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Microscopia Eletrônica
Prof. José Lino Neto – UFV
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Microscópio de Luz - Cortes -
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Microscópio de Luz - superfície -
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Microscópio Eletrônico de Transmissão - MET
Microscópio de Luz - ML Microscópio Eletrônico de Transmissão - MET Microscópio Eletrônico de Varredura - MEV
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ML: 1.000x 0,2 µm MET: x 0,0002 µm MEV: 10 a x 0,02 µm
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MET MEV
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Epitélio da mucosa intestinal
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Filamento
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Filamento
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Canhão de elétrons
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Canhão de elétrons
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Lentes magnéticas
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Lentes magnéticas
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Câmara
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Câmara e porta-amostra
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Porta amostra - stubs
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Formação da imagem
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Análise da imagem
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Montagem nos suportes - Stubs Secagem ao ponto crítico
Preparo do material Fixação Desidratação Montagem nos suportes - Stubs Secagem ao ponto crítico Sputter coat MEV
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Protocolo 1- Fixar em solução de glutaraldeído e/ou paraformaldeído em tampão cacodilato de sódio (ou fosfato) a 0,1M (animal) ou 0,05M (vegetal) em pH 7,2. Tempo: 2 a 24 hs. 2- Lavar por 1-2 hs em vários banhos do tampão; 3- Pós-fixar em tetróxido de ósmio por 1 h ao abrigo da luz; 4- Lavar em 2 banhos de 15 min em tampão caco, ou água destilada; 5- Desidratar as peças, mantendo-as submergidas, em serie crescente de etanol ou acetona (50% 70% 80% 95% 100%). Cada etapa deve ser feita em dois banhos de 15 min cada; 6- Ponto crítico; 7- Montar as peças secas nos stubs; 8- Sputter coat para proceder a cobertura com ouro.
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Ponto-crítico
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Sputter coat
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“slide show”
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“slide show”
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“slide show”
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“slide show” Organelas celulares
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“slide show” Dinoflagelados
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“slide show” Cultura de células
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“slide show” Espinha de ouriço
Superfície foliar de Corymbia citriodora
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Espermatozóides de hamster
“slide show” Espermatozóides de hamster
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“slide show” Ammoplanops moenkopi (Sphecidae Pemphredoninae)
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“slide show” Eucerceris superba (Sphecidae Philanthinae)
Dryudella montana (Sphecidae: Astatinae)
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“slide show” Epitélio traqueal
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“slide show” Pata de lagarta
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“slide show” Antena de Lepidoptera
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“slide show” Esporo de um fungo Detalhe da para de um inseto
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“slide show”
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Fig. 1 Objetiva = 40x Optovar = 3,5x Ampliação = 15x Fig. 2
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