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BIOLOGIA MOLECULAR.

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Apresentação em tema: "BIOLOGIA MOLECULAR."— Transcrição da apresentação:

1 BIOLOGIA MOLECULAR

2 HISTORICO 1800 1900 1950 1600 Princípio transformante Griffiths, 1928
Fundação da genética (Mendel, 1866) e da evolução (Darwin, 1859) Fatores e fermentos Garrod e Bateson, 1909 Descoberta do microscópio Dupla Hélice Watson e Crick, 1953 Células, organelas Nucleína (Miecher, 1869) Cromatina (Flemming,1879) DNA:depositário Avery, 1944 Divisão Celular Sutton e Boveri, 1902 Genes e enzimas Beadle e Tatum, 1940

3 O princípio transformante: Griffiths, F. 1928
Cepa rugosa (L) Camundongo sobrevive Cepa Lisa (L) Camundongo morre Cepa Lisa (L) inativada pelo calor Cepa rugosa (L) viva + Camundongo morre Camundongo sobrevive Cepa Lisa (L) inativada pelo calor

4 O princípio transformante: Avery O. 1944
proteínas RNA Cepa Lisa (L) inativada pelo calor Cepa rugosa (L) viva polissacarídeos Camundongo sobrevive lipídeos Cepa rugosa (L) viva DNA Camundongo morre O DNA é o depositário da informação genética

5 Neel, Beet, Pauling, e Ingram
e a anemia falciforme,

6 Identificar e caracterizar genes:
O problema dos bioquímicos Identificar e caracterizar genes: a busca do gene perdido

7 Experimentos que levaram ao modelo da dupla hélice
Alexander Todd descreve que o DNA é um polinucleotídeo

8 Experimentos que levaram ao modelo da dupla hélice
a-hélice é descrita como a estrutura das proteínas Rosalind Franklin faz experimentos de difração de Raios-X que são “mostrados” a Watson Esses experimentos sugerem uma estrutura magricela e helicóide, com duas fitas e um diâmetro com pirimidinas e purinas pareando

9 Experimentos que levaram ao modelo da dupla hélice
Erwin Chargaff se encontra com Watson e Crick e relata seus achados: as quantidades relativas de A e T são iguais e C e G também.

10

11 Resumo: DNA

12 Resumo: DNA

13 Evolução do conhecimento em biologia molecular desde a dupla-hélice
PCR,1985 Transgênicos, 1980 Primeiro gene humano,1977 Enzimas de restrição,1971 Insulina recombinante,1982 Sequencimento de DNA, 1975 DNA recombinante, 1973 Genômica, 1991 Bancos de armazenamento de dados 1971 Replicação, 1958 DNA polimerase, 1961 Hibridização por Sothern,1975 Código genético, 1961 Regulação da expressão gênica,1961 Retrotranscrição, 1970 Transcrição 1957 Dupla-hélice, 1953 1950 1960 1970 1980 1990

14 Como nós podemos manipular o DNA?
1a etapa: purificação

15 Como nós podemos manipular o DNA?
2a etapa: visualização

16 Como nós podemos manipular o DNA?
2a etapa: visualização: eletroforese em gel

17 Como nós podemos manipular o DNA?
3a etapa: cortar e colar GAATTC GGGCCC CTTAAG CCCGGG Enzimas de restrição: tesouras moleculares

18 Criação de moléculas recombinantes
DNA Estranho Fragmentos do DNA estranho “insert” Plasmídio aberto, Gene resistente à Ampicillina Plasmídio circular, com “Insert” Mistura com aenzima Ligase L I G A T O N

19 Como clonar um gene? isolar o DNA - digerir com enzimas de restrição
- digerir os plasmídeos com a mesma enzima - ligar as fitas de DNA e plasmidiais

20 Como clonar um gene? Introduzir os plasmídeos recombinantes nas bactérias - selecionar os plasmídeos

21 CLONAGEM DA INSULINA Insulina recombinante (Humulin) -introduzir gene responsável pela produção de insulina dos seres humanos em bactérias (plasmídios) -bactérias produzem insulina humana recombinante -produção praticamente ilimitada e com custos muito baixos em comparação ao outro método

22 luminescente de bactéria
Transgênicos Primeiro mamífero transgênico: hormônio do crescimento Tabaco com gene luminescente de bactéria Transgênico que reverteu o sexo

23 Identificação humana: teste de paternidade por DNA
Complementaridade pode ser usada para se fazer uma “pescaria molecular”

24 Hibridização por Southern
1. Separação do DNA fragmentado por eletroforese em gel 2. Transferência do DNA fragmentado para um suporte sólido (filtro de Nitrocelulose) 3. Hibridização com a sonda marcada Pólo negativo Poços 4. Lavagem do filtro para manter apenas a sonda hibridizada com o fragmento de DNA especifico 5. Exposição a um filme de Raios-X

25 Teste de Paternidade

26 Paternidade Inclusão Exclusão

27 O que mudou na era genômica/Pós-genômica?
...escala! No de genes estudados

28 Abordagem “ômica” de doenças complexas
Sistemas automatizados Biomatemática Bioinformática Bioestatística Larga-escala Melhores ferramentas Vacinas Testes genéticos Remédios

29 DNA RNA PTN genoma transcriptoma proteoma
Reinvenção do dogma central da biologia molecular? DNA RNA PTN genoma transcriptoma proteoma

30 Projeto genoma: santo Graal
DNA na sociedade DNA Trangênicos Drogas recombinantes: insulina, vacina HBV Medicamentos inteligentes (dosagens pessoais) Diagnóstico de doenças Teste de Paternidade Projeto genoma: santo Graal Árvore da vida Código da vida Manual de informações Livro de receitas

31 Informações sobre 751 notícias em 5 jornais diários brasileiros
Quando o DNA vira notícia (Massarani et al, C&A:26, 2003) Informações sobre 751 notícias em 5 jornais diários brasileiros Jun/2000- mai/2001 Distribuição dos artigos por assunto Mapeamento genético 78% Associação entre genes e doenças e comportamento 30% Trangênicos 23,7% Clonagem 13,7% Atitude da imprensa Postura favorável 54% favorável com ressalvas 5% Postura desfavorável 15,7% prós e contras 30,1%

32 A ideologia do DNA no século XX
Década de 20: hereditariedade e, em última análise, os (desconhecidos) genes definem as características do indivíduo das morfológicas as comportamentais. Década de 60: dogma central após o modelo da dupla-hélice cria a idéia do DNA como um plano mestre da execução da vida Década de 90: Genoma, aos invés do DNA apenas, reconstitui a o conceito de entendimento da planta dos seres vivos (blueprint)


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