MECANISMO MOLECULAR PARA EPISTASIA RECESSIVA Se um ou mais intermediários em uma via bioquímica são coloridos. Ex: Planta Collinsia parviflora.

EPISTASIA RECESSIVA B -/ E- ALELOS B e b = PELAGEM DE CÃES LABRADOR B = PRETO e b = MARROM ALELO e de outro gene = EPISTÁTICO sobre esses alelos = AMARELO B -/ ee Bb/ee B -/ E- bb-/ E-

INTERAÇÃO GÊNICA NA PELAGEM DE MAMÍFEROS Gene A – Determina a distribuição do pigmento Gene B – Determina a cor do pigmento Gene C – Determina a expressão da cor. C= permite c= impede Gene D – Controla a intensidade do pigmento.

Alelo A = Agouti (cinza salpicado) Alelo a = cor escura uniforme

Alelo B = cor normal agouti ( associado com A) cor preta uniforme (associado com aa) Genótipo A-/ bb = cinamom (marrom listrado) Genótipo aa/ bb = marrom uniforme Alelo C = Permite a expressão do pigmento cc = epistática a outros genes de cor -- cc = albinos c h = himalaio – sensível ao calor Alelo D = Intensidade DD ou Dd = intensidade total da cor Dd = diminui a intensidade dando um aspecto leitoso

LIGAÇÃO GÊNICA MENDEL Segregação independente. BATESON e PUNNETT – Genes que apresentavam uma proporção distinta daquela prevista por Mendel em F2 - LIGADOS

  Exemplo: Em um cruzamento em plantas, envolvendo um par de genes, onde suponhamos: 1-    Ambos são genes autossômicos; 2-    Para cada gene, um alelo é totalmente dominante sobre o outro; 3-    Não envolve epistasia RESULTADOS DOS CRUZAMENTOS  P AABB X aabb F1 AaBb

a)    Se forem genes localizados em cromossomos distintos: -  O heterozigoto produziria 4 tipos distintos de gametas, na mesma proporção; -  A progênie teria 50% dos indivíduos com o fenótipo parental e 50% com o fenótipo recombinante.   Se forem genes ligados: 1ª suposição – A e B estão completamente ligados, logo todos os gametas só teriam combinações parentais, não havendo recombinantes. 2ª suposição – Não haveria ligação completa, logo os resultados seriam intermediários. GAMETAS – Recombinantes seriam abaixo de 50% - X-OVER

MORGAN – Ligação e crossing-over – Drosophila -         Cor do corpo e formato da asa CROSSING-OVER – Processo através do qual ocorre a recombinação dos genes, já que partes dos cromossomos homólogos são trocadas. CARACTERÍSTICAS MAIS IMPORTANTES 1-    Estágio 2-    Complexo sinaptonêmico 3-    Recombinação 4-    Quiasmas 5-    Distância entre loci.

BASE CITOLÓGICA DO X-OVER   MORGAN- Genótipos recombinantes surgiam devido à ocorrência de X-over. JANSSENS- visualizou a ocorrência de x-over, através da observação dos quiasmas em anfíbios. STERN (Dosophila) e McCLINTOCK (milho) - Evidência direta da relação entre quiasmas e crossing.

♀ selvagem (verm. e redondo) EXPERIMENTO DE STERN   B B+ B+ ♀Olhos vermelhos, bar X ♂ olhos carnation, normais car car+ car GAMETAS car B+ Y car B ♀carnation bar ♂carnation bar car+ B+ ♀ selvagem (verm. e redondo) ♂ selvagem ♀ carnation e redondo ♂ carnation redondo car+ B ♀ vermelho bar ♂ vermelho bar

X-OVER OCORRE NO ESTÁGIO DE TÉTRADES PÓS-REPLICAÇÃO   X-OVER OCORRE NO ESTÁGIO DE TÉTRADES PÓS-REPLICAÇÃO  ü    O crossing ocorre após a duplicação cromossômica, onde cada cromossomo está 2 cromátides.    A recombinação detectável ocorre entre 2 cromátides não irmãs. ü    X-over ocorre em organismos homozigotos, mas novas combinações só serão possíveis em organismos heterozigotos para 2 ou mais loci.  PROVA DO ESTÁGIO = Experimento com Neurospora crassa demonstram que o x-over ocorre na fase de tétrades, pois caso contrário todos os produtos de um evento meiótico possuíram recombinações de marcadores genéticos.  DEMONSTRAÇÃO  a)    Hipótese de ocorrência antes da replicação b) Hipótese de ocorrência do x-over após a replicação cromossômica

