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RNA : Transcrição e Processamento
Paula de Vasconcellos Golin
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Transcrição “a arte de transformar”
RNA Transcrição “a arte de transformar”
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Conceitos Gerais ribossomos rRNA estrutural DNA mRNA proteínas tRNA
acoplador transportador
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Transcrição “a arte de transformar”
Decisão de iniciar - controle da situação Temporal / Momento - estado fisiológico Específico / Seletivo - privilégio de poucos
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Transcrição “a arte de transformar”
Complementaridade e antiparalelismo ( T = U) Síntese 5' 3' RNA Polimerase (RNAP)
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Transcrição “a arte de transformar”
RNAPs: reconhecem e ligam-se desnaturam DNA mantém estável a dupla fita aberta mantém estável DNA:RNA terminam síntese restauram DNA
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Transcrição “a arte de transformar”
RNAP I rRNAs nucléolo genes um ao lado do outro RNAP II mRNA RNAP III tRNA e outros
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Transcrição “a arte de transformar”
RNAPs : nunca sozinhas proteínas acessórias = fatores de transcrição sítio de início da transcrição seqüências regulatórias (promotor e enhancer)
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Transcrição “a arte de transformar”
Iniciação – ligação do complexo RNAP II ao DNA Alongamento – adição de nt ao mRNA crescente Terminação – liberação de mRNA e RNAP II
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Complexo de iniciação Promotor Cascata de fatores + RNAP II promotor
região transcrita Promotor Cascata de fatores + RNAP II Complexo de iniciação
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Transcrição “a arte de transformar”
Enhancers em ação
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Transcrição “a arte de transformar”
Alongamento CIT desfeito Síntese do mRNA propriamente dita Duplex híbrido DNA:RNA Correção de erros
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Transcrição “a arte de transformar”
5´ ´ “bolha de transcrição”
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Transcrição “a arte de transformar”
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Transcrição “a arte de transformar”
Terminação regiões consenso no DNA molde – ricas em T clivagem (corte)
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Transcrição “a arte de transformar”
Resumindo... CAT Box unidade de transcrição
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Transcrição “a arte de transformar”
rRNA - RNAP I 3 complexos protéicos acessórios promotores: -2 domínios semelhantes RNAPII tRNA - RNAP III - 1 domínio semelhante RNAPII - 2 regiões controladoras internas (ICRs)
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RNA Processamento “a arte de proteger e tornar útil”
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Conceitos Gerais DNA mRNA Proteína transcrição tradução mRNA pré-mRNA
processamento
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Processamento “a arte de proteger e tornar útil”
Capping - cap 5' Polyadenylation - cauda poly A Splicing – excisão de introns
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Processamento “a arte de proteger e tornar útil”
Capping – cap 5' O que é: adição de grupo metil Local: primeiro nucleotídeo 5' Funções: proteção facilitar transporte e splicing Quando: assim que possível
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Processamento “a arte de proteger e tornar útil”
O Cap
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Processamento “a arte de proteger e tornar útil”
Capping
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Processamento “a arte de proteger e tornar útil”
Polyadenylation - cauda poly A O que é: adição de aprox 200 As Local: na extremidade 3' Funções: facilitar transporte e tradução estabilizar Quando: após terminação
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Processamento “a arte de proteger e tornar útil”
Polyadenylation
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Processamento “a arte de proteger e tornar útil”
Estrutura protegida
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Processamento “a arte de proteger e tornar útil”
- Exons porção codificadora presente no mRNA - Introns porção não codificadora não presente no mRNA
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Processamento “a arte de proteger e tornar útil”
Splicing O que é: retirada de introns, fusão de exons Local: regra GU-AG, sinalizado por branch point A Função: tornar útil Quando: logo após cap e poli A
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Processamento “a arte de proteger e tornar útil”
DNA molde Pré-mRNA
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Processamento “a arte de proteger e tornar útil”
Splicing mediado por spliceossomo: spliceossomo = vários snRNPs (U1, U2...) + ptns - ajuda a clivar no sítio de splicing - remove intron - impede afastamento dos exons - une os exons
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Processamento “a arte de proteger e tornar útil”
Splicing por spliceossomo
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Processamento “a arte de proteger e tornar útil”
Auto-splicing sem atuação de spliceossomos
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Processamento “a arte de proteger e tornar útil”
Auto-splicing
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Processamento “a arte de proteger e tornar útil”
Bases em comum
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