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Ciências da Natureza e suas Tecnologias - Biologia

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Apresentação em tema: "Ciências da Natureza e suas Tecnologias - Biologia"— Transcrição da apresentação:

1 Ciências da Natureza e suas Tecnologias - Biologia
Ensino Médio, 1ª Série Os ácidos nucléicos e o código genético

2 P BIOLOGIA, 1º Ano (Ensino Médio)
Os ácidos nucléicos e o código genético Conceito: Os Ácidos Nucléicos são assim chamados pelo seu caráter ácido e por terem sido originalmente descobertos no núcleo das células, no séc. XIX. A partir da década de 1940 passaram a ser estudados, pois se descobriu que eles constituem os GENES e são responsáveis pelo armazenamento, na transmissão e no uso da informação genética. Existem dois tipos de Ácidos Nucléicos: a) DNA (Ácido Desoxirribonucléico) b) RNA (Ácido Ribonucléico) 2) Composição Química: são compostos por monômeros chamados nucleotídeos. Estrutura de um nucleotídeo: Fosfato 1 Ácido Fosfórico; 1 Pentose; 1 Base Nitrogenada. Açúcar Nucleosídeo não tem o fosfato. P Base nitrogenada Base Pentose Nucleotídeo

3 Estrutura molecular do fosfato Estrutura molecular do ácido fosfórico
BIOLOGIA, 1º Ano (Ensino Médio) Os ácidos nucléicos e o código genético Formação de um nucleotídeo (clique: animação) Estrutura molecular do fosfato Estrutura molecular do ácido fosfórico H N H Pentose (Ribose) Pentose (Desoxirribose) C CH2 O OH N N C OH C C C H C H C O P O OH N H H H N H C Adenina C OH OH OH H Bases Nitrogenadas Adenina Guanina CITOSINA TIMINA

4 Formação das pontes de Hidrogênio entre Timina e Adenina:
BIOLOGIA, 1º Ano (Ensino Médio) Os ácidos nucléicos e o código genético Formação das pontes de Hidrogênio entre Timina e Adenina: H H H H O H N N C C H C C C C N H N N C H C C N N C O TIMINA H ADENINA PONTES DE HIDROGÊNIO O pareamento se dá unicamente entre a timina e a adenina por duas pontes de hidrogênio.

5 Pontes de Hidrogênio entre a Citosina e a Guanina:
BIOLOGIA, 1º Ano (Ensino Médio) Os ácidos nucléicos e o código genético Pontes de Hidrogênio entre a Citosina e a Guanina: H H N H N N H C C C C C N H N N C C H C N C N O H N CITOSINA GUANINA N PONTES DE HIDROGÊNIO O pareamento se dá unicamente entre a Citosina e a Guanina por três pontes de hidrogênio.

6 Classificação das bases nitrogenadas :
BIOLOGIA, 1º Ano (Ensino Médio) Os ácidos nucléicos e o código genético Classificação das bases nitrogenadas : ADENINA (A) GUANINA (G) ( ) = Nitrogênio ( ) = Carbono Púricas ( ) = Hidrogênio ( ) = Oxigênio TIMINA (T) CITOSINA (C) URACILA (U) Pirimídicas Imagens : Sergeswi/Public Domain (A , B , C e D) / Kemikungen/Public Domain ( E ).

7 T G C G C A T A BIOLOGIA, 1º Ano (Ensino Médio)
Os ácidos nucléicos e o código genético Animação da formação de um trecho do DNA. G C G C T A Imagem : USDA/ ud Federal Govt., USDA A T Base nitrogenada Fósforo pentose

8 DNA e RNA ... Qual a Diferença ?
BIOLOGIA, 1º Ano (Ensino Médio) Os ácidos nucléicos e o código genético DNA e RNA ... Qual a Diferença ? Pentose (Ribose) Pentose (Desoxirribose) NO RNA Pentose do tipo RIBOSE. HOCH2 O OH Fórmula C5 H10 O5 As bases nitrogenadas: são adenina , citosina, guanina e uracila. C C H H H H C C NO DNA Pentose do tipo DESOXIRIBOSE. OH OH H Fórmula C5 H10 O4 Fórmula C5 H10 O5 Fórmula C5 H10 O4 As bases nitrogenadas: são adenina , citosina, guanina e timina.

