Resultados e discussão

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1 Resultados e discussão
USO DE CLAE PARA ISOLAMENTO E IDENTIFICAÇÃO DE PRODUTOS NATURAIS Inaiara Casapula (PIBIC/ CNPQ) Germana Dávila dos Santos (PG) Profa Beatriz Helena L.N.Sales Maia Introdução A Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) é uma técnica amplamente utilizada na área de produtos naturais, tanto no isolamento dos metabólitos secundários em extratos vegetais, como na identificação e quantificação desses compostos isolados em outros extratos vegetais. Este trabalho utilizou a técnica de CLAE para identificação e quantificação de compostos isolados de Lonchocarpus filipes e identicação de padrões de Schinus terebinthifolius, em seus respectivos extratos vegetais e suas frações. Obteve-se em cada curva um R2 de 0,9979 para LF-1 e 0,9999 para LF-8, quantificando no extrato de raízes de L. filipes as massas de 13,62 mg de LF-1 e 2,16mg de LF-8 em 100mg do extrato. A espécie S. terebinthifolius apresenta atividade antimicrobiana e análise por CLAE das frações (1-5) do extrato metanólico das folhas da planta em ambiente natural e em condições axênicas foram realizadas comparando com padrões isolados da planta (ácido gálico, galato de metila, galato de etila, quercetina e catequina). Análises dos padrões e das frações realizadas obteve-se o seguinte cromatograma: Usando como comparativo o tempo de retenção e o espectro no ultravioleta. Os resultados evidenciaram que apenas o galato de metila estava presente tanto nas frações 4 e 5 como no extrato da planta axênica, e que estas amostras foram as que apresentaram maior atividade biológica. Metodologia O extrato diclorometânico e os flavonoides de L. filipes, e os extratos, frações e padrões de S. terebinthifolius, foram analisados por CLAE-DAD ( Waters) em uma coluna RP-18 X-Terra, 5µm (250 mm x 4,6 mm), utilizando MeOH, ACN ( grau CLAE) e água miliQ como solventes. Para a espécie L. filipes as análises das frações foram realizadas na condição gradiente ACN:H2O 5:95 a 100:0 em 60 min., fluxo 1 mL.min-1, para a espécie S. terebinthifolius, as análises se deram em condição gradiente de 5:95 MeOH:H2O a 100:0 em um fluxo de 0,8 mL min¹. Figura 1. Cromatograma do Galato de metila, fração 4, Extrato bruto e extrato de planta axenica. da identificação do galato de metila, em 254nm Resultados e discussão Na espécie L. filipes, iniciou-se a identificação de 4 frações purificadas do extrato das raízes, após a identificação procedeu-se com a quantificação no extrato das raízes, mas apenas 2 flavonoides (LF-1 e LF-8) obtiveram pureza de pico suficiente para obtenção da curva de calibração. Para a curva de calibração utilizou se padrão externo, com construção de suas respectivas curvas de calibração em função da área média do pico x da concentração injetada, nas mesmas condições utilizadas para a análise do extrato das raízes. Uma solução estoque de 1,0mg.mL-1 de cada padrão, foi preparada e solubilizada em acetonitrila. Solução padrão cobrindo o espaço linear em 6 níveis de concentração ( 0,01; 0,05; 0,010; 0,25; 0,50 e 1,00 mg mL-1) foram preparadas a partir da solução estoque e o volume final ajustado para 1 mL, em triplicata. Conclusão A metodologia utilizada para a identificação e quantificação das substâncias mostrou-se adequada, com resolução suficiente para a quantificação no extrato de raízes e identificação no extrato de folhas de L. filipes, e identificação do galato de metila nos extratos e frações de extratos de S. terebinthifolius. MALDANER, L, JARDIM, I. C. S. F. O estado da arte da cromatografia líquida de ultra eficiência. Química Nova, SP, Brasil, v. 32, n. 1, p , 2009