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Avaliação da resposta imunológica murina contra epitopos miméticos de Cysticercus bovis Rodrigo Pedroso Madlener de Almeida UFPR/TN Juliana Ferreira de.

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1 Avaliação da resposta imunológica murina contra epitopos miméticos de Cysticercus bovis Rodrigo Pedroso Madlener de Almeida UFPR/TN Juliana Ferreira de Moura, Larissa Magalhães Alvarenga, Alessandra Becker Introdução A cisticercose bovina é uma doença parasitária provocada pelo desenvolvimento dos metacestódeos de Taenia saginata (Cysticercus bovis) nos tecidos musculares de bovinos, sendo considerada um problema de saúde pública causador de prejuízos na pecuária de corte. A obtenção de peptídeos miméticos imunogênicos permite uma gama de possibilidades de estudo, dentre elas a produção de anticorpos com a finalidade de diagnosticar determinadas doenças ou imunoproteger um organismo. Tendo isso em vista, o objetivo deste trabalho foi avaliar a indução de resposta imunológica humoral de peptídeos miméticos de T. saginata e sua interação com o antígeno de origem. Material e Métodos Imunização de camundongos fêmea SWISS composto de 4 doses com 14 dias de intervalo e uma 5ª dose, 3 dias após a 4ª dose com fagotopos obtidos através da técnica de Phage Display selecionados por sua reatividade com proteínas extraídas de C. bovis. ELISA (Enzyme-linked Immunosorbent Assay) para titulação dos soros murinos obtidos ao final do programa de imunização e para a confirmação da reatividade dos anticorpos murinos produzidos com proteínas de C. bovis. Western Blotting para comparação com o resultado do ELISA em relação a reatividade dos anticorpos murinos com proteínas de C. bovis. Gráfico 1 Foram testadas diferentes diluições dos soros utilizando as proteínas de C. bovis imobilizadas na microplaca, que após leitura a 492 nm em espectrofotômetro, resultaram no gráfico ao lado com as absorbâncias das amostras nas diferentes diluições. A reatividade foi baixa, ficando em torno de 0,350 para a menor diluição (1:50), mesmo os soros apresentando uma titulação alta (1:8000). Figura 1 Após eletrotransferência para membrana de PVDF da corrida eletroforética das proteínas de C. bovis, os soros dos 4 mimotopos utilizados foram testados (3-6) em conjunto com 2 controles negativos (1 e 2), resultando na figura ao lado, na qual as linhas azuis representam os pesos moleculares em kDa. Apesar de apresentarem algumas bandas não recorrentes no perfil dos controles negativos, foi preciso uma diluição 16 vezes menor (1:500) do que a titulação (1:8000), indicando que houve produção de anticorpos específicos, mas, provavelmente, em baixa quantidade. Conclusão Os resultados indicam que houve produção específica de anticorpos contra os mimotopos, evidenciada pela alta titulação dos soros murinos (1:8000) em comparação com trabalhos similares (Yang et al., 2005, Hell et al., 2009 e Cui et al., 2013) e pelas bandas específicas no perfil de Western Blotting. Porém, os anticorpos gerados não foram capazes de reconhecer, satisfatoriamente, as proteínas de C. bovis, sendo necessários futuros estudos, possivelmente com peptídeos sintéticos, para nova tentativa de produção mais específica de anticorpos durante a imunização dos animais. CUI, J., REN, H. J.; LIU, R. D. ; WANG, L. ; ZHANG, Z. F. ; WANG, Z.Q. Phage-displayed specific polypeptide antigens induce significant protective immunity against Trichinella spirallis infection in BALB/c mice. Vaccine. v. 31, p HELL, R. C., AMIM, P., de ANDRADE, H. M., de AVILA, R. A., FELICORI, L., OLIVEIRA, A. G., OLIVEIRA, C. A., NASCIMENTO, E., TAVARES, C. A., GRANIER, C., & CHAVEZ-OLORTEGUI, C. Immunodiagnosis of human neurocysticercosis using a synthetic peptide selected by phage- display. Clinical Immunology, 131, YANG, W.; LAI, J.; PENG, K.; CHIANG. ; WENG, C. ; SHIUAN, D. Epitope mapping of Mycoplasma hyopneumoniae using phage displayed peptide libraries and the immune responses of the selected phagotopes. Journal of Immunological Methods, v. 304, n. 1-2, p Resultados


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