MÉTODOS CLÁSSICOS DE DOSEAMENTO

Apresentação em tema: "MÉTODOS CLÁSSICOS DE DOSEAMENTO"— Transcrição da apresentação:

1 MÉTODOS CLÁSSICOS DE DOSEAMENTO
TEOR DE SUBST. ATIVA ANÁLISES QUALITATIVAS E QUANTITATIVAS GARANTIR M.P ESPECIFICAÇÕES PRODUTO FINAL C/ QUALIDADE

2 MÉTODOS CLÁSSICOS DE DOSEAMENTO
DETERMINAÇÃO DE TEOR DIFERENTES MÉTODOS OFICIAIS OU NÃO OFICIAIS AS GRANDES INDÚSTRIAS FARMACÊUTICAS USAM EM GRANDE ESCALA OS MÉTODOS CROMATOGRÁFICOS COMO SENDO OS OFICIAIS DE DOSEAMENTO, ESPECIALMENTE PARA PRODUTOS ACABADOS. DESTACA-SE A FARMACOPÉIA AMERICANA QUE INDICA MÉTODOS HPLC-UV PARA O DOSEAMENTO DA GRANDE MAIORIA DE SUAS MONOGRAFIAS.

3 MÉTODOS CLÁSSICOS DE DOSEAMENTO
OUTRAS FARMACOPÉIAS SÃO MAIS DIVERSIFICADAS, APRESENTANDO DOSEAMENTOS ALTERNATIVOS: VOLUMETRIA EM MEIO NÃO AQUOSO, TITULAÇÕES POTENCIOMÉTRICAS, ESPECTROMETRIA NO UV-VISÍVEL, ETC.

4 MÉTODOS CLÁSSICOS DE DOSEAMENTO ASPECTOS CONSIDERADOS:
CRITERIOSA SEM FALHAS GERAR RESULTADOS FIDEDIGNOS ESCOLHA DO MÉTODO: TEMPO DE ANÁLISE CUSTO EXATIDÃO PRECISÃO ASPECTOS CONSIDERADOS:

5 MÉTODOS CLÁSSICOS DE DOSEAMENTO
OUTROS FATORES: Natureza das informações desejadas Quantidade de amostra e % do que será determinado Utilização dos resultados da análise As análises químicas podem ser classificadas em quatro tipos de acordo com os dados gerados:

6 MÉTODOS CLÁSSICOS DE DOSEAMENTO
ANÁLISE APROXIMADA: QUANTIDADE DE CADA ELEMENTO EM UMA AMOSTRA ANÁLISE PARCIAL: DETERMINA ALGUNS CONSTITUINTES DA AMOSTRA ANÁLISE DE TRAÇOS: É CARACTERIZADA COMO UM TIPO DE ANÁLISE PARCIAL, PRÉM A ANÁLISE CONSISTE EM DETERMINAR OS CONSTITUINTES DE UMA AMOSTRA NA ESCALA DE TRAÇOS, MICROTRAÇOS E NANOTRAÇOS

7 MÉTODOS CLÁSSICOS DE DOSEAMENTO
d) ANÁLISE COMPLETA: EM QUE SE DETERMINA A PROPORÇÃO DE CADA COMPONENTE DA AMOSTRA. QANTO AO TAMANHO DA AMOSTRA, OS MÉTODOS ANALÍTICOS SE CLASSIFICAM EM : MACRO: PARA ANÁLISE DE QUANTIDADES IGUAIS OU SUPERIORES A 0,1g MESO (SEMIMICRO): QUANTIDADES ENTRE 10-2 E 10-1g;

8 MÉTODOS CLÁSSICOS DE DOSEAMENTO
c) MICRO: QUANTIDADES ENTRE 10-3 E 10-2g d) SUBMICRO: QUANTIDADES ENTRE 10-4 E 10-3g e) ULTRAMICRO: QUANTIDADES INFERIORES A 10-4g f) TRAÇOS: QUANTIDADES ENTRE 102 E 104 mcg/g (10 A PARTES POR MILHÃO); g) MICROTRAÇOS: QUANTIDADES ENTRE 10-1 E 102 pg/g (10-7 a 10-4 partes por milhão) **

