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Exercicios Enzimas. (a) Projete 1/v versus 1/[S] para estes dados. Há indicação de que a penicilinase segue uma cinética de Michaelis-Menten? Em caso.

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1 Exercicios Enzimas

2 (a) Projete 1/v versus 1/[S] para estes dados. Há indicação de que a penicilinase segue uma cinética de Michaelis-Menten? Em caso afirmativo, qual é o valor de KM ? Questao (b) Vmax? O gráfico de 1/V versus 1/[S] fornece uma reta. Portanto, indica que a equação de Michaelis Menten se aplica a cinética em questão. V= Vmax [S] Km + [S] Pelo gráfico: = Km 1 - 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 -4,0-2,00,02,04,06,08,010,012,0 1/[S] (x 10 5 M -1 ) 1/V (x 10 9 ) Km 1 - Vmax 1 1,92 x 10 5 - Km=0,52 x 10 -5 M *Significado de Km Km = [S] quando V = ½ de Vmax = Vmax 1 1,46 x 10 9 Vmax=0,68 x 10 -9 moles.min -1

3 (c) Qual é o valor do número de transformação (turnover) da penicilinase nestas condições experimentais? (Considere um centro ativo por molécula de enzima) Turnover é definido como número de moléculas de substrato transformados por minuto por molécula de enzima (em condições de V = Vmax). Vmax =0,68 x 10 -9 moles.min -1 0,68 x 10 -9 molesX moleculas 1 mol 6,0 x 10 23 moleculas (número de Avogrado!) X=4,08 x 10 14 moleculas de substrato Cálculo do número de moléculas de enzimas presentes no tubo: Cada tubo contém 10 -9 g de penicilase purificada. O peso molecular de penicilase é 29600 g/mol. 29600 g de enzima1 mol ou 6,0 x 10 23 moleculas 10 -9 gY Y= (10 -9 g )(6,0 x 10 23 moleculas) 1 mol = 6,0 x 10 14 2,96 x 10 4 = 2,03 x 10 10 moléculas de enzimas (0,68 x 10 -9 moles )(6,0 x 10 23 moleculas) = 29600 g Como existe um sítio ativo por molécula de enzima, cada molécula de enzima transforma uma molécula de substrato por vez. Assim, 2,03 x 10 10 moléculas de enzimas tranformam por min 4,08 x 10 14 de moléculas de substrato. Turnover= 4,08 x 10 14 2,03 x 10 10 =2,0 x 10 4 moléculas de substrato transformados por molécula de enzima

4 0,68 x 10 -9 molesX moleculas 1 mol 6,0 x 10 23 moleculas (número de Avogrado!) X=4,08 x 10 14 moleculas de substrato Cálculo do número de moléculas de enzimas presentes no tubo: Cada tubo contém 10 -9 g de penicilase purificada. O peso molecular de penicilase é 29600 g/mol. 29600 g de enzima1 mol ou 6,0 x 10 23 moleculas 10 -9 gY Y= (10 -9 g )(6,0 x 10 23 moleculas) 1 mol = 6,0 x 10 14 2,96 x 10 4 = 2,03 x 10 10 moléculas de enzimas (0,68 x 10 -9 moles )(6,0 x 10 23 moleculas) = 29600 g Como existe um sítio ativo por molécula de enzima, cada molécula de enzima transforma uma molécula de substrato por vez. Assim, 2,03 x 10 10 moléculas de enzimas tranforma por min 4,08 x 10 14 de moléculas de substrato. Turnover= 4,08 x 10 14 2,03 x 10 10 =2,0 x 10 4 moléculas de substrato transformados por molécula de enzima


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