Basofilia e Acidofilia: coloração do Panótico

Apresentação em tema: "Basofilia e Acidofilia: coloração do Panótico"— Transcrição da apresentação:

1 Basofilia e Acidofilia: coloração do Panótico
Pós-Graduação em Genética Basofilia e Acidofilia: coloração do Panótico Disciplina: Preparações citológicas e análises citogenéticas Maria Isabel Afonso da Silva

2 Reações Citoquímicas Mediadas por Ligações Eletrostáticas
Afinidade eletrostática: um corante ionizado em uma solução reage com um substrato de carga iônica oposta. Substrato catiônico Acidofilia Corante aniônico Substrato aniônico Basofilia Corante catiônico

3 Corantes Básicos (Catiônicos)
Basofilia Corantes Básicos (Catiônicos) Substrato carregado negativamente (aniônico) reage eletrostaticamente com um corante carregado positivamente (catiônico). Corantes: Azul de metileno Azul de alcian Azul de toluidina

4 Basofilia

5 Grupamentos negativos
Basofilia Fosfatos (ácidos nucléicos) Sulfatos (Glicosaminoglicanos sulfatados) Carboxilas (Proteínas e açúcares ácidos) Grupamentos negativos

6 Reação de Acidofilia - Corantes ácidos (Aniônicos)
Os corantes reagem com os elementos que possuem cargas positivas na célula Ex: proteínas, que podem apresentar radicais básicos de seus aminoácidos ionizados (NH3+). Orceína Fast green Xilydine Ponceau Sírius Red

7 Reação de Acidofilia  Grupamentos se ionizam na dependência de pHs diferenciados  Obtidos a partir de solução tampão em que os corantes são diluídos

8 SUBSTRATO CORANTE EXEMPLOS BASOFILIA ACIDOFILIA - Þ aniônico +
catiônico Azul de Toluidina Azul de metileno Azul de alcian Hematoxilina ACIDOFILIA Xylidine ponceau Sirius red Fast Green Eosina Orceína

9 aminoácidos básicos (lisina, arginina, histidina)
Hematoxilina Eosina Eosina (-)  Substratos (+) Citoplasma (grupam/o NH2+) aminoácidos básicos (lisina, arginina, histidina) Rosa Hematoxilina (+)  Substratos (-) Núcleos (grupam/os fostato do DNA e RNA) ácidos nucleicos, aminoácidos ácidos (aspártico, glutâmico). Azul

10 (Mus muscullus) (ASSIS & AZEREDO-OLIVEIRA, 2002)
Hematoxilina Eosin (Mus muscullus) (ASSIS & AZEREDO-OLIVEIRA, 2002) G

11 Glândulas acessórias de morcego
Ep ML V L Normal Próstata Glândulas acessórias de morcego

12 Panótipo (Hematocor-BiológicaR)
Reação de Acidofilia/Basofilia -Mediadas por Ligações Eletrostáticas Coloração de rotina para análise geral da morfologia das células sanguíneas Facilita a identificação e diferenciação dos leucócitos Basofilia: Como a hematoxilina - grupamentos fosfatos dos ácidos nucléicos (Núcleo) Acidofilia: Como a eosina Amino de resíduos protéicos (NH3)- (núcleo e Citoplasma)

13 PANÓTICO RÁPIDO LB 1)Finalidade: Conjunto para coloração rápida em hematologia. 2) Princípio: A extensão hematológica é submetida à ação de um fixador e duas soluções corantes, por meio de imersões, ao final da última, encontra-se pronto para leitura.

14 CORANTE RAPIDO PARA HEMATOLOGIA COM
1 FIXADOR-TRIARILMETANO E CORANTES / 2- XANTENO / 3-TIAZINA (de 500 ml) Panótico rápido 1: compõe-se por uma solução de triarilmetano a 0,1%. Panótico rápido 2: compõe-se por uma solução de xantenos a 0,1%. Panótico rápido 3: compõe-se por uma solução de tiazinas a 0,1%. O material deve ser mantido em temperatura ambiente, em local fresco, seco e protegido da incidência direta de luz solar

15 Phrynops geoffroanus ou “Cágado-de-Barbelas”

16 Amostras Sanguíneas Punção Cardíaca Seio venoso cervical
Descartada a primeira gota – técnica de esfregaço – extensões sangüíneas - fixação.

17 Contagem de trombócitos Contagem diferencial dos leucócitos:
Hemograma Contagem de trombócitos Contagem diferencial dos leucócitos: - monócitos - linfócitos - neutrófilos - azurófilos - heterófilos - eosinófilos - basófilos

18 Células Vermelhas de Quelônios
Atuam na inflamação, promovem fagocitose; como célula hemostática

19 Células brancas de Quelônios
Linfócitos Citoplasma basofílico. Resposta imune - infecção viral. 15% a 90% Monócito Combate a doenças infecciosas. 3% a 20% Azurófilo+Monócito 2% a 5% Neutrófilo Respondem à infecções bacterianas. 0,5% a 10%

20 Células brancas de Quelônios
Eosinófilo+Heterófilo Encontrados em infecções parasitárias. 7% a 20% Heterófilo Combate a infecções bacterianas. 20% a 40% Basófilo Reações imunes. 10% a 25%

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22 Constituem o maior nº de células do sangue
Em média 4,5 milhões na mulher e 5,5 milhões no homem. Medem aproximadamente 7,5 um de diâmetro

23 Agranulócitos: Núcleo sem segmentação e apenas granulações azurofílicas, quase imperceptíveis: linfócitos e monócitos. Granulócitos: Núcleos lobulados de forma variável (polimórficos) grânulos citoplasmáticos proeminentes, cujas características tintoriais diferem conforme a classe à qual pertence o granulócito: neutrófilos, eosinófilos ou basófilos.

24 Neutrófilo 40-70% Medem 12-15um de diâmetro. O citoplasma é acidófilo, com muitos grânulos finos. O núcleo possui cromatina em grumos, com 2-5 lóbulos distintos Função fagocitária.

25 Linfócito 20-50% Medem de 6-12 um de diâmetro. Possuem citoplasma basófilo, pequeno, escasso. O núcleo apresenta-se esférico com cromatina bastante condensada. Linfócitos T: imunidade celular Linfócitos B: produção de anticorpos.

26 Monócito 2-10% diâmetro de um. Apresenta um núcleo irregular, frequentemente lobulado, e citoplasma cinza-azulado opaco, com grânulos azurófilos finos. São células precursoras do sistema fagocítico mononuclear.

27 Eosinófilo 0-8% São ligeiramente maiores do que os neutrófilos: um. O núcleo é geralmente bilobulado, mas pode ser trilobulado. Os grânulos são esféricos e maiores, preenchem o citoplasma e coram-se de avermelhado (eosina). São importantes nas doenças alérgicas e parasitárias

28 Basófilo 0-3% Apresentam o citoplasma com granulações pretas e grandes, irregulares, que têm afinidade por corantes básicos. O núcleo tem dois segmentos, geralmente encobertos pelas granulações. Estão envolvidos nas reações imediatas de hipersensibilidade (asma).

29 Plaquetas São pequenos fragmentos citoplasmáticos presentes no sangue circulante. Medem 2-4um de diâmetro. Atuam na coagulação sanguínea, na retração e dissolução de coágulos