aplicação de RMN de 1H para a quantificação de

Apresentação em tema: "aplicação de RMN de 1H para a quantificação de"— Transcrição da apresentação:

1 aplicação de RMN de 1H para a quantificação de
α-pineno em óleos essenciais Cristiane I. Cerceau1, Luiz C. A. Barbosa2, Elson S. Alvarenga1*, Antônio J. Demuner1 1Departamento de Química, Universidade Federal de Viçosa, Viçosa, MG, Brasil. CEP 2Departamento de Química, Universidade Federal de Minas Gerais, Belo Horizonte, MG, Brasil. CEP INTRODUÇÃO C6H10 𝑤 𝑥 = Ix . 𝑁Std . 𝑀x . 𝑚𝑆𝑡𝑑 𝐼Std . 𝑁x . 𝑀𝑆𝑡𝑑 (1) 𝑃x= 𝐴x 𝐴Std 𝑁Std 𝑁X 𝑀x 𝑀Std 𝑚Std 𝑚 𝑃Std (2) Devido à variabilidade da sua composição em função da fonte de obtenção e de condições de armazenamento e adulteração1 os óleos essenciais frequentemente apresentam problemas de qualidade2, o que torna necessário o desenvolvimento de metodologias para o controle de qualidade dos mesmos. A caracterização desses óleos normalmente é realizada por técnicas cromatográficas de alta-resolução que apresentam facilidade de identificação dos constituintes dos óleos e sensibilidade de detecção, mas demanda grande tempo de análise. Nos últimos anos, a espectroscopia de ressonância magnética nuclear de hidrogênio (RMN de 1H) tem sido amplamente utilizada no controle de qualidade de alimentos, produtos farmacêuticos, dentre outros.3 Nesse trabalho é apresentado o desenvolvimento e validação de um método simples e rápido de quantificação de óleos essenciais por RMN de 1H. Figura 2. Espectro de RMN de 1H para quantificação da amostra de óleo essencial de eucalipto híbrido E. urophylla x E. grandis (UxG) e equação utilizada para cálculo da quantidade de α-pineno nas amostras de óleos essenciais por RMN de 1H. Onde, x = analito; PI = padrão interno; P = pureza; A = área do sinal de ressonância; N = número de núcleos que absorvem na frequência do sinal de ressonância; M = massa molar; m = massa de amostra4. EXPERIMENTAL Tabela 2. Percentagem média de α-pineno quantificado nas amostras de óleos essenciais analisadas por diferentes métodos. Metodologias UxG ET EPE EPN CG-PI (%) 33,14 10,87 42,37 28,41 CG-PE (%) 35,60 13,46 47,91 27,35 CG-N (%) 36,80 11,40 43,48 27,22 RMN de 1H (%) 34,44 11,74 46,87 25,92 *Cromatografia gasosa usando padronização interna (CG-PI), externa (CG-PE) e normalização (CG-N) Pelos resultados obtidos na etapa de validação (Tabela 1), todos os sinais do espectro de RMN de 1H do α-pineno puro em CDCl3 podem ser utilizados para quantificação deste composto em óleos essenciais desde que não exista sobreposição dos sinais das amostras ao sinal de α-pineno escolhido. O método de RMN de 1H pode ser aplicado para óleos essenciais com teores de α-pineno de no mínimo 0,5% até óleo puro. Pelos resultados apresentados na Tabela 2, foi verificado que, embora as amostras de óleos essenciais analisadas possuam composições muito diferentes, não houve variação significativa no conteúdo de α-pineno analisado pelos métodos cromatográficos e por RMN de 1H. Figura 1. Esquema do procedimento experimental para validação e quantificação das amostras por RMN de 1H e de quantificação das amostras por cromatografia gasosa com detector de ionização de chama ( CG-DIC). RESULTADOS E DISCUSSÃO Nas condições otimizadas, o método foi avaliado em relação aos sinais em δ= 5,23-5,17; 2,35; 2,21; 2,12-2,04; 1,94; 1,67; 1,28; 1,17 e 0,85, obtidos no espectro de RMN de 1H do α-pineno puro em CDCl3 (Tabela 1). As amostras de óleo essencial de eucalipto híbrido E. urophylla x E. grandis (UxG) (Fig. 2), E. tereticornis (ET) E. phoenicea (EPE), E. punctata (EPN) foram analisadas e percentagem de α-pineno foi calculada utilizando o sinal δ= 5,23-5,17 e os dados estão apresentados na Tabela 2. CONCLUSÃO O método de RMN de 1H para determinação de α-pineno em óleos essenciais é adequado, apresentando resultados comparáveis aos obtidos por CG e a vantagem de ser simples e rápido, podendo ser aplicado no controle de qualidade de um grande número de amostras. Tabela 1.Resultados obtidos na validação da metodologia de quantificação de α-pineno em óleos essenciais por RMN de 1H. Parâmetros Valores observados Linearidade r ≥ 0,99912 (δ0,85) Exatidão 93,37 (δ=0,85) – 103,39 % (δ=2,21) Repetitividade cv = 0,05 (δ=5,23 –5,17) – 1,93 (δ=2,12 – 2,04) Robustez nt cv = 0,07 (δ=1,28) – 1,57 (δ=2,35) Temp. cv = 0,03 (δ=1,28) – 2,28 (δ=2,12 – 2,04) AGRADECIMENTOS REFERÊNCIAS 1Simões, C. M. O.; Spitzer, V. Farmacognosia da planta ao medicamento, 4° ed, 2002. 2Bizzo, H. R. Quim. Nova. 2009, 32, 588. 3Guerrini, et al. Chemistry & Biodiversity. 2011, 8, 624. 4Santos, M. S.; Colnago, L. A. Quim. Nova. 2013,36, 324. XIII Jornada Brasileira de Ressonância Magnética Nuclear – 04 a 08 de Agosto de 2014 – Pirenópolis– Goiás, Brasil