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PublicouAníbal Valgueiro Natal Alterado mais de 9 anos atrás
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ESTRUTURA E FUNÇÃO DOS ÁCIDOS NUCLÉICOS
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Todo ser vivo tem a capacidade de auto-replicação
ÁCIDOS NUCLÉICOS ARMAZENAM TRANSMITEM EXPRESSAM INFORMAÇÃO GENÉTICA
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DNA
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Como é a unidade básica do DNA?
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Quem consegue lembrar quais são as subunidades?
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Quem consegue esquematizar?
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Polímeros formados por NUCLEOTÍDEOS
DNA Polímeros formados por NUCLEOTÍDEOS GRUPO FOSFATO Ligação em C5 BASE NITROGENADA Ligação em C1 AÇÚCAR (5C)
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Purinas Pirimidinas
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ligações fosfodiester
entre as hidroxilas 5’ e 3’
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BASES NUCLEOSÍDEO NUCLEOTÍDEO
Purinas Adenina Adenosina Adenilato Desoxiadenosina Desoxiadenilato Guanina Guanosina Guanilato Desoxiguanosina Desoxiguanilato Pirimidinas Citosina Citidina Citidilato Desoxicitidina Desoxicitidilato Timina Timidina Timidilato
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duas fitas de DNA enroladas em torno do eixo da hélice
DUPLA-HÉLICE DE DNA duas fitas de DNA enroladas em torno do eixo da hélice
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duas fitas de DNA enroladas em torno do eixo da hélice
DUPLA-HÉLICE DE DNA duas fitas de DNA enroladas em torno do eixo da hélice açúcares externos C G A T bases internas pontes de hidrogênio
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então o que mantêm a dupla-hélice são:
Pontes de hidrogênio entre as bases Forças de Van der Walls entre as bases Característica hidrofóbica das bases nitrogenadas Interações iônicas entre o grupo fosfato e íons Mg2+ do meio
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características da dupla-hélice
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As fitas da dupla hélice estão em direções opostas
ANTIPARALELISMO As fitas da dupla hélice estão em direções opostas
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Representa-se a cadeia na orientação 5’ 3’
Por convenção 5’ ACGT 3’ Representa-se a cadeia na orientação 5’ 3’
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Em qualquer seqüência de DNA as relações A/T e C/G é igual a 1
COMPLEMENTARIEDADE Em qualquer seqüência de DNA as relações A/T e C/G é igual a 1
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Cadeias Complementares
Cadeia 1 5` T G C T G A C G T 3` Cadeia 2 3` A C G A C T G C A 5` ao separar cada cadeia serve de molde para a síntese gera cadeias filhas com mesma constituição molecular da mãe
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As ligações entre açucar e base não são diretamente opostas gerando
Estrutura geral As ligações entre açucar e base não são diretamente opostas gerando bases mais expostas
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Desnaturação e renaturação do DNA
TEMPERATURA TEMPERATURA
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Desnaturação e renaturação do DNA
TITULAÇÃO ÁCIDOS/BASES x
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Em qual situação é mais fácil desnaturar?
Desnaturação e renaturação do DNA Em qual situação é mais fácil desnaturar?
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TIPOS DE DNA – conformações do DNA
dependem da composição de bases nitrogenadas dependem do meio em que se encontram
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TIPOS DE DNA C, D, E só em laboratório
Existem 6 formas de DNA A, B, Z em condições fisiológicas
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TIPO DE DNA - B Dupla-hélice mais longa e fina
Dupla-helice clássica de Watson e Crick Mais abundante nas células Dupla-hélice gira para a direita Rotação entre dois nucleotídeos é 34,6o Forma uma volta completa a cada 10,4 pb Diâmetro da dupla-hélice é de 2,37nm Caso -seja desidratado em etanol -seja retirado sal
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TIPO DE DNA - A Dupla-hélice mais curta e grossa
Pouco abundante nas células Acredita-se estar relacionado ao DNA:RNA, transcrição Dupla-hélice gira para a direita Rotação entre dois nucleotídeos é 20o Forma uma volta completa a cada 11 pb Caso -A ou B estejam em meio a grandes concentrações de cátions
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TIPO DE DNA - Z Dupla-hélice mais longa e fina que DNAB
DNA B pode se converter em Z A cavidade maior desaparece e a menor fica profunda Dupla-hélice gira para a esquerda Forma uma volta completa a cada 12 pb Diâmetro da dupla-hélice é de 1,84nm
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RNA
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CARACTERÍSTICAS - Polímero linear
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CARACTERÍSTICAS - Normalmente em fita simples
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CARACTERÍSTICAS - Pentose ribose
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CARACTERÍSTICAS - Timina trocada por Uracil
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Tipos de RNA - RNA mensageiro
estão relacionados à localização e função desempenhada - RNA mensageiro Transfere informação genética do DNA aos ribossomos 1 a 5 % do RNA da cél.
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Principal componente do ribossomo
Tipos de RNA - RNA ribossomal Principal componente do ribossomo 75 % do RNA da cél.
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Carrega aminoácidos até os ribossomos para síntese protéica
Tipos de RNA - RNA transportador Carrega aminoácidos até os ribossomos para síntese protéica 10 a 15 % do RNA da cél.