9 DNA BIOLOGIA, 1º Ano (Ensino Médio)
Os ácidos nucléicos e o código genético DNA É o meio material que armazena as informações biológicas, na forma de código de “letras” A, T, C e G (iniciais das bases nitrogenadas), constituintes dos nucleotídeos. A molécula de DNA é usada como molde para formação do RNA, mas isso só ocorre em alguns trechos da molécula de DNA que codifica uma proteína, chamados de gene. Neste caso, o RNA formado será o mensageiro que levará informação. A transcrição é a síntese de uma molécula de RNA formada a partir desse trecho do DNA. Esse processo só ocorre no núcleo da célula, assim como a duplicação do DNA que é denominada de REPLICAÇÃO. O RNA mensageiro formado contém a informação que determina a sequência de aminoácidos de uma proteína, sendo assim, direciona a síntese proteica. Corresponde a apenas 5% do total de RNA da célula e atua transportando a informação genética do núcleo da célula eucariótica ao citosol, onde ocorrerá a biossíntese protéica e é utilizado como molde nesta biossíntese. Fonte:

10 Transcrição BIOLOGIA, 1º Ano (Ensino Médio)
Os ácidos nucléicos e o código genético RNA ribossômico (RNAr): componente estrutural do ribossomo, corresponde a até 80% do total de RNA da célula; Fonte: RNA transportador (RNAt): transporta aminoácido até os ribossomos; é a menor molécula dos três tipos de RNA; está ligado de forma específica a cada um dos 20 aminoácidos encontrados nas proteínas; e corresponde a 15% do RNA total da célula; Fonte: Transcrição A molécula de DNA é usada como molde para formação do RNA, mas isso só ocorre em alguns trechos da molécula de DNA que, na maioria das vezes, codifica uma proteína, chamados de gene, pois há genes, que formarão moléculas de RNAt ou RNAr, uma vez que só o RNAm contém a informação que determina a sequência de aminoácidos de uma proteína. COMO OCORRE A TRANSCRIÇÃO. CLIQUE AQUI E ACOMPANHE A ANIMAÇÃO a seguir.

11 FRAGMENTO DE UMA MOLÉCULA DE DNA
BIOLOGIA, 1º Ano (Ensino Médio) Os ácidos nucléicos e o código genético FRAGMENTO DE UMA MOLÉCULA DE DNA GENE é um trecho de DNA que na maioria das vezes codifica uma proteína 5’ 3’ PONTES DE HIDROGÊNIO PROMOTOR FIM 3’ 5’ A região promotora que indica a sequência de gene que se ligará a enzima responsável pelo processo de TRANSCRIÇÃO; a RNA polimerase (Enzima). A região promotora que indica o término do processo de TRANSCRIÇÃO do RNA e a dissociação da RNA polimerase. CLIQUE PARA CONTINUAR A ANIMAÇÃO

12 SEPARAÇÃO DAS FITAS DE DNA
BIOLOGIA, 1º Ano (Ensino Médio) Os ácidos nucléicos e o código genético SEPARAÇÃO DAS FITAS DE DNA 5’ T C G A T A G A ’ A G C T A T C T PROMOTOR FIM 3’ 5’ QUEBRA DAS LIGAÇÕES DE HIDROGÊNIO ENTRE AS DUAS CADEIAS DE DNA CLIQUE PARA CONTINUAR A ANIMAÇÃO

13 Reconhece o gene promotor
BIOLOGIA, 1º Ano (Ensino Médio) Os ácidos nucléicos e o código genético Liberação da RNA polimerase C G U G A A U A Síntese da molécula de RNA RIBONUCLEOTIDEO RNA POLIMERASE Reconhece o gene promotor NOVA MOLÉCULA DE RNA FORMADA U C G A U A G A PROMOTOR A G C T A T C T FIM 3’ 5’ CLIQUE PARA CONTINUA A ANIMAÇÃO

14 RESTABELECIMENTO DAS PONTES DE HIDROGÊNIO ENTRE AS DUAS CADEIAS DE DNA
BIOLOGIA, 1º Ano (Ensino Médio) Os ácidos nucléicos e o código genético RESTABELECIMENTO DAS PONTES DE HIDROGÊNIO ENTRE AS DUAS CADEIAS DE DNA 5’ 3’ T C G A T A G A U C G A U A G A 5’ 3’ 3’ PROMOTOR A G C T A T C T FIM 5’ O DNA FOI USADO COMO MOLDE PARA FORMAÇÃO DA MOLÉCULA DE RNA NOVA FITA DE RNAm

