ANÁLISE DA VARIABILIDADE GENÉTICA DE LINHAGENS DE MELÃO UTILIZANDO MARCADORES MOLECULARES ISSR e SSR Nayara Carvalho1; Felipe Mont’Alvão Canela²; Marco.

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1 ANÁLISE DA VARIABILIDADE GENÉTICA DE LINHAGENS DE MELÃO UTILIZANDO MARCADORES MOLECULARES ISSR e SSR
Nayara Carvalho1; Felipe Mont’Alvão Canela²; Marco Antônio Ferreira3; Valter Rodrigues Oliveira4; Mateus Figueiredo Santos4; Gláucia Salles Cortopassi Buso3. 1Mestranda, Universidade de Brasília - UnB C.P ,   , Brasília, DF; 2Graduando, Universidade de Brasília - UnB C.P ,   , Brasília, DF; 3Pesquisador, Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia C.P , , Brasília, DF; 4Pesquisador, Embrapa Hortaliças C.P. 218, ,Brasília, DF. INTRODUÇÃO RESULTADOS E DISCUSSÃO Nas últimas duas décadas, o agronegócio do melão no Brasil teve um crescimento de mais de 800%, gerando muitos empregos, sobretudo na região Nordeste, que concentra mais de 90% da produção nacional (FAO, 2012). O melão do tipo amarelo é o mais consumido no Brasil, e dentro deste mercado, a variedade tipo pele de sapo representa, atualmente, de 15% a 18% da área plantada de melão. Os estudos de variabilidade genética auxiliam programas de melhoramento possibilitando a obtenção de populações com efeitos heteróticos significativos e híbridos superiores. Simple Sequence Repeats (SSR) ou microssatélites são sequências curtas que podem estar repetidas em tandem, flanqueadas por sequências únicas. Caracterizam-se por serem codominantes e abundantes. Já os marcadores ISSR (Inter Simple Sequence Repeats), amplificam sequências Inter-SSR de diferentes tamanhos e caracterizam-se por serem dominantes e apresentarem alta reprodutibilidade (Ferreira e Grattapaglia, 1998; FALEIRO, 2007). Na análise dos marcadores ISSR, foram obtidas 74 bandas polimórficas a partir dos 13 primers utilizados, e a similaridade genética variou de 0.38 a O dendrograma resultante agrupou os genótipos em dois principais grupos com 38% de similaridade entre eles. No primeiro grupo, foram formados dois subgrupos onde a linhagem 1 foi a mais divergente, com 52% de similaridade com as linhagens restantes dentro de seu subgrupo. No segundo grupo também foram formados dois subgrupos, sendo o primeiro composto apenas pela linhagem 25 que apresentou 54% de similaridade com as outras 24 linhagens restantes dentro de seu subgrupo. Os dados gerados para marcadores SSR apresentaram um total de 30 alelos para os 13 primers analisados, e a similaridade genética variou de 0.47 a 1. No dendrograma resultante observou-se o agrupamento dos genótipos em dois principais grupos com 47% de similaridade entre eles. O primeiro grupo apresentou a maioria dos genótipos, e foi subdividido em 2 subgrupos com 58% de similaridade. O segundo grupo apresentou apenas as linhagens 43 e 50 com 54% de similaridade entre elas. Os dados gerados em SSR apresentaram apenas dois indivíduos no segundo grupo, enquanto para marcadores ISSR, estes mesmos indivíduos foram alocados em grupos distintos, o que pode ser justificado pela presença de alelos diferentes. Portanto, prevê-se um maior ganho genético pelo cruzamento entre linhagens dos dois principais grupos divergentes e a utilização das linhagens 43 e 50, provavelmente, aumentará a variabilidade alélica no programa de melhoramento. Figura 1: Melão Pele de Sapo. OBJETIVO Analisar linhagens de melão do tipo pele de sapo desenvolvidas no programa de melhoramento genético de melão da Embrapa Hortaliças, utilizando marcadores ISSR e SSR. MATERIAL E MÉTODOS Foram utilizadas 58 linhagens obtidas por meio do método de seleção SSD, a partir de população F2. Foram avaliados 13 primers polimórficos para cada marcador por meio de reações de PCR. A separação dos fragmentos obtidos a partir de PCR foi realizada por meio de eletroforese vertical em gel de poliacrilamida, para marcadores SSR e eletroforese em gel de agarose para marcadores ISSR. O software utilizado para a análise genética foi o NTSYS (versão 2.21m). A análise dos marcadores ISSR foi realizada por meio da presença ou ausência de banda, a similaridade foi obtida utilizando o coeficiente de JACCARD e o agrupamento pelo método UPGMA. Para marcadores SSR a análise foi realizada por meio de frequência alélica, a similaridade utilizando o coeficiente BAND e o agrupamento também foi obtido por UPGMA. 13 primers polimórficos (SSR e ISSR) Reações de PCR 58 Linhagens Figura 3: Dendrograma das 58 linhagens gerado a partir da análise de 13 primers SSR. Figura 2: Dendrograma das 58 linhagens gerado a partir da análise de 74 marcadores ISSR. BIBLIOGRAFIA Eletroforese em gel de poliacrilamida (SSR) e agarose (ISSR) ARAGÃO, F.A.S. Divergência genética de acessos e interação genótipo x ambiente de famílias de meloeiro. Tese (doutorado) Universidade Federal Rural do Semi-Árido, Mossoró, 2011. FALEIRO, F.G. Marcadores Genético-moleculares – Aplicados a programas de conservação e uso de recursos genéticos. Planaltina – DF: Embrapa Cerrados, p. FAO (Food and Agriculture Organization). Base de Dados Agrícolas de FAOSTAT, 2012 – Disponível em: < FERREIRA, M.E. e GRATTAPAGLIA, D. Introdução ao uso de marcadores moleculares em análise genética. 3a ed.Brasília: EMBRAPA-CENARGEN. Pp ROHLF, J.F. NTSYS-pc Numerical Taxonomy and Multivariate Analysis System, Version 2.2. New York, Exeter Publications Análise genética (NTSYS) Sugestões de cruzamentos