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1
Tecnologia do DNA recombinante
Engenharia Genética Tecnologia do DNA recombinante
2
Bibliotecas genômicas
Técnicas de shot-gun – genoma total bactéria Fracionamento aleatório Enzimas de restrição mRNA - eucariotos
3
Construção de um microrganismo recombinante
Encontrar um gene Inserir o gene Vetor de Expressão – origem de replicação, promotor, sítio de ligação, início e término de leitura Transformação / transfecção Identificação dos recombinantes (seleção de clones)
4
Plantas transgênicas Agrobacterium tumefaciens – plasmídeo Ti
Protoplastos – eletroporação + PEG Monocotiledôneas – biobalística (gene gun)
5
Animais transgênicos Microinjeção – interromper genes naturais ou não funcionamento Animais produtores de fármacos – biofábricas / biorreatores – promotor que se expressa na glândula mamária Inserção por lipossomos, eletroporação, vetores virais, elementos de transposição (P – Drosophila) ou baculovírus.
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