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Transcrição e processamento de RNA em eucariotos
Prof. Odir Dellagostin Disciplina de Biologia Molecular
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Transcrição em eucariotos
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RNA – Ácido ribonucléico
- mRNA - tRNA - rRNA - hnRNA - snRNA
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Estrutura de um gene eucarioto
Sítio de PoliA Promotor Região Codificadora hnRNA AAAAAAAAAA mRNA Exon Intron DNA RNA CAP
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Transcrição em eucariotos
RNA pol I Nucleólo rRNA 28S, 18S, 5,8S Várias subunidades 50-70% RNA pol II Nucleoplasma hnRNA (transcrito primário) snRNA Várias subunidades % RNA pol III rRNA 5S tRNAs 10% RNA pol Mitocondrial Mitocôndria 01 subunidade RNA pol de Cloroplastos Cloroplasto Similar as bacterianas Requerem proteínas auxiliares: fatores de transcrição
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Estrutura de Promotores da RNA Pol II
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Promotores de genes transcritos pela RNApol II
Tata Binding Protein
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RNA polimerase II TFIID = TBP + 10 TAFs
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Formação do complexo de transcrição da Polimerase II
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Enhancers (Reforçadores)
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Proteínas necessárias para transcrição a partir de promotores reconhecidos pela RNA Pol II
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RNA polimerase III
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Processamento de RNA
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Precursores de RNA (hnRNA) RNAs funcionais (mRNA)
Introdução Transcrito primário Pré-RNA Precursores de RNA (hnRNA) Processamento RNAs funcionais (mRNA)
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Algumas informações sobre íntrons
3,7 íntrons por kb de região codificadora No homem o número médio é de 5 íntrons por gene 94% dos genes contém íntrons O tamanho médio dos íntrons é de 125 pb O tamanho médio dos éxons é de 90 a 120 pb (30 a 40 aa)
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Splicing de íntrons de mRNA
Características de íntrons de mRNA - Adenina localizada 20 a 50 nt da extremidade 3’ do íntron - Região rica em pirimidinas na extremidade 3’ do íntron - Regra GU-AG
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Íntrons na região codificadora
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Splicing Spliceossomo: formado por proteínas e snRNPs
Estrutura montada assim que o íntron é transcrito Reação em cascata direcionada pelo pareamento de bases
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Cis-splicing
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Trans-splicing Ascaris lumbricoides Tripanossomas
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Splicing alternativo
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Splicing alternativo
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Transporte ativo para o citoplasma
Spliceossomo – 3000 kDa
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Erros no processo de splicing
Mecanismo de proteção contra RNAs incorretos Localização do códon de terminação
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4- Splicing de íntrons de tRNA
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Então, por que a evolução nos presenteou com estas seqüências?
A presença de íntrons nos genes eucarióticos, aparentemente, representa um enorme desperdício celular Então, por que a evolução nos presenteou com estas seqüências? Mecanismo de proteção contra mutações? Diversidade: genomas e proteomas (splicing alternativo)? Regulação gênica?...
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Adição do CAP Fosfo-hidrolase Guanilil-transferase
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Cauda poli A Poli(A)-polimerase
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Processamento dos rRNAs
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Processamento de precursores de tRNA
tRNA maduro Modificação das bases Processamento
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Modificação de nucleotídeos
- rRNA e tRNA - Metilação de bases, da ribose (C2) - Catalizadas por várias enzimas
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