18.0g/dL THb = (HHb+O2Hb+COHb+MetHb) x K THb = (HHb+O2Hb+COHb+MetHb) x K

6 Porcentagem de Oxihemoglobina (%O2Hb) Valor de referência para sangue arterial: 94.0 a 97.0% %O2Hb =  O2Hb  X 100  HHb  +  O2Hb  +  COHb  +  MetHb  Porcentagem de Carboxihemoglobina (%COHb) %COHb =  COHb  X 100  HHb  +  O2Hb  +  COHb  +  MetHb 

7 Porcentagem de Deoxyhemoglobina %HHb): %HHb =  HHb  X 100  HHb  +  O2Hb  +  COHb  +  MetHb 

8 Detecção/correção de interferentes: Detecção/correção de interferentes: Detecção de sulfahemoglobina: Detecção de sulfahemoglobina: Devido a características espectrais do comprimento de onda utilizado no IL 682, a SHb pode interferir em medidas de outras hemoglobinas. A presença de sulfahemoglobina causa um aparente acréscimo de MetHb e um resultado negativo de carboxihemoglobina. EQUIPAMENTO SINALIZA  ALERTA: Devido a características espectrais do comprimento de onda utilizado no IL 682, a SHb pode interferir em medidas de outras hemoglobinas. A presença de sulfahemoglobina causa um aparente acréscimo de MetHb e um resultado negativo de carboxihemoglobina. EQUIPAMENTO SINALIZA  ALERTA: SulfHb Warning – Sulfahemoglobina detectada superior a 1,5% ERRO não liberar resultado. SulfHb Warning – Sulfahemoglobina detectada superior a 1,5% ERRO não liberar resultado. High SulfHb Warning – equipamento não libera resultado. High SulfHb Warning – equipamento não libera resultado.

9 Correção de turbidimetria: Correção de turbidimetria: Presença de lípides pode interferir na medida de absorbância e afetar os resultados do Co-oxímetro. Existe um sistema de correção automático. Presença de lípides pode interferir na medida de absorbância e afetar os resultados do Co-oxímetro. Existe um sistema de correção automático. Para valores de triglicérides de aproximadamente 1500mg/dL (acima de 3%) é liberado para o operador uma mensagem de alta turbidimatria. EQUIPAMENTO SINALIZA  ALERTA: High turbidity – não liberar resultado. Para valores de triglicérides de aproximadamente 1500mg/dL (acima de 3%) é liberado para o operador uma mensagem de alta turbidimatria. EQUIPAMENTO SINALIZA  ALERTA: High turbidity – não liberar resultado.

10 Limitações: Limitações: RangeResoluçãoInexatidão *Imprecisão** RangeResoluçãoInexatidão *Imprecisão** tHb5-20g/dL0,1g/dL+ 0,3g/dL 0,2g/dL tHb5-20g/dL0,1g/dL+ 0,3g/dL 0,2g/dL O2Hb0-100%0,1% +1%0,5% O2Hb0-100%0,1% +1%0,5% COHb0-100%0,1% +1%0,5% COHb0-100%0,1% +1%0,5% HHb0-100%0,1% +3%1,5% HHb0-100%0,1% +3%1,5% MetHb0-10%0,1% +1%0,5% MetHb0-10%0,1% +1%0,5% MetHb10-100%0,1% +10%relative1,5% MetHb10-100%0,1% +10%relative1,5%

11  Exatidão definida como 95% dos limites de confiança para amostras com MetHb de 0 – 10% e hemolisadas no PH 7.0 a 7.4;  Precisão de um desvio padrão. Interferências: Interferências: Sulfahemoglobina: Presença de SHb pode causar um aparente aumento de metahemoglobina e um decréscimo de carboxihemoglobina e Oxyhemoglobina Sulfahemoglobina: Presença de SHb pode causar um aparente aumento de metahemoglobina e um decréscimo de carboxihemoglobina e Oxyhemoglobina Bilirrubina: pode causar um decréscimo de 1,5% de Oxyhemoglobina e pode ter um acréscimo de 1 a 2% de carboxihemoglobina em um nível de bilirrubina de 30mg/dL. Bilirrubina: pode causar um decréscimo de 1,5% de Oxyhemoglobina e pode ter um acréscimo de 1 a 2% de carboxihemoglobina em um nível de bilirrubina de 30mg/dL. Turbidimetria: acima de 3% interfere nos resultados Turbidimetria: acima de 3% interfere nos resultados Indocyanine green (marcador de fluorescência): alterações de resultados do equipamento Indocyanine green (marcador de fluorescência): alterações de resultados do equipamento

12 Azul de metileno: acréscimo de metahemoglobina e diminuição de oxyhemoglobina Azul de metileno: acréscimo de metahemoglobina e diminuição de oxyhemoglobina Algumas drogas e substâncias que podem alterar hemoglobina a metahemoglobina causando metahemoglobinemia. Sulfahemoglobina podem ser formadas com o uso de certas drogas, causando interferência. Algumas drogas e substâncias que podem alterar hemoglobina a metahemoglobina causando metahemoglobinemia. Sulfahemoglobina podem ser formadas com o uso de certas drogas, causando interferência.

13 Especificações do equipamento: Especificações do equipamento: Amostrasangue total Amostrasangue total AnticoagulanteEDTA ou heparina AnticoagulanteEDTA ou heparina Quantidade de amostra65  L Quantidade de amostra65  L Fluxo de reagentesCiclo: Zero Diluent Cleaning Fluxo de reagentesCiclo: Zero Diluent Cleaning Sample 0.6mL 0.12mL NA Sample 0.6mL 0.12mL NA Prime 2.0mL 0.92mL 0.28mL Prime 2.0mL 0.92mL 0.28mL Clean 1.3mL 0.27mL 0.34mL Clean 1.3mL 0.27mL 0.34mL Zero ref. 0.6mL 0.10mL NA Zero ref. 0.6mL 0.10mL NA Tempo do ciclo de amostra58 segundos Tempo do ciclo de amostra58 segundos monitorados535.0nm, 585.2mn, 594.5mn, 626.6mn, 638.3mn, 667.8nm monitorados535.0nm, 585.2mn, 594.5mn, 626.6mn, 638.3mn, 667.8nm Temperatura ambiente15-32 º C Temperatura ambiente15-32 º C Humidade ambiente  90% Humidade ambiente  90%


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