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Só ocorre em eucariotos
Tipos de RNA - RNA heterogênios nucleares Precursores do RNAm Só ocorre em eucariotos
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Tipos de RNA - RNA pequenos nucleares
Ligados a proteínas, formam ribonucleoproteínas Agem na síntese de RNAm funcionais
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Tipos de RNA - RNA pequenos
No núcleo e citoplasma, agem estruturalmente e cataliticamente (ribozimas)
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REPLICAÇÃO DO DNA
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REPLICAÇÃO DO DNA O que é?
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REPLICAÇÃO DO DNA processo em que cada cadeia de DNA dá origem a duas cadeias filhas iguais à que lhes deu origem, por meio de processo semiconservativo
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Qual a relação? X DUPLICAÇÃO DO DNA DIVISÃO CELULAR
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Replicação do DNA Ciclo Celular
na divisão os cromossomos devem estar duplicados na divisão a célula deve ter atingido um tamanho mínimo
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tempo insuficiente para 1 ciclo de replicação celular
E. coli ciclo celular 20 min tempo insuficiente para 1 ciclo de replicação celular
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Em células eucarióticas
2c = conteúdo diplóide de DNA 4c = conteúdo tetraplóide de DNA
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devem existir mecanismos para sinalizar necessidade da divisão celular
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Mecanismo de Replicação
Sentido da replicação?
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Sentidos da Replicação
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Mecanismo de Replicação Local de origem da replicação?
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Local de origem da replicação? PARA PROCARIOTOS E EUCARIOTOS
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PROCARIOTOS - única origem de replicação
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EUCARIOTOS - várias origens de replicação
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REPLICON – segmento de DNA com ponto de origem / autoduplicação
E. coli 1 RÉPLICON GENOMA HUMANO DE A REPLICONS
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Mecanismo de Replicação Características da região Ori?
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região Ori – apresenta 245 pb
estudo com E.coli permitiu observar algumas características região Ori – apresenta 245 pb apresenta 2 grupos de seqüências
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4 seqüências repetidas de 9 pb
sítio de reconhecimento da proteína iniciadora - DnaA 5’ TTAT(C/A)CA(C/A)A 3’ CAIXAS DE DnaA 3 seqüências repetidas de 13 pb ricas em AT – 2 pontes de H (à esquerda da seqüência-9 pb) Lic 13/2
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Funções da DnaA Liga-se à origem
Determina o local de início da replicação Induz a abertura da dupla fita Posiciona a proteína DnaB em oriC
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Mecanismo de Replicação
Etapas da replicação?
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Etapas da replicação COMPLEXO INICIAL COMPLEXO ABERTO
COMPLEXO PRÉ-PRIMING AÇÃO DA PRIMASE
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complexo de 20-40 monômeros DnaA:oriC inicia abertura
I. COMPLEXO INICIAL DnaA complexo de monômeros oriC Complexo de DnaA liga-se ao DnaA box facilita a abertura da fita dupla-hélice DnaA:oriC inicia abertura
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Etapas da replicação COMPLEXO INICIAL COMPLEXO ABERTO
COMPLEXO PRÉ-PRIMING AÇÃO DA PRIMASE
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forma-se o complexo DnaB+DnaC
II. COMPLEXO ABERTO Abertura iniciada é expandida por helicases DnaB– rompem as pontes de H entre bases forma-se o complexo DnaB+DnaC
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Etapas da replicação COMPLEXO INICIAL COMPLEXO ABERTO
COMPLEXO PRÉ-PRIMING AÇÃO DA PRIMASE
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III. COMPLEXO PRÉ-PRIMING
helicases movem-se em direções opostas SSB – proteínas com alta afinidade com a molécula de DNA Proteínas SSB se ligam às hélices impedindo que se religuem
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Etapas da replicação COMPLEXO INICIAL COMPLEXO ABERTO
COMPLEXO PRÉ-PRIMING AÇÃO DA PRIMASE
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Forma-se o Complexo de Iniciação da Replicação – chega a primase
IV. AÇÃO DA PRIMASE Forma-se o Complexo de Iniciação da Replicação – chega a primase primase + helicase = primossomo primers – peqs. cadeias de RNA sintetizados pela primase RNA-polimerase
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Com a síntese do primer 2 DNA polimerase III unem-se ao complexo de iniciação da replicação e iniciam o alongamento da cadeia, pela adição de desoxirribonucleotídeos nas cadeias que surgem, tanto na fita contínua como na descontínua
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Mecanismo de Replicação Regras para replicação?
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Mecanismos básicas para o processo de replicação
Processo semiconservativo na replicação as 2 fitas de DNA parental são copiadas, originando moléculas filhas com somente uma das fitas novas sintetizadas
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Matthew Meselson & Franklin Stahl Mecanismo de replicação solucionado
1958 Mecanismo de replicação solucionado
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descarta replicação conservativa
descarta replicação dispersiva
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Mecanismos básicas para o processo de replicação
Inicio da replicação replicação inicia em seqüências específicas = as Origens
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Mecanismos básicas para o processo de replicação
Movimento da forquilha de replicação pode ser UNIDIRECIONAL – 1 forquilha BIDIRECIONAL – 2 forquilhas opostas
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Mecanismos básicas para o processo de replicação
Direção da Replicação adição de nucleotídeos sempre no sentido 5’3’
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Mecanismos básicas para o processo de replicação
Semidescontinuidade da replicação a replicação ocorre de maneira contínua numa fita e descontínua na outra
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