em diferentes amostras clínicas HANSENÍASE: uso da reação em cadeia da polimerase na detecção do Mycobacterium leprae em diferentes amostras clínicas Barbosa,V.G.1; Rocha-Silva, F.1; Nahum, L.A.2,3; Caligiorne, R.B.1 Instituto de Ensino e Pesquisa da Santa Casa de Belo Horizonte - IEPSCBH, Belo Horizonte, MG. 2. Grupo de Genômica e Biologia Computacional, Centro de Pesquisas René Rachou – CPqRR. Instituto Nacional de Ciência e Tecnologia em Doenças Tropicais – INCT-DT. Fundação Oswaldo Cruz – FIOCRUZ, Belo Horizonte, MG, 30190-002, Brazil. 3. Faculdade Infórium de Tecnologia, Belo Horizonte, MG, Brazil.   VGB: valeria.gomes@esocial.org.br FRS: fabianarocha_silva@yahoo.com.br LAN: laila@nahum.com.br RBC: rachelbc@santacasabh.org.br INTRODUÇÃO 1 RESULTADOS 0% 20% 40% 60% 80% 100% F1 F2 SG LP1 PL2 SG P1 P2 SG F1 F2 BP LP1 PL2 BP P1 P2 BP F1 F2 RD LP1 PL2 RD P1 P2 RD PCR Convencional Pacientes Positivos em tratamento Pacientes Positivos tratados com Reação Pacientes Positivos tratados com Sequelas Outras Doenças Contato com Pacientes Positivos OBJETIVOS Figura1: Comparação dos resultados da PCR convencional entre os diferentes grupos de pacientes. 0% 20% 40% 60% 80% 100% F1 F2 SG LP1 PL2 SG P1 P2 SG F1 F2 BP LP1 PL2 BP P1 P2 BP F1 F2 RD LP1 PL2 RD P1 P2 RD qPCR Pacientes Positivos em tratamento Pacientes Positivos tratados com Reação Pacientes Positivos tratados com Sequelas Outras Doenças Contato com Pacientes Positivos Figura2: Comparação dos resultados da qPCR entre os diferentes grupos de pacientes. MÉTODOS Figura3: Resultado comparativo das duas técnicas de PCR entre os diferentes tipos de amostra biológicas. DISCUSSÃO Tabela 1. Descrição dos iniciadores utilizados para a comparação das técnicas de PCR na detecção Mycobacterium leprae em amostras de pacientes do serviço de dermatologia da Santa Casa de Belo Horizonte. PRIMER FORWARD REVERSE BP ALVOS REFERÊNCIA LP1-LP2 TGCATGTCATGGCCTTGAGG CACCCGATACCAGCGGCAGAA   129 RLEP 1 F1-F2 GTGTTACGCGGAACCAGGCA CCATCTGTTGGTACTACTGA 124 STR locus: AC8a 2 P2-P3 CGGAAAGGTCTCTAAAAAATCTT CATCCTGCACCGCAAAAAGCTT 172 16rRNA 3 REFERÊNCIAS 1- Kang TJ, Kim SK, Lee SB, Chae GT, Kim, JP. Comparison of two different PCR amplification products (the 18-kDa protein gene vs RLEP repetitive sequence) in the diagnosis of Mycobacterium leprae. Clin Exp Dermatol.2003 Jul; 28(4):420-4. 2- Gillis T, Vissa V, Matsuoka M, Young S, Richardus JH, Truman R, Hall B, Brennan P, Ideal Consortium Partners. Characterisation of short tandem repeats for genotyping Mycobacterium leprae. Lepr Rev. 2009 Sep; 80(3): 250-60. 3- Bang PD, Suzuki K, Phuong LT, Chu TM, Ishii N, Khang TH.Evaluation of polymerase chain reaction-based detection of Mycobacterium leprae for the diagnosis of leprosy. J Dermatol.2009 May; 36(5):269-76. 4- Goulart IMB, Cardoso AM, Santos MS, Gonçalves MA, Pereira JE, Goulart LR. Detection of Mycobacterium leprae DNA in skin lesions of leprosy patients by PCR may be affected by amplicon size. Arch Dermatol Res. 2007; 299: 267-71. 5- Rudeeaneksin J, Srisungngam S, Sawanpanyalert P, Sittiwakin T, Likanonsakul S, Pasadorn S, Palittapongarnpim P, Brennan PJ, Phetsuksiri B. LightCycler TM real-time PCR for rapid detection and quantitation of Mycobacterium leprae in skin specimens. FEMS Immunol Med Microbiol.2008 Nov; 54(2): 263-70. 6- Bang PD, Suzuki K, Phuong LT, Chu TM, Ishii N, Khang TH.Evaluation of polymerase chain reaction-based detection of Mycobacterium leprae for the diagnosis of leprosy. J Dermatol.2009 May; 36(5):269-76. Apoio financeiro: PROSUP/Cursos Novos 059/2010