9 MÉTODOS CLÁSSICOS DE DOSEAMENTO
h) NANOTRAÇOS: QUANTIDADES ENTRE 10-1 E 102 fg/g (10-10 A 10-7 PARTES POR MILHÃO) ** ** miligrama (mg) = 10-3g micrograma (mcg) = 10-6g nanograma (ng) = 10-9g picograma (pg) = 10-12g fentograma (fg) = 10-15g atomograma (atg) = 10-18g

10 MÉTODOS CLÁSSICOS DE DOSEAMENTO
PARA O DOSEMANTO OU IDENTIFICAÇÃO DE FÁRMACOS, AS PRINCIPAIS TÉCNICAS UTILIZADAS EM ANÁLISE QUANTITATIVA SE BASEIAM EM: REPRODUTIBILIDADE DE REAÇÕES QUÍMICAS ADEQUADAS MEDIDAS ELÉTRICAS (EX. POTENCIOMETRIA E CONDUTIMETRIA) PROPRIEDADES ESPECTROSCÓPICAS (ESPECTROS DE ABSORÇÃO POR EXEMPLO) DESLOCAMENTO CARACTERISTICO, SOB CONDIÇÕES CONTROLADAS (EX. CROMATOGRAFIA)

11 MÉTODOS CLÁSSICOS DE DOSEAMENTO
OS MÉTODOS DE DOSEAMENTO PODEM SER DIVIDIDOS EM DOIS GRANDES GRUPOS: MÉTODOS CLÁSSICOS MÉTODOS INSTRUMENTAIS

12 MÉTODOS CLÁSSICOS DE DOSEAMENTO
INSTRUMENTAIS MÉTODOS CLÁSSICOS Uso de instrumento apropriado Algumas vantagens como rapidez da análise e aplicação do método em amostras com concentrações muito pequenas Equilíbrio químico Ponto de viragem Uso de indicadores

13 MÉTODOS CLÁSSICOS DE DOSEAMENTO
MÉTODOS VOLUMÉTRICOS: A volumetria pode também ser chamada de Titulometria ou Análise titrimétrica - deve-se escolher vidrarias adequadas, solução titulante padronizada, padrões primários, balança analítica (+/- 0,0001g) e solução indicadora. Útil no doseamento de fármacos método simples, preciso e custo baixo

14 MÉTODOS CLÁSSICOS DE DOSEAMENTO
APARELHOS VOLUMÉTRICOS: É fundamental a escolha dos aparelhos volumétricos; são instrumentos de medidas exatas, podendo apresentar alguns fatores negativos como por ex. aderência nas paredes internas do recipiente.

15 MÉTODOS CLÁSSICOS DE DOSEAMENTO
O escoamento de líquidos dependerá de alguns pontos: limpeza da superfície interna tempo de drenagem viscosidade do líquido tensão superficial do líquido ângulo do aparelho em relação ao solo

16 MÉTODOS CLÁSSICOS DE DOSEAMENTO
EM UM LABORATÓRIO DE CQ, BASICAMENTE DEVE HAVER DOIS TIPOS DE FRASCOS VOLUMÉTRICOS: TC: APARELHOS CALIBRADOS PARA CONTER UM CERTO VOLUME, O QUAL, NÃO SERÁ TOTALMENTE TRANSFERIDO. TD: APARELHOS CALIBRADOS PARA TRANSFERIR UM DETERMINADO VOLUME, DENTRO DE CERTOS VOLUMES DE PRECISÃO.

17 MÉTODOS CLÁSSICOS DE DOSEAMENTO
PROVETAS OU CILINDROS GRADUADOS  são equipamentos utilizadas em medidas aproximadas de volume. No comércio são encontrados desde 5 mL até X Litros. De um modo geral, o desvio-padrão da medida de volume feita com esses aparelhos é de 1%.

