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PublicouMirella Muniz Alterado mais de 10 anos atrás
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UNIVERSIDADE CATÓLICA DE GOIÁS TÓPICOS EM BIOTECNOLOGIA
DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA TÓPICOS EM BIOTECNOLOGIA BIO 1320 Biotecnologia Prof. Ricardo Goulart
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CONSIDERAÇÕES GERAIS Informação Genética DNA RNA PROTEÍNA “Nuclear”
Transição “Citoplasmática”
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CONSIDERAÇÕES GERAIS Replicação Transcrição
Tradução (Síntese de Proteínas)
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CONSIDERAÇÕES GERAIS DNA RNA Códon Aminoácido Conjunto de Aminoácidos
Transcrição Códon Trinca UCU CCG AUG CGU GAU GGG... Códon Aminoácido Códon Aminoácido UCU Serina CCG Prolina AUG Metionina CGU Arginina GAU Glutamina CGG Arginina Conjunto de Aminoácidos PROTEÍNA Tradução
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BIOTECNOLOGIA Multidisciplinar - Engenharia - Genética
Plantas e animais com características desejáveis, cultura de células e de tecidos, marcadores genéticos, produção de antibióticos,... É o conjunto de conhecimentos técnicos e métodos, de base científica ou prática, que permite a utilização direta ou indireta de organismos ou seres vivos como parte integrante e ativa do processo de produção industrial de bens e serviços
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BIOTECNOLOGIA TRADICIONAL x MODERNA
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BIOTECNOLOGIA Tradicional Moderna - Fermentação
Sumérios 6000 a.C. – bebidas alcoólicas – grãos cereais Babilônios 2000 a.C. – fermento – cerveja e pão Egípcios Moderna - Maior escala Kornberg 1967 – ponto de partida – síntese de DNA Revolução genética – novas técnicas de manipulação genética / tecnologia do DNA recombinante
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BIOTECNOLOGIA Tradicional Moderna
- Seleção de organismos – caract. Desejáveis / cruzamento - + tempo – transferências de genes NÃO desejáveis Moderna - Transferência APENAS de genes desejáveis - Doador – espécie diferente - + preciso, + rápido e + eficiente
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HISTÓRICO – Eventos Importantes
Produção de Insulina humana por engenharia genética Produção de Penicilina em escala industrial Identificação do material genético Tecnologia do DNA recombinante Estrutura do DNA Desenvolvimento de anticorpos monoclonais Técnica de PCR (Reação em cadeia da Polimerase) Primeiro uso da terapia gênica Código genético decifrado Clonagem da ovelha Dolly Projeto genoma Síntese in vitro do DNA 1943 1944 1953 1956 1973 1975 1982 1988 1990 1996
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ENGENHARIA GENÉTICA Princípios Técnicas
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MANIPULAÇÃO GENÉTICA Técnica DNA Recombinante
- Novos organ. – características não encontradas natureza - Expressão DNA exógeno – espécies diferentes Transformação direta Transformação indireta Plasmídeo Biobalística Vetores Transfecção
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Enzimas de Restrição - 1953 – Restrição crescimento de fagos
- Presença de endonucleases - Metilação (Adenina/Citosina) DNA bact. - Degradação DNA viral
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Enzimas de Restrição - Sítio de reconhecimento – geralmente palindrômico ARARA OMO ANA - Reconhecem de 4 a 8 pb - Cortes com extremidades abruptas / coesivas - Nomenclatura: 1ª letra – Gênero / 2ª3ª - Espécie - Clonagem molecular - ~ enzimas diferentes - Isolamento DNA – separado por Eletroforese
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Enzimas de Restrição - Clivagens
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Enzimas de Restrição
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Eletroforese - Conhecida desde 1930 - Difundida 1950-1960
- Movimentação de moléculas – campo elétrico - Matriz – Agarose / Poliacrilamida - Separa proteínas – carga elétrica / peso molecular - Separa ácido nucléico – peso molecular
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Eletroforese
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Eletroforese
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Clonagem Molecular + = rDNA + = rDNA
- Isolamento e propagação de moléculas idênticas + = rDNA INSERTO VETOR + = rDNA CÉLULA HOSPEDEIRA TRANSFORMAÇÃO
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Clonagem Molecular - Obtenção DNA recombinante
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Clonagem Molecular
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Plasmídeo - Fita dupla - Circular - Extracromossômico - Conjugação
- Resistência à antibióticos - Insertos até pb
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Clonagem Molecular Plasmídeo Plasmídeo Recombinante
Plasmídeo + Inserto
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Clonagem Molecular
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DÚVIDAS ???
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MUI T O O B R I G A D
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