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PublicouMariana Sa Alterado mais de 10 anos atrás
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Vírus de genomas RNA e DNA que infectam hospedeiros vertebrados
O ácido nucléico viral contém a informação necessária para replicar, montar e espalhar os virions 7 tipos de material genético
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Três estratégias comuns dos vírus:
1- Todos têm um genoma (ácido nucleico) empacotado em um capsídeo proteico; 2- No genoma viral encontram-se as informações necessárias para iniciar e concluir o ciclo infeccioso dentro de uma célula permissiva e susceptível; 3- Todos os genomas virais são capazes de se estabelecer em uma população celular, para que sua “sobrevivência” seja assegurada. Estas estratégias visam o seguinte objetivo: PERMANÊNCIA
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Ciclo de replicação/infecção compreende:
O Ciclo de infecção: também chamado de “ciclo de replicação” Ciclo de replicação/infecção compreende: Todos os eventos que uma única partícula viral atribuirá à maquinaria da célula hospedeira, ou seja ela é a responsável pela replicação do vírus: Ocorre em um tempo relativamente curto; Ocorre a liberação de muitas partículas virais.
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Como a natureza dos genomas virais interferem na forma de replicação e estabilidade viral?
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Pontos chaves que tornam a vida dos estudantes de Virologia mais fácil
Todos os genomas virais DEVEM ser convertidos em mRNA que serão traduzidos nos ribossomos das células hospedeiras TODOS OS VÍRUS DO PLANETA SEGUEM ESSA REGRA: SEM EXCEÇÃO ATÉ O MOMENTO!!!!! TODOS OS VÍRUS SÃO PARASITAS DA MAQUINARIA DE TRADUÇÃO DAS CÉLULAS HOSPEDEIRAS
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Estratégias de Replicação
Vírus de DNA
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ESTRATÉGIAS DOS VÍRUS DNA DE REPLICAÇÃO NUCLEAR
Necessidades: 1) Transcrever mRNA para a síntese de proteínas virais Responsável: RNA polimerase dependente de DNA, mais proteínas adicionais todos “emprestados”da célula hospedeira
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2) Replicar o DNA para replicação viral
Responsável: DNA polimerase dependente de DNA TUDO OCORRE DENTRO DO NÚCLEO DA CÉLULA HOSPEDEIRA E PORTANTO O GENOMA DESTES VÍRUS NÃO É TÃO GRANDE! 3) Traduzir as proteínas virais no citoplasma da célula Responsável: maquinaria de síntese proteica da célula hospedeira
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Fase inicial de síntese mRNA para proteínas precoces (“E”- early ou immediate early)
As duas fitas do genoma são transcritas a mRNA Adapted from Broker,T.R. In Processing of RNA. (Apirion, D ed) , 1984
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Proteínas Precoces ou muito precoces:
Proteínas imediatas-precoces Proteínas Precoces ou muito precoces: Necessárias para a síntese (replicação ) do DNA viral Alteram a expressão dos genes do hospedeiro Interferem na ação de anti-virais Interferem nos ciclos de regulação normal da célula Dapted from Broker,T.R. In Processing of RNA. (Apirion, D ed)
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TRANSCRIÇÃO MUITO PRECOCE
α-mRNAs (IMMEDIATE-EARLY) EVENTOS INICIAIS SJ Flint et al. Principles of Virology (2004)
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Genes Precoces/Produtos
Replicação DNA Transcrição e modificação de RNA Poucas proteínas estruturais são expressas
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TRANSCRIÇÃO PRECOCE β-mRNAs (early) codificam:
- DNA polimerase - Proteínas de ligação ao DNA - Timidina quinase - Ribonucleotídeo redutase Resultados em síntese de proteínas β diminuição da transcrição de α -mRNA 13
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Transcrição Tardia -LATE()
Provavelmente proteínas diminuem a expressão das β. Proteínas embaladas são necessárias para a transcrição do gene α para a próxima infecção. SJ Flint et al. Principles of Virology (2004)C
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Genomas Virais – DNA simples fita (ssDNA)
5 famílias Parvoviridade – Circoviridae (de importância econômica) O grande problema dos ssDNA: Para síntese de RNA é necessário o DNA dupla fita: - Portanto, ssDNA deverá ser convertida a dsDNA e posteriormente o mRNA será sintetizado.