18 MÉTODOS CLÁSSICOS DE DOSEAMENTO
PIPETAS: Instrumentos volumétricos utilizados para transferência de certos volumes. Graduadas: apresentam graduação até a extremidade; possuem menor exatidão que as volumétricas Volumétricas: apresentam graduação única; medem só o volume indicado, apresentando maior exatidão

19 MÉTODOS CLÁSSICOS DE DOSEAMENTO
PIPETAS GRADUADAS PIPETAS VOLUMÉTRICAS

20 MÉTODOS CLÁSSICOS DE DOSEAMENTO
BURETAS: São frascos volumétricos, usadas para escoar volumes variáveis de líquido e empregada geralmente em titulações.

21 MÉTODOS CLÁSSICOS DE DOSEAMENTO
BALÕES VOLUMÉTRICOS: Aparelhos construídos para conter um certo volume de líquido exatamente em uma determinada temperatura

22 MÉTODOS CLÁSSICOS DE DOSEAMENTO
SOLUÇÃO PADRÃO Usada em doseamento; Preparada a partir de um padrão primário; Deve ser de fácil obtenção, purificação, secagem e preservação em estado puro; Não higroscópico, composição invariável Massa molecular elevada, para que os erros de pesagem sejam desprezíveis; Facilmente solúvel PADRÃO PRIMÁRIO

23 MÉTODOS CLÁSSICOS DE DOSEAMENTO
ENTRE OS PRINCIPAIS DOSEAMENTOS DE FÁRMACOS, ESTÃO AS REAÇÕES DE: NEUTRALIZAÇÃO COMPLEXAÇÃO OXIRREDUÇÃO PRECIPITAÇÃO

24 MÉTODOS CLÁSSICOS DE DOSEAMENTO
Principais reações: NEUTRALIZAÇÃO: Na2CO3 (Carbonato de Sódio), Na2B4O2 (Tetraborato de Sódio), KH(C8H4O4) (Hidrogenoftalato de Potássio, C6H5COOH (Ácido Benzóico)

25 MÉTODOS CLÁSSICOS DE DOSEAMENTO
COMPLEXAÇÃO E PRECIPITAÇÃO: AgNO3 (Nitrato de Prata), NaCl e outros

26 MÉTODOS CLÁSSICOS DE DOSEAMENTO
OXIRREDUÇÃO: K2Cr2O7 (Dicromato de Potássio), KBrO3 (bromato de Potássio), KIO3, (Iodato de Potássio), Na2C2O4 (Oxalato de Sódio), etc.

27 MÉTODOS CLÁSSICOS DE DOSEAMENTO
A determinação do ponto final de uma titulação é feita com auxílio de instrumentos. Em se tratando de métodos clássicos, principalmente na titulometria de neutralização, é necessário o uso de indicadores específicos para a detecção do ponto final da reação.

28 MÉTODOS CLÁSSICOS DE DOSEAMENTO
MÉTODOS GRAVIMÉTRICOS  medida indireta da massa de um (ou mais) constituinte da amostra; ou seja, converte-se uma espécie química em uma forma separável do meio em que se encontra para que se possa recolher e através de cálculos estequiométricos, determinar a quantidade real do elemento ou composto químico da amostra

29 MÉTODOS CLÁSSICOS DE DOSEAMENTO
PODE SER DIVIDIDA EM: PRECIPITAÇÃO VOLATILIZAÇÃO DE UM MODO GERAL, O MÉTODO DA PRECIPITAÇÃO SEGUE A SEGUINTE ORDEM: PRECIPITAÇÃOFILTRAÇÃOLAVAGEMAQUECIMENTOPESAGEM

30 MÉTODOS CLÁSSICOS DE DOSEAMENTO
PARA SER REALIZADA A SEPARAÇÃO: SE ADICIONA UM AGENTE PRECIPITANTE; OCORRE CONVERSÃO DO ÍON EM FORMA INSOLÚVEL; SURGIMENTO DE FASES; RECOLHIMENTO POR MEIOS FILTRANTES EM ANÁLISE; RECONVERSÃO NA FORMA DE PESAGEM.

31 MÉTODOS CLÁSSICOS DE DOSEAMENTO
EXISTEM SAIS QUE SÃO MUITO HIGROSCÓPICOS, ABSORVENDO ASSIM GRANDE QUANTIDADE DE ÁGUA ATMOSFÉRICA; DESSA MANEIRA NÃO PERMITEM A MEDIDA CORRETA DE SUAS MASSAS. DA MESMA FORMA, PRECIPITADOS GELATINOSOS ARRASTAM MUITA ÁGUA E AO EVAPORAR LEVAM IMPRECISÃO NA HORA DE EFETUAR A LEITURA.

