Biotecnologia da Reprodução Prof. Msc. Marcelo Arne Feckinghaus

Bases Fisiológicas Fases do ciclo estral Hipotálamo controla hipófise Proestro, estro, metaestro e diestro Interações entre SNC e órgãos genitais Hipotálamo controla hipófise Hormônios liberação pulsátil GnRH Receptores específicos (adeno-hipófise)

Bases Fisiológicas PGA modula resposta GnRH Estrógeno ↓ freqüência do pulso de GnRH Estrógeno Ação depende da PGA Fase Luteínica: ↓ freqüência GnRH Fase Folicular (pré-ovulatória): ↑ freqüência GnRH

Bases Fisiológicas Interferências Ambiente (temperatura, fotoperíodo) Estado nutricional Manejo do rebanho Estresse Amamentação Opióides endógenos inibem GnRH Feromônios masculinos

Bases Fisiológicas Inibição hormonal LH regulado pelo GnRH Inibina Supressão de FSH LH regulado pelo GnRH PGA influencia Balanço energético Amamentação

FSH X LH

Superovulação Mecanismo exato de recrutamento desconhecido Dominância e atresia Relação com FSH Ondas foliculares 2 até 3 depende da fase luteínica

Superovulação Definição: Método de estimulação folicular para desenvolvimento de DIVERSOS folículos terciários até a ovulação

Superovulação Simplificando: Suprir deficiência de FSH antes que o folículo dominante cause a diminuição endógena do mesmo! Neutralização da dominância

Superovulação Inibição: Ativa X Passiva Alternativas Passiva = ↓ [] de FSH até a incombatibilidade Ativa = Substâncias ↓ sensibilidade a GnRH Alternativas Gonadotrofinas (eCG, hCG e FSH) Resposta variada

Superovulação Variações: Imprecisão na sincronia ovariana Atividade biológica Dose Idade e raça da doadora Fatores individuais

Superovulação Emergência (início) da onda folicular Melhor resposta ao FSH Antes da dominância

Fecundação e Desenvolvimento Tempo de capacitação Mudanças bioquímicas e estruturais Remoção de substâncias (plasma seminal) Entrada de cálcio = Atividade flagelar Reação acrossômica = poder de penetração Maior durabilidade do espermatozóide Oócito = 20 -24 horas Espermatozóide (sptz) = 24 – 48 horas

Fecundação e Desenvolvimento Fecundação 6 horas após a ovulação Inseminação antes da ovulação Primeiro contato corona radiata e zona pelúcida Pressão estimula a fusão das membranas (acrossomal e plasmática)

Fecundação e Desenvolvimento Pontos de fusão liberação de enzimas = Penetração Ruptura + Penetração = Restabelecimento da ZP Reinício da meiose (pronúcleos) Formação do zigoto

Fecundação e Desenvolvimento Aproximação e junção dos pronúcleos = singamia Divisões mitóticas = clivagem Blastômeros = ↓ tamanho e ↑ número ↑ força de coesão celular = compactação celular = mórula

Fecundação e Desenvolvimento 13 a 32 blastômeros = 4 a 5 dias Divisão e especialização celular = blastocisto inicial Embrioblastos e trofoblastos Feto e placenta

Fecundação e Desenvolvimento Blastocele = cavidade Pressão = Rompimento da zona pelúcida Blastocisto eclodido Melhores resultados antes da eclosão

Dia 2 = 4 células

Dia 3 = 8 células

Dia 4 = 16 células

Dia 5 ou 6 = Mórula

Dia 6 -7 = Blastocisto

Dia 7 – 8 = Blastocisto Expandido

Dia 8 – 9 = Blastocisto Eclodido