15 BIOLOGIA, 1º Ano (Ensino Médio)
Os ácidos nucléicos e o código genético A célula retira os íntrons e religa os éxons, e esses que vão para tradução 5’ 3’ 5’ ÉXONS ÍNTRON ÉXONS ÍNTRON ÉXONS ÍNTRON 3’ ÉXONS ÍNTRON ÉXONS ÍNTRON ÉXONS ÍNTRON 3’ 5’ Éxons: sequência que codifica uma proteína. Íntron: sequência que nada codifica . TRANSCRIÇÃO ÍNTRONS REMOVIDOS POR SPLICING ÉXONS ÍNTRON ÉXONS ÍNTRON ÉXONS ÍNTRON 3’ 5’ RNAm RNA mensageiro editado

16 BIOLOGIA, 1º Ano (Ensino Médio)
Os ácidos nucléicos e o código genético TRADUÇÃO é o nome dado ao processo biológico no qual a sequência nucleotídica de uma molécula de RNAm (RNA mensageiro) é utilizada para ordenar a síntese de uma cadeia polipeptídica com sequência de aminoácidos que determina uma proteína.[1] (FONTE: Um códon corresponde a uma sequência de três nucleotídeos nas moléculas de DNA e RNA, a qual define um aminoácido específico a ser adicionado à cadeia de polipeptídica que será sintetizada. Esses códons são representados pelas letras iniciais das bases nitrogenadas (A, U, C e G) e são organizadas em trincas chamadas de códons, sendo que cada códon corresponde a um aminoácido. O código genético: as quatro bases (A, U, C e G), reunidas três a três , formam 64 códons distintos; dos 64 códons, 61 correspondem aos vinte tipos de aminoácidos que entram na constituição das proteínas, os três restantes indicam o final da informação genética na molécula do RNAm. PRÓXIMO SLIDE

17 BIOLOGIA, 1º Ano (Ensino Médio)
Os ácidos nucléicos e o código genético  2ª U C A G  3ª fenilalanina  serina  tirosina cisteína  serina leucina   PARE  leucina  triptofano  prolin histidina  arginina glutamina  isoleucina treonina aspagina  lisina  arginina  metionina valina alanina  Ác.aspartico  glicina Ác.glutamico  UUU UCU UAU UGU UUC UCC UAC UGC UUA UCA UAA UGA UUG UCG UAG UGG CUU CUU CCU CGU 1ª BASE DO CÓDON CUC CCC CAC CGC CUA CCA CAA CGA CUG CCG CAG CGG ACU AUU AAU AGU AUC ACC AAC AGC AUA ACA AAA AGA AUG ACG AAG AGG GUU GCU GAU GGU GUC GCC GAC GGC GUA GCA GAA GGA GUG GCG GAG GGG

18 Clique para continua a animação .
BIOLOGIA, 1º Ano (Ensino Médio) Os ácidos nucléicos e o código genético C Ó D O N S CCU CGU Clique para continua a animação . CCC CGC GCU CGA GGU CCA GCC CGG GGC ACU CCG GCA AGA GAU AAU UGU GAA CAA GGA CGU ACC UUA AAA GCG AGG GAC AAC UGC GAG CAG GGG CGC ACA UUG AAG Lys Ala Arg Asp Asn Cys Glu Gln Gly His Ile Leu Como a maioria dos aminoácidos podem ser codificados por mais de um códon, dizemos que o código genético é “degenerado”. C Ó D O N S UCU AMINOÁCIDOS UCC CCU UCA ACU GUU CCC UCG ACC GUC UAA UUU CCA AGU ACA UAU GUA UAG AUG UUC CCG AGC ACG UGG UAC GUG UGA Met Phe Pro Ser Thr Trp Tyr Val STOP AMINOÁCIDOS