32 MÉTODOS CLÁSSICOS DE DOSEAMENTO
POR ESTE MOTIVO, ALGUNS PRECIPITDOS SÃO CONVERTIDOS EM OUTRAS ESPÉCIES QUÍMICAS. COMO REGRAS PARA EFETUAR A PESAGEM DE UM PRECIPITADO, CONSIDERA-SE:

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COMPOSIÇÃO QUÍMICA CONHECIDA; FORMA DE PESAGEM – TEMPERATURA BAIXA E ESTÁVEL; NÃO SER HIGROSCÓPICA; DEVE POSSUIR PARTICULAS DE DIMENSÕES QUE NÃO PASSEM PELO MEIO DE FILTRAÇÃO

34 MÉTODOS CLÁSSICOS DE DOSEAMENTO
AS VANTAGENS DESSE MÉTODO ESTÁ NA S OPERAÇÕES UNITÁRIAS QUE SÃO DE FÁCIL EXECUÇÃO E DE BOA REPRODUTIBILIDADE E O USO DE EQUIPAMENTOS SIMPLES E DE BAIXO CUSTO.

35 MÉTODOS CLÁSSICOS DE DOSEAMENTO MÉTODOS CLÁSSICOS DE DOSEAMENTO
AS DESVANTAGENS: TEMPO NECESSÁRIO PARA EXECUÇÃO; GRANDE Nº DE OPERAÇÕES NECESSÁRIAS; ERROS IMPOSSIBILIDADE DE DETERMINAR MICRONUTRIENTES EXISTENTES NA AMOSTRA, PRINCIPALMENTE NA ESCALA P.P.M.

36 MÉTODOS INSTRUMENTAIS DE DOSEAMENTO
OS MÉTODOS INSTRUMENTAIS: MAIOR SENSIBILIDADE ESPECTROSCOPIA DE ABSORÇÃO UV VISÍVEL E INFRAVERMELHO ESCTROSCOPIA DE FLUORESCÊNCIA (FUORIMETRIA) POLARIMETRIA (ROTAÇÃO ÓTICA) REFRATOMETRIA (ÍNDICE DE REFRAÇÃO)

37 MÉTODOS INSTRUMENTAIS DE DOSEAMENTO
TÉCNICAS ELETROANALÍTCAS (VOLTAMETRIA, POLAROGRAFIA, POTENCIOMETRIA DIRETA E INDIRETA, ETC. ABSORÇÃO ATÔMICA HPLC-UV CROMATOGRAFIA GASOSA OUTRAS TÉCNICAS CROMATOGRÁFICAS

38 MÉTODOS INSTRUMENTAIS DE DOSEAMENTO
MÉTODOS ESPECTROSCÓPICOS: A seletividade e sensibilidade desses métodos dependem da: concentração da amostra estrutura química intensidade ou freqüência da energia utilizada.

39 MÉTODOS INSTRUMENTAIS DE DOSEAMENTO
ESPECTROMETRIA DE ABSORÇÃO NO UV-VISÍVEL Técnica aperfeiçoada continuamente – útil instrumento de medida Absorção e emissão de energia eletromagnética dos átomos e moléculas Determinação quantitativa de substâncias por luzes em soluções coloridas

40 MÉTODOS INSTRUMENTAIS DE DOSEAMENTO
Solução de luz branca  cor resultante da absorção dos vários comprimentos de onda. A absorção depende de: K – Natureza da substância C – Concentração L – Caminho ótico (espessura da solução que é atravessada pela luz). Solução “sem cor”  podem absorver energia eletromagnética, cuja freqüência é maior ou o comprimento de onda é menor.