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EXEMPLOS DE VÍRUS DE DNA DUPLA FITA DE REPLICAÇÃO NUCLEAR
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PAPILOMAVIRUS POLIOMAVIRUS
pequenos (40-60nm) capsideo icosaédrico não envelopados genoma: ds DNA (circular)
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Vírus com molécula de DNA circular de duplo filamento
HPV: Papilomavírus humano >100 tipos identificados ~30–40 anogenitais ~15–20 de tipo oncogênico incluem 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 58 HPV 16 (54%) e HPV 18 (13%) foram responsáveis pela maioria dos cânceres cervicais em todo o mundo. Tipos não-oncogênicos incluem: 6, 11, 40, 42, 43, 44, 54. HPV 6 e 11 são mais frequentemente associados a verrugas genitais externas. Vírus com molécula de DNA circular de duplo filamento
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ADENOVIRUS linear, dupla fita de DNA Não envelopado icosaedrico
70nm de diametro
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Replicam no núcleo das células hospedeiras;
~ após 40 minutos da penetração na célula, os vírions podem ser observados próximos ao núcleo
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A transcrição dos genes é realizada pela maquinaria célula.
Alguns produtos dos genes virais interferem com o controle do ciclo celular, e alguns adenovírus possuem potencial oncogênico. Os adenovírus (AdVs) possuem a capacidade de infectar uma grande variedade de células que não estão em divisão. Adenovírus são encontrados em humanos, diversas espécies de mamíferos e aves e, em geral, são pouco patogênicos.
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Vírus Herpéticos 120 a 300 nm Genoma DNA de fita dupla
Capsídeo - simetria icosaédrica Tegumento com proteínas e enzimas virais Envelope lipoproteíco com espículas de glicoproteínas
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HERPESVIRUS herpes simplex virus Epstein Barr virus
Varicella zoster virus electron micrograph by Linda Stannard:
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PROTEÍNAS ESTRUTURAIS DO VÍRUS
HSV-1 - REPLICAÇÃO gD FASE IMEDIATA 2-4h PÓS-INFECÇÃO ICP0 – ICP4 – ICP22 ICP27 – ICP47 FASE PRECOCE 5-7h PÓS-INFECÇÃO DNA POLIMERASE VIRAL REPLICAÇÃO DNA VIRAL FASE TARDIA PROTEÍNAS ESTRUTURAIS DO VÍRUS FONTE: Fields Virology 4ª ed. (2001)
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PARVOVÍRUS Pequeno vírus de DNA Replica o seu DNA no núcleo
parvo = pequeno (18-25nm) Causam doenças em mamíferos Replica o seu DNA no núcleo Genoma simples fita de DNA Simetria icosaédrica
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VÍRUS DNA DE REPLICAÇÃO CITOPLASMÁTICA
Precisam ter genes para codificar DNA e RNA polimerases citoplasmáticas. Precisam ter genes para codificar proteínas acessórias para a síntese do RNA e DNA. Precisam de genomas maiores!!!!! Ex: família dos poxvírus (100x mais DNA do que os vírus de DNA de replicação nuclear)
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TRANSCRIÇÃO DOS VÍRUS DNA DE REPLICAÇÃO CITOPLASMÁTICA
Ocorre no citoplasma da célula hospedeira RNA polimerase viral empacotada no interior do virion Enzimas de modificações do mRNA (metilação, poliadenilação) contidas no virion
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EXEMPLO: POXVÍRUS lb - lateral c - core
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Estratégias de Replicação
Vírus de RNA
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Vírus de genoma RNA são muito abundantes no planeta TERRA
Genomas Virais – RNA Vírus de genoma RNA são muito abundantes no planeta TERRA RNA RNA RNA pol. depende de RNA
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Genomas Virais - Definições
(+) fita senso positivo - mRNA pode ser imediatamente traduzido na células hospedeira. (-) fita senso negativo - complemento da fita positiva; não pode ser traduzido.
