 CÉLULAS ANIMAIS Ivanise C.S.Mota. CÉLULAS ANIMAIS.

Apresentação em tema: " CÉLULAS ANIMAIS Ivanise C.S.Mota. CÉLULAS ANIMAIS."— Transcrição da apresentação:

1  CÉLULAS ANIMAIS Ivanise C.S.Mota

2 CÉLULAS ANIMAIS

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4  - Raspado de mucosa bucal.  - Swab.  - Recipiente contendo sacarose a 3%.  - Tubos de ensaio.  - Suporte para tubos de ensaio.  - Recipiente para banho de gelo.  - Papel alumínio.  - Reagentes: # Etanol a 95%, detergente incolor, água destilada, cloreto de sódio.

5  Higienizar a boca, fazendo bochechos com água.  Raspar mucosa com auxílio de um swab (nos dois lados bucais).  Em um recipiente, colocar uma porção de solução de sacarose a 3% e, logo em seguida, bochechar esta solução por 2 minutos.  Recolher o volume obtido do bochecho e colocar no recipiente anterior, mergulhando o swab usado na raspagem.  Transferir 5,0ml do volume anterior para um tubo de ensaio e adicionar 01 pitada de cloreto de sódio, homogeinizando o material com auxílio de papel alumínio.  Adicional 500µl de detergente neutro a 25% e homogeinizar vagarosamente.  Incubar em banho-maria a 55ºC por 10 minutos.  Resfriar em banho de gelo, por 10 minutos aproximadamente.  Colocar no tubo de ensaio, delicadamente, 5,0ml de álcool etílico gelado a 95% e observar.

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10  A proteinase K é indispensável no material sanguíneo devido digerir proteínas e eliminar a contaminação das preparações de ácido nucleico, além de inativar as nucleases que poderiam degradar o DNA ou o RNA durante a purificação.

11  Para que o uso do detergente?  Para que o uso do sal?  Por que o uso de álcool gelado?  Qual a função da proteinase K?  Porque avaliar leucócitos e desprezar os eritrócitos?  Pode ser avaliado somente células vivas? Justifique sua resposta.