Citossolo: Enzimas de Glicólise (glicose até Piruvato)

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1 Citossolo: Enzimas de Glicólise (glicose até Piruvato)

2 Esquema geral de “fosforilação oxidativa” pela cadeia repiratória
(Fosforilação de ADP, oxidação de NADH e FADH2 )

3 Coenzima Q ou Ubiquinona “Q”

4 Porfirnas nos citocromos
Fe2+ (red) ou Fe3+ (ox)

5 Centros ferro-enxofre (Fe-S)
Fe2+ (red)/Fe3+ (ox)

6 Potenciais de redução de meia reações da cadeia respiratória
Eo: Medida de afinidade para e- da molécula/ion sendo reduzida DE’o = E’o (aceitor de e-) – E’o (doador de e-) Se DE > 0, reação tende ir para frente DG = -n x F x DE F = 96,5 kJ/V.mol

7 Método para determinação da seqência de carregadoras de elétrons
> E’o >

8 Separação dos complexos funcionais da cadeia respiratória

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10 Complexo I - NADH:ubiquinona oxidoreductase
Uma bomba de protons – utiliza a energia de transferência de elétrons para criar um gradiente de H+ através da membrana. A energia de transferência de e- está momentariamente guardada na forma desta gradiente. 42 subunidades Inibida por amytal (barbiturato), Rotenona (insecticida), e Piericidina A (antibiótico)

11 Complexo I: recebe e- de NADH e transfere para citQ Complexo II:
Recebe e- de FADH2 (em succinato desidrogenase no ciclo de Krebs) e transfere para cytQ.

12 Complexo III - ubiquinona:citocromo c oxidoreductase
Dímero de monômeros iguais Cada monômero tem 11 subunidades (somente monômero mostrado)

13 Receba e- de Q e transfere para citc
Dímero de Complexo III Oscila entre cytb e cytc1 QN e QP: sítios para ligação de citQ Receba e- de Q e transfere para citc e bombeia 4 H+ per citQH2 para fora da mitocôndria, aumentando o gradiente de H+.

14 (4e-) 4 citc  4 CuA  4 heme a  4 cita3/CuB  O2  2 H2O
Complexo IV - Citocromo oxidase: transfere e- de citc para O2, formando H20 (4e-) 4 citc  4 CuA  4 heme a  4 cita3/CuB  O2  2 H2O

15 DE’o = +1,14 volts, DG’o = 220 kJ/mol
NADH + H+ + ½ O2  NAD+ + H2O DE’o = +1,14 volts, DG’o = 220 kJ/mol Energia liberado pela oxidação é guardado na forma de um gradiente de H+. NADH + 11 H+N + ½ O2  NAD H+P + H2O “Força protomotiva” = DG = RTln(Cp/Cn) + ZFDy= 200 kJ per 10 H+ Energia de differença de carga (Dy=0,2 V) Energia da gradiente de H+(DpH=0,75)

16 FORÇA PROTOMOTIVA

17 Modelo quimioosmótico de geração de ATP a partir de gradiente de H+
ADP + Pi + nH+P  ATP + H2O + nH+N

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21 DNP – um desacoplador da
cadeia respiratória da síntese de ATP

22 Complexo F1 = a3b3gde

23 F0F1 ATP sintase

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25 g ou C-biotina-avidin-actina(fluorescente)

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28 Na sintase, cada 3 H+ produz 1 ATP
Mas precisa 1 H+ para transportar Pi Logo , 4 H+/ATP Logo: NADH desloca 10 H+ e produz 2,5 ATP FADH2 desloca 6 H+ e produz 1,5 ATP

29 Lançadeira malato-aspartato: transferência de NADHcit para mitocôndria

30 Lançadeira glicerol - fosfato

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