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Não necessita da síntese de mRNA
Genoma: Fita RNA senso-positivo proteínas (+) senso mRNA AAA
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Genomas Virais – Simples fita RNA (ssRNA) Senso +
Envolvem 22 famílias virais 8 infectam humanos Os genomas de ssRNA (+) são traduzidos diretamente São susceptíveis a degradação por fatores ambientais Picornaviridae Caliciviridae Astroviridae Coronaviridae Arteriviridae Flaviviridae Retroviridae Togaviridae
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mRNA monocistrônico AAAAAAAA RIBOSOMES mRNA PROTEIN Fazer um transcrito primário e usar splicing alternativo Fazer muitas proteínas e cortá-las em pequenas proteínas Incluir recursos especiais no mRNA que permitem ribossomos para ligar internamente.
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Sítio de entrada interna no ribossomo (IRES)
GENOMA RNA (SENSO +) VPg AAAAA Codon de terminação POLIPROTEÍNA Codon de iniciação
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Genoma RNA (+ SENSO) AAAAA Tradução
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Replicação do RNA GENOMA RNA (+ SENSO) VPg 3’ RNA (- SENSO) VPg 3’
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PICORNAVIRUS Pequeno Icosaédrico RNA senso positivo Não envelopado
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Genomas Virais – Simples fita RNA Senso -
7 Famílias Retroviridae Dessas famílias, muitos vírus são mortais Incluem vírus que infectam mamíferos: Paramixovirudae Rabdoviridae Ortomyxoviridae RNA polimerase deverá ser empacotada no vírion Necessitam sintetizar RNA (+)
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Necessita da síntese de mRNA
Genoma: Fita RNA senso-negativo RNA polimerase será embalada no vírion proteínas (+) senso mRNA AAA (-) senso genomic RNA Será utilizada para modificar o RNA
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FITA NEGATIVA NÃO SEGMENTADA
Exemplos: Rabdovirus Paramixovirus Filovirus
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RABDOVIRUS Glicoproteínas Proteínas M Bicamada lipídica (RNA)
Complexo Proteico Proteínas M Bicamada lipídica (RNA)
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Esquema extracelular Proteína M polimerase intracelular
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RNA FITA NEGATIVA SEGMENTADA -Família ortomixoviridae- Influenza
RNA fita simples polaridade negativa, com 8 (influenza A), 7 (influenza B) ou 6 (influenza C) segmentos Com extensão total de 10 a 13.6 kb. Capsídeo proteico esférico ou pleiomórfico; Envelopado. Genoma segmentado: facilita a troca dos segmentos genômicos entre vírus das diferentes espécies quando infectam a mesma célula.
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Genomas Virais – Dupla Fita de RNA
RNA polimerase deve ser embalada em virion proteins (+ve) sense mRNA AAA Double-stranded genomic RNA Enzimas de RNA modificadores são embalados em virion.
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Genomas Virais – Dupla fita RNA (dsRNA)
Envolvem 7 famílias virais Muitos dos genomas dsRNA são segmentados Alto índice de mutações e rearranjos É o caso dos Rotavírus
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FAMÍLIA DOS REOVÍRUS GENOMA: DUPLA FITA RNA RNA polimerase 5’ e
enzimas de Capsídeo externo Capsídeo interno
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FAMÍLIA DOS REOVÍRUS Inclui: -REOVÍRUS -ROTAVÍRUS
Importantes patógenos humanos ORBIVÍRUS Inclui vírus causador de febre em galinhas
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ROTAVÍRUS Erskine Palmer, CDC
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Genomas Virais – Simples fita RNA Senso + com DNA intermediário
RNA DNA DNA pol. depende de RNA (transcriptase reversa) Célula hospedeira sintetizará e reconhecerá o mRNA viral
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Genomas Virais – Simples fita RNA Senso + com DNA intermediário
Família Retroviridae Patógeno humano significante: HIV Transcriptase Reversa deve estar empacotada no virion.
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Genoma HIV
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RETROVIRUS Vírus RNA de senso - Vírus RNA de senso + (não retrovírus)
Genoma DNA polimerase dependente de RNA- (transcriptase reversa) Infectividade do RNA Evento inicial na células RNA de polaridade positiva Sim Não infeccioso Trancrição reversa Vírus RNA de senso + (não retrovírus) Genoma RNA polimerase dependente de RNA Infectividade do RNA Evento inicial na células RNA de polaridade positiva Sim Infeccioso Tradução Vírus RNA de senso - Genoma RNA polimerase dependente de RNA Infectividade do RNA Evento inicial na células RNA de polaridade negativa Sim Não Infeccioso Replicação
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