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组织学与胚胎学 Histology and Embryology 采用教材:《组织学与胚胎学》 6 版 学时安排:讲课 36 学时;实习 36 学时 实习必备: 1. 组织学与胚胎学实习指导 2. 组织胚胎学实习图谱 主讲教师:蒋杞英.

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1 组织学与胚胎学 Histology and Embryology 采用教材:《组织学与胚胎学》 6 版 学时安排:讲课 36 学时;实习 36 学时 实习必备: 1. 组织学与胚胎学实习指导 2. 组织胚胎学实习图谱 主讲教师:蒋杞英

2 第一章 绪 论 一、组织胚胎学的研究内容和意义 组织学是研究人体细微结构与机能关系 的科学。 细胞+细胞外基质 上皮组织 结缔组织 肌组织 神经组织 组织 器官与系统 细胞学 总论 各论

3 胚胎学是研究人体发生、分化、生长发 育过程及其规律的学科。 受精卵 成熟胎儿 ( 单细胞 ) ( 多细胞 ) 双胎、多胎、畸形等内容. 组织学 生理学、病理学 生物化学、药理学 胚胎学 临床各科 280 天 

4 二. 组织学发展简史和当代组织学 自 学

5 三、组胚学技术简介 1 、常用计量单位:微米 (  m) 、纳米 (nm) 1 mm = 1000  m 1  m = 1000 nm 2 、工具: 显微镜:光镜 (Light Microscope, LM) 电镜 (Electrical Microscope, EM) 3 、标本:组织学切片-石蜡切片、冰冻切片 涂片、铺片、磨片

6 冷冻切片箱

7 普通光镜

8 特殊光学显微镜 荧光显微镜 用于观察组织、细胞中有 自发荧光、诱发荧光或经荧光染料染色 或标记的结构。 相差显微镜 主要用于观察体外培养中 活细胞的形态结构。 激光共聚焦扫描显微镜 可对细胞内部 非侵入式光学断层扫描成像,可进行一 系列亚细胞水平的结构和功能研究 。

9 4 、常用染色方法 H E 染色法: 苏木精 (Hematoxylin) 伊红 (Eosin) 碱性染料 酸性染料 显示嗜碱性结构 显示嗜酸性结构 细胞核 ( 蓝紫色 ) 细胞质 ( 粉红色 )

10 HE 染色标本

11 HE 染 色 嗜碱性:易被碱性染料着色 嗜酸性:易被酸性染料着色 中 性:与两种染料的亲和力都不强 特殊染色 银染甲苯胺蓝

12 甲苯胺蓝染色技术 甲苯胺蓝 ( toluidine ) 染色技术 甲苯胺蓝: 甲苯胺蓝: – 是蓝色的碱性染料。 紫红色 – 将细胞内、外的某些物质染成紫红色。 – 这种染色现象称异染性 (metachromasia) 。 特殊染色:

13 硝酸银、氯化金染色技术 硝酸银氯化金: 硝酸银、氯化金: – 硝酸银氯化金 – 硝酸银、氯化金颗粒可附着在细胞结构的表面 而呈棕黑色或棕黄色. 亲银性 – 银染中,有些组织结构可直接使硝酸银还原而 显色,称为亲银性 。 嗜银性. – 银染中,有些组织结构不能直接使硝酸银还原, 必须加入还原剂方能显色,称为嗜银性.

14 银染标本

15 透射电子显微镜 透射电子显微镜 (transmission electron microscope,TEM) 须用戍二醛或锇酸固定,树脂包埋, 厚 50 ~ 80nm 的超薄切片,再经铅盐等重金属盐染色。 超微结构 。 电镜下所见结构称超微结构 。 电子密度高、低。 正染色;负染色。

16

17 透射电镜照片

18 扫描电子显微镜技术 扫描电子显微镜技术 ( scanning electron microscope, SEM ) 扫描电子显微镜技术要观察的组织不需 制成切片。 固定后的标本,在其表面喷镀金,在荧 光屏上即可显示细胞或组织表面的立体 结构,如细胞表面的突起、微绒毛、纤 毛等。

19

20 肺巨噬细胞吞噬大肠杆菌

21

22 PAS 染色

23 荧光素标记显示皮肤毛细血管内皮细胞 免疫组织化学

24 核酸分子杂交技术 是用标记的 RNA 或 DNA 探针检测 RNA 或 DNA 片段的一种重要方法。用核酸杂交技 术检测细胞内某一基因在染色体上的定位, 称染色体原位杂交。用核酸杂交技术检测 某一基因的转录物 mRNA 的细胞定位和转录 状况,称细胞原位杂交。

25 原位杂交示脐静脉内皮细胞呈心房钠尿肽阳性

26 细胞培养技术 是将离体细胞或组织放置在适当的环境条 件下进行培养的一种技术方法,可用以检 测各种理化因子、细胞因子等对细胞增殖、 分化、代谢、运动、吞噬、分泌等生命活 动和细胞行为的影响,还可用细胞培养技 术研究细胞癌变、逆转的机制。

27 子宫内膜上皮细胞

28 流式细胞术 应用流式细胞仪对单个细胞进行生物化学和生物物 理特性的快速定量测定,可进行细胞周期各时相细 胞的比例和细胞内 DNA 、 RNA 、蛋白质的含量分 析,淋巴细胞亚群的分离和定量,血细胞增殖情况 的分析,杂交细胞等的分选等。 工作原理是分离被检细胞,制成悬液,并进行荧光 染色或标记,然后使单细胞液流快速通过该仪器的 激光照射分析区,被检细胞产生不同的荧光信号并 转变为电脉冲,分别输入计算机内贮存,同时显示 于示波器屏幕上,即可获得该细胞群体中不同类型 细胞的有关数据。

29 三、组胚学的学科特点及学习方法  理论与实验相联系  断面与立体相联  形态与功能  动态变化观念

30 思考题 组织学的主要研究内容是什么? 组织和器官分别是如何构成的?人体有 哪几种基本组织? 何谓嗜碱性、嗜酸性、中性、亲银性和 嗜银性? 组织学有哪些常用方法和技术?


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