Microscopia Eletrônica Prof. José Lino Neto – UFV
Microscópio de Luz - Cortes -
Microscópio de Luz - superfície -
Microscópio Eletrônico de Transmissão - MET Microscópio de Luz - ML Microscópio Eletrônico de Transmissão - MET Microscópio Eletrônico de Varredura - MEV
ML: 1.000x 0,2 µm MET: 500.000x 0,0002 µm MEV: 10 a 150.000x 0,02 µm
MET MEV
Epitélio da mucosa intestinal
Filamento
Filamento
Canhão de elétrons
Canhão de elétrons
Lentes magnéticas
Lentes magnéticas
Câmara
Câmara e porta-amostra
Porta amostra - stubs
Formação da imagem
Análise da imagem
Montagem nos suportes - Stubs Secagem ao ponto crítico Preparo do material Fixação Desidratação Montagem nos suportes - Stubs Secagem ao ponto crítico Sputter coat MEV
Protocolo 1- Fixar em solução de glutaraldeído e/ou paraformaldeído em tampão cacodilato de sódio (ou fosfato) a 0,1M (animal) ou 0,05M (vegetal) em pH 7,2. Tempo: 2 a 24 hs. 2- Lavar por 1-2 hs em vários banhos do tampão; 3- Pós-fixar em tetróxido de ósmio por 1 h ao abrigo da luz; 4- Lavar em 2 banhos de 15 min em tampão caco, ou água destilada; 5- Desidratar as peças, mantendo-as submergidas, em serie crescente de etanol ou acetona (50% 70% 80% 95% 100%). Cada etapa deve ser feita em dois banhos de 15 min cada; 6- Ponto crítico; 7- Montar as peças secas nos stubs; 8- Sputter coat para proceder a cobertura com ouro.
Ponto-crítico
Sputter coat
“slide show”
“slide show”
“slide show”
“slide show” Organelas celulares
“slide show” Dinoflagelados
“slide show” Cultura de células
“slide show” Espinha de ouriço Superfície foliar de Corymbia citriodora
Espermatozóides de hamster “slide show” Espermatozóides de hamster
“slide show” Ammoplanops moenkopi (Sphecidae Pemphredoninae)
“slide show” Eucerceris superba (Sphecidae Philanthinae) Dryudella montana (Sphecidae: Astatinae)
“slide show” Epitélio traqueal
“slide show” Pata de lagarta
“slide show” Antena de Lepidoptera
“slide show” Esporo de um fungo Detalhe da para de um inseto
“slide show”
Fig. 1 Objetiva = 40x Optovar = 3,5x Ampliação = 15x Fig. 2