EXTRACÇÃO DE DNA PROBLEMA: Como isolar a molécula de DNA?

EXTRACÇÃO DE DNA MATERIAL: Gobelés Funil Kiwi Varinha mágica  Papel de filtro  Água  Sal  Etanol (96%)  Vareta de vidro Kiwi Varinha mágica Um copo alto Detergente de louça um bisturi

EXTRACÇÃO DE DNA PROCEDIMENTO: 1 - Preparar a solução de extracção: detergente 8%;       sal de cozinha 3%.   2 - Descascar e cortar o kiwi em pedaços. 3 - Triturar o Kiwi com a solução de extracção. (3 segundos, 3 vezes)   4 - Filtrar utilizando um filtro de café.   5 - Com cuidado, adicionar etanol frio, tendo o cuidado de não misturar o etanol com o filtrado.      

EXTRACÇÃO DE DNA RESULTADOS: Formação de duas fases distintas.  O DNA precipita formando filamentos visíveis.

EXTRAÇÃO de DNA de CÉLULAS DO EPITÉLIO BUCAL EXTRACÇÃO DE DNA EXTRAÇÃO de DNA de CÉLULAS DO EPITÉLIO BUCAL

EXTRAÇÃO de DNA de CÉLULAS DO EPITÉLIO BUCAL EXTRACÇÃO DE DNA EXTRAÇÃO de DNA de CÉLULAS DO EPITÉLIO BUCAL PROCEDIMENTO:  Preparar uma solução salina muito concentrada.  Colocar uma porção dessa solução salina na boca e bochechar vigorosamente durante 2 minutos.  Colocar o obtido num gobelé e filtrar em seguida.  Marcar duas linhas num tubo de ensaio, uma ao meio do tubo e outra perto do bordo.  Transferir o filtrado para um tubo de ensaio até à primeira linha.  Adicionar, cuidadosamente, etanol até à segunda linha.  Observar com atenção e registar.

EXTRACÇÃO DE DNA CONCLUSÃO RESULTADOS: Isolar ao molécula de DNA CONCEPTUALIZAÇÃO METODOLOGIA PROBLEMA Isolar ao molécula de DNA TEORIA: Teoria celular – organização celular e função dos organitos CONCEITOS: Membrana plasmática Citoplasma Ribossomas Aparelho de Golgi Retículo Endoplasmático liso Retículo Endoplasmático rugoso Mitocôndria Cloroplasto Núcleo Membrana Nuclear Lisossomas … ACTIVIDADE LABORATORIAL Extracção de DNA das células de kiwi /Clélulas do epitélio bucal  RESULTADOS: Formação de duas fases distintas. O DNA precipita formando filamentos visíveis.  CONCLUSÃO O DNA existe quer em células animais quer em células vegetais

EXTRACÇÃO DE DNA Tópicos para discussão Quais são as estruturas celulares e qual a sua composição?

EXTRACÇÃO DE DNA As membranas, celular e nuclear são compostas principalmente por lípidos. As proteínas encontram-se aprisionadas na bicamada lipídica. Os organitos celulares são compostos por proteínas, ácidos nucleicos ( DNA e RNA ), envolvidos por uma membrana.

EXTRACÇÃO DE DNA 2. Qual a função do sal?

EXTRACÇÃO DE DNA O sal proporciona um ambiente favorável para o processo de extração pois contribui com íons positivos (NA+) que neutralizam a carga negativa do DNA.

EXTRACÇÃO DE DNA 3. Porque utilizamos um liquidificador?

EXTRACÇÃO DE DNA O liquidificador ajuda a quebrar mecanicamente as membranas da célula

EXTRACÇÃO DE DNA 4. Porque utilizamos um liquidificador?

EXTRACÇÃO DE DNA O liquidificador ajuda a quebrar mecanicamente as membranas da célula

EXTRACÇÃO DE DNA 5. O que acontece quando se adiciona o detergente?

EXTRACÇÃO DE DNA As enzimas presentes no detergente desestruturam as moléculas de lipídios presentes nas membranas celulares

EXTRACÇÃO DE DNA 6. Qual o papel do álcool?

EXTRACÇÃO DE DNA O DNA é insolúvel em álcool e deste modo se separa da solução. O DNA é menos denso que a água e os restantes elementos celulares, por isso surge à superfície da solução

EXTRACÇÃO DE DNA 7. Por que não podemos observar a dupla hélice?

EXTRACÇÃO DE DNA A estrutura de dupla hélice só pode ser visualizada de modo indireto e através de aparelhos sofisticados. O obsrvamos são milhares de moléculas de DNA.

EXTRACÇÃO DE DNA 8. Onde se encontra o DNA?

EXTRACÇÃO DE DNA Cerca de 99% do DNA encontra-se no núcleo da célula. O restante DNA encontra-se em locais específicos, como por exemplo organitos ( as mitocôndria e os cloroplastos possuem o seu próprio DNA ). Apesar desses organitos terem o seu próprio cromossoma eles não podem contar com a sua informação. As mitocôndrias e cloroplastos necessitam de genes especiais situados noutros organitos. Para a maioria das funções, estes organitos utilizam os cromossomas nucleares.