MMAPEAMENTO CROMOSSÔMICO GGRUPOS DE LIGAÇÃO – corresponde a um dos pares de cromossomos homólogos no genoma das espécies – 2n = 8 logo há 4 grupos de ligação. ü    Os grupos de ligação da espécie humana NÃO podem ser investigados como dos organismos citados logo outras técnicas sã usadas como o bandeamento cromossômico. ü    Todos os mapas de ligação são LINEARES e não apresentam ramificação (mesmo os circulares).

CRUZAMENTOS COM 2 FATORES   STURTEVANT – “A freqüência dos gametas recombinantes produzidos deverá ser o índice de distância entre os 2 loci em um cromossomo.” MAPAS DE LIGAÇÃO – Passam a ser quantitativos sendo que cada 1% de recombinação equivale a 1 unidade de mapa. Probabilidade de Permuta = K (distância), onde K é uma constante de proporcionalidade, assim as distâncias são ADITIVAS. Quanto maior a distância entre os genes maiores serão os desvios com relação à aditividade, devido a ocorrência de permutas duplas, o que pode diminuir a % de recombinantes detectáveis.   FFREQÜÊNCIA DE RECOMBINAÇÃO ü    A freqüência máxima de recombinação é de 50%. SSUPOSIÇÕES PARA PERMUTAS DUPLAS 1-    Em dois filamentos, envolvendo as mesmas cromátides – todos os gametas terão combinações parentais. 2-    Em três filamentos – Metade dos gametas serão parentais e a outra metade serão recombinantes. 3-    Em quatro filamentos – Todos serão recombinantes.    

CCRUZAMENTOS COM TRÊS FATORES   ü    Resultados de permutas duplas não detectáveis (2 fatores) poderão ser ordenados. ü    Gametas do tipo parental = freqüências muito mais altas – ajuda a determinar se é cis ou trans. ü    As classes da progênie resultantes das permutas duplas serão as de menores freqüências.   INTERFERÊNCIA Muller 1916 – Observou que o número de permutas duplas é menor que o esperado, propôs que havia INTERFERÊNCIA, ou seja, a ocorrência de uma permuta diminui a probabilidade de ocorrência da próxima permuta. Coeficiente de Coincidência = freq. observada de permuta dupla freq. esperada de permuta dupla Coeficiente de Coincidência =1 – Interferência = 0 Coeficiente  1 = Interferência positiva Coeficiente  1 = Interferência negativa    

+ + + =39 + m p = 402 + + p = 2 d + p = 50 d + + = 416 d m p = 48 No tomate, os seguintes genes estão localizados no cromossomo 2: + planta alta d planta anã + folhas verdes m folhas verdes salpicadas + fruto liso p fruto pubescente (piloso) Os resultados do cruzamento entre uma planta heterozigota e uma planta homozigota foram: + + + =39 + m p = 402 + + p = 2 d + p = 50 d + + = 416 d m p = 48 + m + = 42 d m + = 1

+ + + =39 + m p = 402 + + p = 2 d + p = 50 d + + = 416 d m p = 48 1º passo: Localizar as combinações parentais 2º passo: Localizar as classes de crossing-over duplos 3ºpasso: Calcular as distâncias entre os genes.

m p + + = (m +) e ( + p) = 2+42+50+1 0,095 1000 + p d + = (+ +) e ( d p) = 39+42+50+48 0,179 1000 + m d + = (d m) e (+ +) = 39+2+48+1 0,090 1000

9,0 um 9,5 um d m p 17,9 4º Cálculo da Interferência e Coeficiente de Coincidência Coeficiente de Coincidência = freq. observada de permuta dupla freq. esperada de permuta dupla Interferência = 1 – Coeficiente de Coincidência Coeficiente  1 = Interferência positiva Coeficiente  1 = Interferência negativa