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Biotecnologia da Reprodução
Prof. Msc. Marcelo Arne Feckinghaus
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Bases Fisiológicas Fases do ciclo estral Hipotálamo controla hipófise
Proestro, estro, metaestro e diestro Interações entre SNC e órgãos genitais Hipotálamo controla hipófise Hormônios liberação pulsátil GnRH Receptores específicos (adeno-hipófise)
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Bases Fisiológicas PGA modula resposta GnRH Estrógeno
↓ freqüência do pulso de GnRH Estrógeno Ação depende da PGA Fase Luteínica: ↓ freqüência GnRH Fase Folicular (pré-ovulatória): ↑ freqüência GnRH
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Bases Fisiológicas Interferências Ambiente (temperatura, fotoperíodo)
Estado nutricional Manejo do rebanho Estresse Amamentação Opióides endógenos inibem GnRH Feromônios masculinos
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Bases Fisiológicas Inibição hormonal LH regulado pelo GnRH Inibina
Supressão de FSH LH regulado pelo GnRH PGA influencia Balanço energético Amamentação
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FSH X LH
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Superovulação Mecanismo exato de recrutamento desconhecido
Dominância e atresia Relação com FSH Ondas foliculares 2 até 3 depende da fase luteínica
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Superovulação Definição: Método de estimulação folicular para desenvolvimento de DIVERSOS folículos terciários até a ovulação
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Superovulação Simplificando:
Suprir deficiência de FSH antes que o folículo dominante cause a diminuição endógena do mesmo! Neutralização da dominância
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Superovulação Inibição: Ativa X Passiva Alternativas
Passiva = ↓ [] de FSH até a incombatibilidade Ativa = Substâncias ↓ sensibilidade a GnRH Alternativas Gonadotrofinas (eCG, hCG e FSH) Resposta variada
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Superovulação Variações: Imprecisão na sincronia ovariana
Atividade biológica Dose Idade e raça da doadora Fatores individuais
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Superovulação Emergência (início) da onda folicular
Melhor resposta ao FSH Antes da dominância
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Fecundação e Desenvolvimento
Tempo de capacitação Mudanças bioquímicas e estruturais Remoção de substâncias (plasma seminal) Entrada de cálcio = Atividade flagelar Reação acrossômica = poder de penetração Maior durabilidade do espermatozóide Oócito = horas Espermatozóide (sptz) = 24 – 48 horas
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Fecundação e Desenvolvimento
Fecundação 6 horas após a ovulação Inseminação antes da ovulação Primeiro contato corona radiata e zona pelúcida Pressão estimula a fusão das membranas (acrossomal e plasmática)
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Fecundação e Desenvolvimento
Pontos de fusão liberação de enzimas = Penetração Ruptura + Penetração = Restabelecimento da ZP Reinício da meiose (pronúcleos) Formação do zigoto
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Fecundação e Desenvolvimento
Aproximação e junção dos pronúcleos = singamia Divisões mitóticas = clivagem Blastômeros = ↓ tamanho e ↑ número ↑ força de coesão celular = compactação celular = mórula
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Fecundação e Desenvolvimento
13 a 32 blastômeros = 4 a 5 dias Divisão e especialização celular = blastocisto inicial Embrioblastos e trofoblastos Feto e placenta
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Fecundação e Desenvolvimento
Blastocele = cavidade Pressão = Rompimento da zona pelúcida Blastocisto eclodido Melhores resultados antes da eclosão
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Dia 2 = 4 células
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Dia 3 = 8 células
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Dia 4 = 16 células
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Dia 5 ou 6 = Mórula
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Dia 6 -7 = Blastocisto
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Dia 7 – 8 = Blastocisto Expandido
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Dia 8 – 9 = Blastocisto Eclodido
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