19 C Ó D O N S ÁC.GLUTÂMICO GLUTAMINA AC.ASPÁTICO ASPARGINA ISOLEUCINA
BIOLOGIA, 1º Ano (Ensino Médio) Os ácidos nucléicos e o código genético C Ó D O N S CCU CGU CCC CGC GCU CGA ÁC.GLUTÂMICO GLUTAMINA GGU CCA AC.ASPÁTICO ASPARGINA ISOLEUCINA LEUCINA ALANINA GCC ARGININA CGG CISTEÍNA GLICINA GGC HISTIDINA ACU CCG LISINA GCA AGA GAU AAU UGU GAA CAA GGA CGU ACC UCA AAA GCG AGG GAC AAC UGC GAG CAG GGG CGC ACA UCG AAG Ala Arg Asp Asn Cys Glu Gln Gly His Ile Leu Lys C Ó D O N S AMINOÁCIDOS UCU UCC CCU UCA ACU GUU FENILALANINA TRIPTOFANO METIONINA TREONINA PROLINA VALINA CCC UCG ACC GUC SERINA TIROSINA UAA UUU CCA AGU ACA UAU GUA UAG AUG UUC CCG AGC ACG UGG UAC GUG UGA Met Phe Pro Ser Thr Trp Tyr Val STOP AMINOÁCIDOS

20 BIOLOGIA, 1º Ano (Ensino Médio)
Os ácidos nucléicos e o código genético A tradução gênica: Em um gene, a sequência de bases de uma das cadeias do DNA é transcrita na forma de uma molécula de RNAm, que por sua vez será traduzida em uma cadeia de polipeptídica. Cada trinca de base no RNAm (códon) corresponde a um aminoácido na proteína. (Animação baseada: em Campbell e cols., 1999) Cadeia de DNA Cadeia do DNA-molde para o RNA T A C C A A A C C G A G TRANSCRIÇÃO GÊNICA U U U U G G U A Cadeia do RNA molde G G G G Códon Códon Códon Códon Tradução gênica Gly Ser Trp Phe Polipeptídio Aminoácido Ligação peptídica Clique para iniciar a animação

21 SUB UNIDADE MAIOR BIOLOGIA, 1º Ano (Ensino Médio)
Os ácidos nucléicos e o código genético O RNAt transporta metionina e inicia a tradução gênica, encaixa-se no local do ribossomo chamado de sítio P (de Peptidil), o RNAt tem um anticódon (UAC) que se liga ao códon do RNAm (AUG). SUB UNIDADE MAIOR A ligação peptídica é formada O RNAt contém um anticódon que é complementar ao códon do RNAm com o qual se liga no sítio A. RNAt RNAt Sitio P Sitio A A U G C RNA mensageiro O 1º códon é tipicamente AUG Sub unidade menor Clique aqui para continuar a animação Clique aqui para iniciar a animação

22 BIOLOGIA, 1º Ano (Ensino Médio)
Os ácidos nucléicos e o código genético Ligação peptídica Met Arg Saída do RNAt À medida que o ribossomo se desloca sobre uma cadeia de RNAm vai traduzindo sua mensagem na forma de uma cadeia Polipeptídica . A U G C RNA mensageiro Deslocamento do ribossomo Clique aqui para continuar a animação

23 BIOLOGIA, 1º Ano (Ensino Médio)
Os ácidos nucléicos e o código genético Ligação peptídica Met Arg Ile Saída do RNAt À medida que o ribossomo se desloca sobre uma cadeia de RNAm vai traduzindo sua mensagem na forma de uma cadeia Polipeptídica. A U G C RNA mensageiro Deslocamento do ribossomo Clique aqui para continuar a animação

24 BIOLOGIA, 1º Ano (Ensino Médio)
Os ácidos nucléicos e o código genético Ligação peptídica Met Arg Ile Ala Saída do RNAt À medida que o ribossomo se desloca sobre uma cadeia de RNAm vai traduzindo sua mensagem na forma de uma cadeia Polipeptídica . A U G C RNA mensageiro Deslocamento do ribossomo Clique aqui para continuar a animação

25 BIOLOGIA, 1º Ano (Ensino Médio)
Os ácidos nucléicos e o código genético Após o deslocamento do ribossomo, finalmente chega ao códon que não codifica nenhum aminoácido correspondente (UAG= Stop códon). Quando isso ocorre, o sítio A é ocupado por uma proteína denominada fator de liberação e todos os participantes do processo se separam. Fator de liberação Clique aqui e observe : Met Arg Ile Ala Leu F L Saída do RNAt A U G C RNA mensageiro (UAG= Stop códon) Deslocamento do ribossomo Clique aqui para continuar a animação

