DICIPLINA DE GENÔMICA II PCR-RFLP E SEQUENCIAMENTO

Apresentação em tema: "DICIPLINA DE GENÔMICA II PCR-RFLP E SEQUENCIAMENTO"— Transcrição da apresentação:

1 DICIPLINA DE GENÔMICA II PCR-RFLP E SEQUENCIAMENTO
UNIVERSIDADE FEDERAL DE PELOTAS CENTRO DE DESENVOLVIMENTO TECNOLÓGICO CURSO DE GRADUAÇÃO EM BIOTECNOLOGIA DICIPLINA DE GENÔMICA II AULA PRÁTICA: PCR-RFLP E SEQUENCIAMENTO Helena Strelow Thurow Pelotas, abril de 2011

2 PCR-RFLP

3 Fragmento amplificado: 199pb
Sitio da Enzima BstUI: CGCG

4 Enzymatic cleavage analysis
digestão – AciI ou SfcI DNA PCR eletroforese an á lise em gel Enzymatic cleavage BstU I Electrophoresis Enzyme Agarose gel analysis

5 Amplificação do fragmento do SNP Arg72Pro
199pb

6 Genotipagem das amostras para o SNP Arg72Pro
199pb Títulos, mudar a foto da genotipagem 113pb Arg Arg Arg Arg Pro Arg Pro Arg Pro Pro Arg Pro Arg Arg Arg Arg 86pb

7 Arginina

8 Prolina Arginina

9 Prolina

10

11 SEQUENCIAMENTO

12 2ul 2ul 2ul vortex + sequenciamento
Pré-mix Primer DNA 2ul 2ul 2ul vortex + sequenciamento

13 PRÓXIMAS ETAPAS... PURIFICAÇÃO SEQUENCIAMENTO

14