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Ligação e mapeamento genético em eucariotos INTRODUÇÃO Depois que Sutton sugeriu a teoria cromossômica da hereditariedade em 1903, várias evidências foram.

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1 Ligação e mapeamento genético em eucariotos INTRODUÇÃO Depois que Sutton sugeriu a teoria cromossômica da hereditariedade em 1903, várias evidências foram acumuladas de que os genes estavam nos cromossomos Como existem muito mais genes do que cromossomos espera- se que vários genes possam estar no mesmo cromossomo Como os cromossomos tem forma linear é esperado que os genes também estejam alinhados ao longo dos cromossomos como "contas de um colar"(isto foi demonstrado por Surtevant em 1913)

2 A SEGREGAÇÃO INDEPENDENTE SEMPRE É VÁLIDA ? Qual seria a relação que os genes tem uns com os outros quando no mesmo cromossomo ? (animação) Podemos determinar que um gene está no mesmo cromossomo pela quebra da 2 a Lei de Mendel (a da segregação independente) Ex. Drosófilas (figura)figura A explicação seria que os locus bn e det estão tão próximos uns dos outros e no mesmo cromossomo. Como conseqüência estão associados e movem-se juntos durante a meiose

3 NOMENCLATURA Os locus carregados em um mesmo cromossomo são ditos "ligados" Grupos de ligação n. haplóide de autossomos + os cromossomos sexuais Ex.1 Drosófila tem 5 grupos de ligação (2N = 8; 3 autossomos + X + Y) Ex.2 Humano tem 24 grupos de ligação (2N = 46; 22 autossomos + X + Y) Obs. Quando não há cromossomos sexuais, considera-se "grupo de ligação" o número haplóide. Ex. Tomateiro (2N = 24 ou seja possui 12 grupos de ligação) Quando o fenótipo da progênie combina características de ambos os parentais, é chamado de recombinante ou não parental Quanto ao arranjo dos alelos em dihíbridos pode ser Cis ou Trans (figura)figura

4 Os genes estão na configuração Cis quando ambos os selvagens ou ambos os recessivos se encontram em um mesmo cromossomo. Trans quando se tem um selvagem e um recessivo no mesmo cromossomo.

5 Quanto ao modo de representação dos alelos nos cromossomos

6 Recombinantes são o produto da meiose possuidores de combinações alélicas diferentes das células haplóides que formaram o diplóide meiótico Os produtos Recombinantes de uma meiose diplóide são mais prontamente detectados em um cruzamento de um heterozigoto e um testador recessivo

7 Esperado Observado 1: 1 Cruzamento teste em Drosófila para 2 locus

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9 CRUZAMENTO DE "DOIS PONTOS É a análise de 2 locus. É útil para evidenciar associação ou não de locus de um mesmo cromossomo A freq. de recombinantes pode ser usada como indicadora da distância entre os genes. Um % de recombinantes = 1 centimorgan. No exemplo, os locus bn e det estão distanciados de 0,5 centimorgans (figura) A relação centimorgan / pares de base é variável entre espécies, sexo, regiões do cromossomo.

10 CRUZAMENTO DE TRÊS PONTOS É a análise de 3 locus, cada um segregando 2 alelos. É útil para verificar a posição relativa de cada um dos locus A análise de 3 locus, cada um segregando 2 alelos controlando a cor do corpo (preto b); cor do olho (púrpura pr) e a morfologia da asa (curvada c) (figura) Os dados são posicionados em "classes recíprocas" colocando-se as parentais como primeiras e as duplo recombinantes como as últimas

11 POSSÍVEIS RESULTADOS DE UM CRUZAMENTO TESTE DA PROGÊNIE DE UM TRIHÍBRIDO b pr c

12 RESULTADOS DE UM CROSSING OVER ENTRE OS LOCUS PRETOS E PÚRPURA EM CROMOSSOMOS DROSÓFILA RESULTADOS DE UM CROSSING OVER DUPLO NAS REGIÕES b - pr - c EM CROMOSSOMOS DE DROSÓFILA

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14 Distâncias de mapa

15 Mapa cromossômico de Drosófila

16 Cálculos Número observado de Duplo Recombinantes (NODR) = 60+72= 132; a freq. é 132/ = 0,88% Freqüência esperada de Duplo Recombinantes (dois eventos independentes ocorrendo simultaneamente regra de multiplicação) (prob. de b pr) x (prob. de pr c) = 0,059 x 0,195 = 0,0115 = 1,15%. Esta percentagem de da 172 que é o Número esperado de Duplo recombinantes (NEDR) Coeficiente de Coincidência (CC) = NODR /NEDR = 132/172 = 0,77 = 77%. Isto significa que somente 77% dos Crossing Over esperados realmente ocorreram Coeficiente de Interferência (CI)= 1 - CC = 1- 0,77 = 0,23 = 23%. Isto significa que 23% dos Crossing Over esperados não ocorreram A interferência é positiva quando a ocorrência do primeiro Crossing Over reduz a chance de ocorrência do segundo

17 A demonstração citológica do Crossing Over em milho (experimento de H. Creighton e B. McClintock)


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