26 Polipeptídio recém sintetizado
BIOLOGIA, 1º Ano (Ensino Médio) Os ácidos nucléicos e o código genético Depois que esse fator se ligar ao códon (UAG), o aminoácido anterior dissocia-se do complexo ribossômico. O ribossomo se dissocia, assim como o fator de liberação e o recém formado polipeptídio é liberado. A proteína é formada a partir da informação da sequência de códons do RNAm e assim finaliza a tradução. Met Arg Ile Ala Leu Subunidade maior Polipeptídio recém sintetizado F L A U G C RNA mensageiro Sub unidade menor FIM DA TRADUÇÃO

27 BIOLOGIA, 1º Ano (Ensino Médio)
Os ácidos nucléicos e o código genético À medida que um ribossomo se desloca sobre uma cadeia de RNAm, traduzindo sua mensagem na forma de uma cadeia polipeptídica, outro ribossomo pode também iniciar a tradução do mesmo RNAm. Assim, vários ribossomos podem se encaixar sucessivamente no início de um RNAm, percorrendo-o e saindo na extremidade oposta, todos sintetizando o mesmo tipo de cadeia polipeptídica. O conjunto formado por vários ribossomos, traduzindo um mesmo RNAm é chamado de POLIRRIBOSSOMO.

28 Situação-problema BIOLOGIA, 1º Ano (Ensino Médio)
Os ácidos nucléicos e o código genético Situação-problema 1- (U.F. Uberlândia-MG) O aminoácido leucina pode ser codificado por mais de uma trinca de nucleotídeos do DNA (AAT, GAA e outras). Assim sendo, podemos dizer que: I. o código genético é degenerado, o que significa que um aminoácido pode ser codificado por mais de uma trinca; II. um aminoácido pode ser codificado por apenas uma trinca de nucleotídeos de DNA; III. assim como a leucina pode ser codificada por diferentes trincas, uma determinada trinca também pode codificar diferentes aminoácidos. Estão corretas as afirmativas: a) Apenas III. d) I e III. b) Apenas II. e) nenhuma delas. c) Apenas I. Clique e veja a resposta: Letra C

29 BIOLOGIA, 1º Ano (Ensino Médio)
Os ácidos nucléicos e o código genético 2. (U. Alfenas-MG) Uma proteína tem sua sequência de aminoácidos determinada pelas trincas de bases presentes na molécula de DNA correspondente. Abaixo temos algumas dessas trincas e os aminoácidos que as mesmas codificam. Se um segmento de RNA mensageiro tiver a seguinte sequência: CGG UUG UCC CCC CAU, a sequência correta de aminoácidos no segmento proteico será: a) leucina – prolina – histidina – arginina – serina; b) serina – histidina – arginina – leucina – prolina; c) arginina – prolina – serina – leucina – histidina; d) leucina – histidina – serina – arginina – prolina; e) arginina – leucina – serina – prolina – histidina; Sequencia de base do DNA aminoácidos AAC LEUCINA GTA HISTIDINA AGG SERINA GCC ARGININA GGG PROLINA 2ºAAC (LEUCINA) 5ºGTA (HISTIDINA) 3ºAGG (SERINA) 1ºGCC (ARGININA) RNAm 4ºGGG (PROLINA) CGG UUG UCC CCC CAU GCC AAC AGG GGG GTA DNA CLIQUE AQUI E VEJA A RESPOSTA

30 b) A síntese de RNA a partir de DNA recebe o nome de transcrição.
BIOLOGIA, 1º Ano (Ensino Médio) Os ácidos nucléicos e o código genético 3. (UEMS) Em relação aos ácidos nucléicos, a única afirmativa incorreta é: a) Participam da síntese proteica que ocorre nos polissomos, localizados no citoplasma das células eucariontes. b) A síntese de RNA a partir de DNA recebe o nome de transcrição. c) Adenina, timina, citosina e guanina são as bases nitrogenadas do DNA. d) Hoje em dia, técnicas modernas de estudo do DNA estão sendo muito usadas em paternidades duvidosas e crimes. e) Em seres como os vírus, encontramos os dois tipos de ácidos nucléicos, DNA e RNA, espalhados no citoplasma viral. RESPOSTA: CLIQUE AQUI OS VÍRUS OU TEM DNA OU RNA NO SEU CITOPLASMA VIRAL.

