Princípios Básicos da Oximetria de Alta Resolução

Apresentação em tema: "Princípios Básicos da Oximetria de Alta Resolução"— Transcrição da apresentação:

1 Princípios Básicos da Oximetria de Alta Resolução
UNIVERSIDADE FEDERAL DE SANTA CATARINA DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA Métodos Analíticos em Bioquímica Prof. Alcir Dafré Princípios Básicos da Oximetria de Alta Resolução Paulo Silveira Roberta Martins Orientadora: Alexandra Latini

2 Respiração Mitocondrial

3 Substratos para Respiração Mitocondrial

4 Transporte de Substratos

5

6 Inibidores para Respiração Mitocondrial

7 (Oroborus Instruments)
Oxímetro Oxygraph-2k (Oroborus Instruments)

8 10µl de piruvato + 10 µl de malato 2mM
Aula Prática Amostra: Concentrado de Mitocôndrias de Fígado de Ratos Técnica: Reagentes 10µl de piruvato + 10 µl de malato 2mM 25 µl ADP 0,25M 4 µl Rotenona 1mM 20 µl Succinato 5 µl Cianeto

9 Resultados Aula Prática
Reagentes Consumo de Oxigênio (Marks Statistics) 10µl de piruvato + 10 µl de malato 2mM 25 µl ADP 0,25M 4 µl Rotenona 1mM 20 µl Succinato 5 µl Citocromo C

10 Resultados Aula Prática
Estágio III: Quantidade de Oxigênio consumido na presença de substratos e ADP. Estágio IV: Quantidade de Oxigênio consumido após a exaustão dos substratos e ADP. Controle Respiratório (RCR): RCR ADP/Pir+Mal = RCR ADP/Succinato=