41 MÉTODOS INSTRUMENTAIS DE DOSEAMENTO
LEIS DA FOTOMETRIA: Quando um raio de energia atravessa uma solução, a energia radiante incidente (Io) SERÁ MAIS INTENSA QUE A ENERGIA EMERGENTE (I), e a intensidade de energia fica mais atenuada, devido a:

42 MÉTODOS INSTRUMENTAIS DE DOSEAMENTO
a) Reflexões das interfaces entre o ar e a parede do recipiente (cubeta) b) Dispersão por partículas presentes na solução c) Absorção da energia pelo meio I I

43 MÉTODOS INSTRUMENTAIS DE DOSEAMENTO
LEI DE LAMBERT: 1ª LEI DA FOTOMETRIA QUANDO A ENERGIA RADIANTE ATRAVESSA SOLUÇÃO, QUANTIDADE DE ENERGIA TRANSMITIDA DIMINUI EXPONENCIALMENTE, EM RELAÇÃO AO AUMENTO DA ESPESSURA ATRAVESSADA.

44 MÉTODOS INSTRUMENTAIS DE DOSEAMENTO
ASSIM: IO = Intensidade luz incidente I = Intensidade de luz transmitida LOG IO = a . b a = constante da solução I b = espessura (cm) da camada atravessada pela luz

45 MÉTODOS INSTRUMENTAIS DE DOSEAMENTO
TRANSMITÂNCIA (T): É o coeficiente entre a intensidade de luz que atravessa a solução e a intensidade da luz incidente: T = I Io a transmitância INDEPENDE do valor absoluto da luz incidente e a fração desta luz, que é absorvida por um meio, é proporcional à espessura do meio atravessado, INDEPENDENDO da intensidade da luz incidente.

46 MÉTODOS INSTRUMENTAIS DE DOSEAMENTO
Io e I terão o mesmo valor: Quando a solução não absorver energia, logo será igual a 1; ou seja, 100% Conclui-se que: qualquer solução que absorva energia terá transmitância menor que 1 (porque I, neste caso, é menor que Io).

47 MÉTODOS INSTRUMENTAIS DE DOSEAMENTO
A correlação entre energia e concentração veio com a Lei de BEER: Quando a energia radiante atravessa uma solução, a quantidade de energia transmitida diminui exponencialmente, com o aumento da concentração da solução.

48 MÉTODOS INSTRUMENTAIS DE DOSEAMENTO
CURVA DE CALIBRAÇÃO SOLUÇÕES PADRÕES: Parte importante da análise quantitativa no laboratório e usada nas dosagens de amostras desconhecidas. Apresenta concentração exata de uma substância que servirá como referência na determinação fotométrica de ma substância desconhecida, tendo grande importância na curva de calibração.

49 MÉTODOS INSTRUMENTAIS DE DOSEAMENTO
CURVA DE CALIBRAÇÃO USO DOS BRANCOS: utilizado na espectrofotometria para estabelecer o Zero de absorvância ou 100% Transmitância. Em algumas dosagens, obtêm-se brancos com elevada absorbância, o que dificulta o acerto do zero em muitos aparelhos; neste caso a leitura do branco e do teste, é realizada, acertando o zero com água destilada e a seguir determina-se as diferenças entre o branco e o teste.

50 MÉTODOS INSTRUMENTAIS DE DOSEAMENTO
CURVA DE CALIBRAÇÃO importante no trabalho fotométrico. OBTENÇÃO DA CURVA DE CALIBRAÇÃO: Preparar uma série de padrões exatos, cobrindo a faixa de trabalho desejada ou indicada, usando o padrão recomendado para o método a ser calibrado. Dosar todos os padrões de acordo com a técnica recomendada; efetuar as leituras usando o branco apropriado e também o comprimento de onda recomendado pela literatura ou pela curva de absorção do espectro previamente realizada

51 MÉTODOS INSTRUMENTAIS DE DOSEAMENTO
CURVA DE CALIBRAÇÃO 3) Ao fazer as leituras em transmitância, recorrer à tabela de conversão transformando os resultando em absorbância. Plotar os resultados relacionando absorbância (ordenada) com as concentrações dos padrões (abscissa). Examinar os pontos obtidos e decidir se serão cobertos por uma linha reta. Se isso ocorrer, traçar a curva de modo que mais se aproxime de todos os pontos obtidos. A curva deve ser interpolada por meio dos pontos.