31 e) a interação do aminoácido com o seu códon específico.
BIOLOGIA, 1º Ano (Ensino Médio) Os ácidos nucléicos e o código genético 4. (UESC-BA) Um evento decisivo no mecanismo da decodificação da informação genética para garantir a fidelidade da tradução é: a) a ligação correta, através de pontes de hidrogênio, entre o anticódon e um determinado aminoácido; b) a formação das ligações peptídicas entre dois aminoácidos, na construção da cadeia polipeptídica; c) a formação do complexo ribossômico pela associação das suas duas subunidades maior e menor; d) o reconhecimento códon/anticódon estabelecido pelo emparelhamento entre trios complementares do RNAt e do RNAm; e) a interação do aminoácido com o seu códon específico.

32 a) Proteases b) Plasmídios c) RNA-r d) RNA-t e) RNA-m
BIOLOGIA, 1º Ano (Ensino Médio) Os ácidos nucléicos e o código genético 5. (UFRN) Observe as sequências de nucleotídeos de um vírus de RNA: 5’ GCA UCA CAC CUC AUU GCG UAG 3’ Considerando que esse segmento de RNA codifica um determinado peptídeo, é correto afirmar: a) Os códons dessa sequência sinalizam os mesmos aminoácidos em seres humanos. b) A inserção de um nucleotídeo entre a 4ª e a 5ª base não altera o código genético. c) Os códons GCA e GCG são degenerados porque codificam aminoácidos diferentes. d) Os anticódons do 1º e do 2º códon dessa sequência são, respectivamente, GCA e UGA. Os anticódons são CGU e AGU. 6. (UFPE) Nos últimos anos, a biologia molecular tem fornecido ferramentas úteis para a produção de plantas e animais transgênicos. As informações armazenadas nas moléculas de DNA são traduzidas em proteínas por meio de moléculas intermediárias denominadas: a) Proteases b) Plasmídios c) RNA-r d) RNA-t e) RNA-m

33 BIOLOGIA, 1º Ano (Ensino Médio)
Os ácidos nucléicos e o código genético 7. (PUC-RJ) Com relação ao código genético e à síntese de proteínas, assinale a afirmativa falsa. a) Todas as células do corpo têm a mesma coleção de genes, mas, apesar disso, encontramos células com formas e funções diferentes. Esse processo chama-se diferenciação celular. b) Os ácidos nucléicos podem aparecer livres na célula ou podem estar associados a proteínas, compondo os cromossomos e ribossomos na forma de moléculas complexas de nucleoproteínas. c) Duas grandes etapas estão envolvidas na síntese das proteínas: a transcrição, que compreende a passagem do código genético do DNA para o RNA, e a tradução, que compreende o trabalho do RNA de organização dos aminoácidos na sequência determinada pelo código genético. d) A mutação constitui uma alteração na sequência de bases nitrogenadas de um segmento de DNA e pode ser provocada por radiações, por raios cósmicos, por raios-X, ou mesmo por exposição aos raios ultravioletas do sol. e) Na molécula de DNA, encontramos sempre desoxirribose e cinco tipos de bases: adenina, guanina, citosina, timina e uracila. Uracila só tem no RNA

34 Siglas de vestibulares :
BIOLOGIA, 1º Ano (Ensino Médio) Os ácidos nucléicos e o código genético Siglas de vestibulares : U.F. Uberlândia-MG - Universidade Federal de Uberlândia –MG UNIFENAS - Universidade José do Rosário Vellano -MG UEMS – Universidade Estatual de Mato grosso do sul UESC-BA - Universidade Estadual de Santa Cruz - UESC, Ilhéus-BA UFRN - Universidade Federal do Rio Grande do Norte. UFPE- Universidade Federal de Pernambuco. PUC-RJ - Pontifícia Universidade Católica do Rio de Janeiro - PUC

35 Tabela de Imagens n° do slide
direito da imagem como está ao lado da foto link do site onde se consegiu a informação Data do Acesso 4 Mrbean427/Creative Commons Attribution-Share Alike 3.0 Unported license. 21/08/2012 7A Sergeswi/Public Domain 7B 7C 7D 7E Kemikungen/Public Domain


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