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Construção de Biblioteca Gênica 1-Vetor de Clonagem Plasmidial 2-Vetor de Clonagem Derivado do bacteriófago λ 3-Biblioteca de cDNA 4-Cromossomo Artificial.

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Apresentação em tema: "Construção de Biblioteca Gênica 1-Vetor de Clonagem Plasmidial 2-Vetor de Clonagem Derivado do bacteriófago λ 3-Biblioteca de cDNA 4-Cromossomo Artificial."— Transcrição da apresentação:

1 Construção de Biblioteca Gênica 1-Vetor de Clonagem Plasmidial 2-Vetor de Clonagem Derivado do bacteriófago λ 3-Biblioteca de cDNA 4-Cromossomo Artificial Bacteriano Edmar Vaz de Andrade

2 1-Vetor de Clonagem Plasmidial Componentes básicos de vetor plasmidial de clonagem 5 – 10 kb

3 2-Vetor de Clonagem Derivado do bacteriófago λ Ciclo Lítico de um Bacteriófago

4 2-Vetor de Clonagem Derivado do bacteriófago λ Formação de placas de lise em cultura de bactérias

5 2-Vetor de Clonagem Derivado do bacteriófago λ Genoma do bacteriófago λ

6 1 – Remoção de genes não essenciais 2 – Inserção de sítios de restrição específicos 3 – Introdução de um DNA de preenchimento 4 – Substituição do DNA de preenchimento por um gene de interesse (fragmentos: kb) 2-Vetor de Clonagem Derivado do bacteriófago λ DNA de preenchimento

7 3-Biblioteca de cDNA Síntese do cDNA

8 3-Biblioteca de cDNA Adição de uma extremidade em G n Hibridização com iniciador C n

9 3-Biblioteca de cDNA Síntese do cDNA fita dupla e Metilação

10 3-Biblioteca de cDNA Adição de Adaptadores com Sítio de Restrição

11 3-Biblioteca de cDNA Digestão com Enzima de Restrição

12 3-Biblioteca de cDNA Clonagem dos Fragmentos Digeridos no Vetor λ

13 3-Biblioteca de cDNA Infecção de Bactérias com o Vetor λ Recombinante

14 4-Cromossomo Artificial Bacteriano Genes par derivado do plasmído F. Facilita a distribuição do plasmídio para células filhas Construção de bibliotecas genômicas com insertos de até pb

15 Quando não mencionado, as figuras apresentadas foram retiradas, com ou sem modificações, das seguintes referências: 1. LODISH, H; DARNELL, J. E. e BALTIMORE, D Biologia Celular e Molecular, 5ª edição. Artmed Editora SA. Porto Alegre-Brasil. (www.whfreeman.com/lodish) 2. LEHNINGER, A. L. NELSON, D. L e COX, M. M Principles of Biochemistry. 3ª Edition, Worth Publitions.


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