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UNIVERSIDADE DO VALE DO ITAJAÍ PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM CIÊNCIAS FARMACÊUTICAS Nanoemulsões como plataforma para otimização da atividade anti-inflamatória.

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1 UNIVERSIDADE DO VALE DO ITAJAÍ PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM CIÊNCIAS FARMACÊUTICAS Nanoemulsões como plataforma para otimização da atividade anti-inflamatória tópica do extrato das cascas de Rapanea ferruginea Juarana Dal Mas, Tailyn Zermiani, Marcia Maria de Souza, Kathryn A. B. S. da Silva, Angela Malheiros, Tania Mari Bellé Bresolin, Ruth Meri Lucinda-Silva Juarana Dal Mas, Tailyn Zermiani, Marcia Maria de Souza, Kathryn A. B. S. da Silva, Angela Malheiros, Tania Mari Bellé Bresolin, Ruth Meri Lucinda-Silva

2 Rapanea ferruginea Mez. Mirsinaceae Copororoca, azeitona do mato Partes aéreas e cascas Ácidos mirsinoicos AMA AMB AMC Anti-inflamatória, antinociceptiva, Antioxidante

3 Rapanea ferruginea Mez.

4 Baccarin et al., 2010, 2011 AMB AMC AMA AM B AM C AM A

5 Rapanea ferruginea Mez.

6 Influência do pré-tratamento de camundongos com extrato mole de R. ferruginea (150, 300 e 500 mg/kg, v.o., 60 min) na Fase I sobre a hipernocicepção induzida pela injeção i.pl de formalina 2,5% (20 µL).Os dados foram expressos como a média ± desvio padrão de 8 animais em cada grupo. Os asteriscos indicam uma redução significativa do tempo de lambida da pata, onde **p < 0,05 e **p < 0,01. Influência do pré-tratamento de camundongos com extrato mole de R. ferruginea (150, 300 e 500 mg/kg, v.o., 60 min) na Fase II sobre a hipernocicepção induzida pela injeção i.pl de formalina 2,5% (20 µL).Os dados foram expressos como a média ± desvio padrão de 8 animais em cada grupo. Os asteriscos indicam uma redução significativa do tempo de lambida da pata, onde **p < 0,05 e **p < 0,01. Rapanea ferruginea Mez.

7 Nanoemulsões são dispersões com tamanho de gota em escala nanométrica e que por suas características como transparência, fluidez e estabilidade frente a problemas comuns em emulsões, têm sido estudadas como veículo para fármacos com baixa absorção dérmica. Nanoemulsões

8 Vantagens -estabilidade física e físico-química; -Relativa baixa toxicidade; - Veículos para fármacos hidrofílicos e lipofílicos; - Aumento da taxa de absorção e biodisponibilidade; -Aumento da estabilidade de fármacos; -aumento da permeação cutânea; - características sensoriais mais agradáveis para aplicação em cosméticos; SOLANS et al., 2005; TADROS et al., 2004; THAKUR et al., 2012 Nanoemulsões

9 Objetivos Avaliar a influência do veículo nanoemulsionado sobre a atividade anti-inflamatória tópica do extrato das cascas de R. ferruginea. -Desenvolvimento de uma nanoemulsão; -Caracterização da nanoemulsão desenvolvida; -Avaliação da atividade anti-inflamatória em modelo de edema de orelha.

10 Métodos e Resultados -Óleo: Miristato de isopropila -Tensoativos: Alkest CSO 400: Span 80 -O extrato mole das cascas incorporado na fase oleosa da NE 0,25 e 0,5%. Figura 2 - Representação esquemática demonstrando o método de emulsificação por baixa energia, onde a quantidade de água adicionada à emulsão A/O é aumentada progressivamente até que a inversão de fase ocorra e a emulsão O/A seja formada. Fonte: Mcclements e Rao, 2011.

11 Nota: FT: fluido transparente; FL: fluido translúcido; FB: fluido branco; GT: gelificado transparente; GU: gelificado turvo; GL: gelificado translúcido; GR: gelificado com ressonância; EG: emulsão gelificada; SF: separação de fases. Métodos e Resultados – Desenvolvimento das NE

12 Extrato Aspectos organolépticos pH Resíduo Seco (%) Teor AMA* (mg/g) Teor AMB* (mg/g) Solução Extrativa Avermelhado, odor alcoólico 5,83 ± 0,03 0,48 ± 0,02 42,14 ± 0,04 36,88 ± 0,06 Mole Vinho escuro, odor adocicado 4,21 ± 0,01 51,17 ± 0,53 40,06 ± 0,02 37,34 ± 0,09 Resultado das análises realizadas nos extratos das cascas da R. ferruginea.. Métodos e Resultados – Extrato mole de R. ferruginea

13 Métodos e Resultados – Teor de marcador por CLAE

14

15 Ácido mirsinoico B 53,03 ± 0,03 µg/g de formulação Ácido mirsinoico A 54,10 ± 0,08 µg/g de formulação

16 Métodos e Resultados – Tamanho e potencial zeta Tamanho das gotas: 47,88 ± 8,20 nm PDI : 0,228 Potencial zeta : -34,7 ± 1,15 mV

17 Métodos e Resultados – Comportamento reológico

18 Métodos e Resultados – Atividade anti-inflamatória in vivo Modelo de edema de orelha Óleo de cróton camundongos Swiss G1- controle negativo G2- NE G3- NE 0,25% do extrato G4 – NE 0,5% do extrato G5 - Creme G6 – Creme 0,25% do extrato G7 – Creme 0,5% do extrato G8 – Creme 1,0% do extrato G9 – Creme contendo 0,1% de dexametasona.

19 Métodos e Resultados – Atividade anti-inflamatória in vivo

20 Considerações finais Os resultados permitem concluir que: As nanoemulsões (NE) apresentaram características físicas e sensoriais adequadas para uso tópico; Não houve alteração do perfil cromatográfico do extrato incorporado nas NE; As NE apresentaram um maior potencial de inibir o processo inflamatório in vivo do que o creme contendo o extrato e o efeito semelhante ao da dexametasona; As NE apresentam-se como plataformas terapêuticas capazes de potencializar a ação do extrato das cascas de R. ferruginea em modelo in vivo de inflamação tópica.

21 Apoio: Obrigado!!! Profa. Dra. Ruth Meri Lucinda da Silva


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