52 MÉTODOS INSTRUMENTAIS DE DOSEAMENTO
CURVA DE CALIBRAÇÃO 4) A curva de calibração deve ter ângulo de 45º em relação ao ponto de origem. Curvas de ângulos muito agudos ou obtusos não devem ser utilizadas porque não têm sensibilidade ideal.

53 MÉTODOS INSTRUMENTAIS DE DOSEAMENTO
B A – Curva muito sensível B – Curva Ideal 45º C – Curva pouco sensível C

54 MÉTODOS INSTRUMENTAIS DE DOSEAMENTO
A equação da reta de calibração y = bx + a, e o coeficiente de correlação (R) podem ser obtidos pelo método dos mínimos quadrado. Existe uma relação entre a curva de calibração e a lei de Lambert-Beer; e através dessa equação (relação) verifica-se que a absorbância (A) é diretamente proporcional a concentração (c).

55 MÉTODOS INSTRUMENTAIS DE DOSEAMENTO
ESPECTROMETRIA NO INFRAVERMELHO Uma das principais técnicas em ensaios de identificação e análises qualitativas Não é muito utilizada em doseamento

56 MÉTODOS INSTRUMENTAIS DE DOSEAMENTO
CROMATOGRAFIA Um dos métodos mais utilizados na indústria farmacêutica em doseamento de fármacos. Entre eles, a HPLC – cromatografia líquida de alta eficiência está presente como método da escolha para mais de 90% dos produtos.

57 MÉTODOS INSTRUMENTAIS DE DOSEAMENTO
CROMATOGRAFIA O sucesso da HPLC: Boa sensibilidade Baixa vulnerabilidade a interferências

58 MÉTODOS INSTRUMENTAIS DE DOSEAMENTO
CROMATOGRAFIA A cromatografia gasosa (CG) também é utilizada; embora apresente ótima resolução e sensibilidade, não se aplica a produtos de baixa estabilidade térmica e/ou volatilidade.

59 MÉTODOS INSTRUMENTAIS DE DOSEAMENTO
CROMATOGRAFIA A cromatografia de camada delgada (CCD) – ampla aplicação em ensaios de identificação, mas não apresenta precisão e sensibilidade compatíveis aos ensaios quantitativos.

60 MÉTODOS INSTRUMENTAIS DE DOSEAMENTO
CROMATOGRAFIA Gráficos com picos: representam a passagem do analíto pelo detector. O pico apresentado pode ser relacionado com a concentração do analíto desde que se tenha a curva de calibração com padrões. HPLC E CG

61 MÉTODOS INSTRUMENTAIS DE DOSEAMENTO
CROMATOGRAFIA Para se estabelecer uma correlação pico/concentração é necessário determinar a altura ou área dos picos cromatografados.

62 MÉTODOS INSTRUMENTAIS DE DOSEAMENTO
GRÁFICOS DE CALIBRAÇÃO ou Curva Analítica, ou Curva de Calibração: relação entre a resposta do instrumento e uma concentração do analíto. LINEARIDADE: determina até que ponto essa relação se mantém linear. Os gráficos de calibração são construídos pela análise de alíquotas de solução padrão, realizadas em replicatas.

63 MÉTODOS INSTRUMENTAIS DE DOSEAMENTO
Plota-se os valores no eixo das ordenadas (alturas dos picos) e no eixo das abscissas (concentrações). Encontra-se os pontos – a melhor relação se dá entre os pontos quando obtida por regressão linear (forma de encontrar a melhor linha reta por pontos experimentais que possuem alguma dispersão).

64 MÉTODOS INSTRUMENTAIS DE DOSEAMENTO
Através da regressão linear pode-se chegar no (r): COEFICIENTE DE CORRELAÇÃO LINEAR – mede o afastamento angular entre duas retas de regressão; ou seja, expressa o “quanto” os pontos avaliados caem sobre a reta estabelecida.

65 MÉTODOS INSTRUMENTAIS DE DOSEAMENTO
Quando o r = +/- 1, as declividades das retas serão idênticas e, portanto, haverá correlação linear perfeita entre elas. Quando r = 0, significa que as retas estão em ângulo reto e não existe correlação linear entre elas. Coeficientes de correlação acima de 0,95 são aceitáveis para a maioria dos métodos analíticos.