TOXOPLASMOSE Toxoplasma gondii Parasitologia – Farmácia

1908-Nicolle e Manceaux Ctenodactylus gondii (Tunísia) 1980 Spendore – coelhos de laboratório - Brasil Toxoplasma gondii

1937-Descrito o primeiro caso de infecção humana Adquirido pela ingestão de carne crua ou mal passada. Mas como explicar a alta prevalência? Somente em 1965 – transmissão através das fezes de gatos 1999 – Demonstrou-se reprodução sexuada de T. gondii ex- clusivamente no epitélio digestivo dos gatos e outros felinos Toxoplasma gondii

Posição sistemática ClasseOrdemFamíliaGênero Eucoccidiida Eimeriidae Isospora Cryptosporidiidae Cryptosporidium Sarcocystidae Sarcosystis Sporozoa Toxoplasma Hemosporidiida PlasmodiidaePlasmodium Reino : Protista Sub-reino: Protozoa Filo: Apicomplexa

T. gondii : Filogenia Baseado na 18s rRNA

TOXOPLASMOSE: Generalidades INFECÇÃO IMPORTÂNCIA  Zoonose  Cosmopolita (10-75%)  Infecção crônica assintomática  Grande adaptação do parasitaria  Prevalência da infecção humana  Problemas de Saúde Pública: gestante e imunodeprimido  Importância veterinária

TOXOPLASMOSE BIOLOGIA ESTÁGIOS MORFOLOGIA  Reprodução intracelular (assexuada)  Multiplicação por endodiogenia  Esporozoítos (Oocistos)  Taquizoítos (Pseudocistos e formas livres)  Bradizoítos (cistos tissulares)  Complexo Apical : Organelas do aparelho excretor

TOXOPLASMOSE BIOLOGIA ESTÁGIOS MORFOLOGIA  Reprodução intracelular (assexuada)  Multiplicação por endodiogenia  Esporozoítos (Oocistos)  Taquizoítos (Pseudocistos e formas livres)  Bradizoítos (cistos tissulares)  Complexo Apical : Organelas do aparelho excretor

Reprodução intracelular

Multiplicação por endodiogenia

MOVIE 1 (Multiplicando-se....) Pelletier et al., Nature :

TOXOPLASMOSE BIOLOGIA ESTÁGIOS MORFOLOGIA  Reprodução intracelular (assexuada)  Multiplicação por endodiogenia  Esporozoítos (Oocistos)  Taquizoítos (Pseudocistos e formas livres)  Bradizoítos (cistos tissulares)  Complexo Apical : Organelas do aparelho excretor

Esporozoítos (Oocistos) 10 – 12  m de diâmetro Forma subesférica ou elipsóide 1- 5 dias para esporulação no solo (esporogonia) Forma infectante do ciclo

Taquizoítos (pseudocistos e formas livres) 4-8  m comprimento 2-4  m largura Forma de divisão rápida Fase aguda da infecção

Bradizoítos (cistos tissulares)  m de diâmetro Rodeados por envoltórios císticos Forma de divisão lenta Fase crônica da infecção

Fatores associados a interconversão entre taquizoítos e bradizoítos

T. gondii : Ciclo de Vida

TOXOPLASMOSE: Vias de Transmisão  Transmissão Horizontal (ingestão): *Esporozoitos em oocistos esporulados (formas resistentes presentes na água, terra, alimentos mal lavados, etc) *Bradizoítos de cistos tissulares presentes em carnes cruas ou pouco cozidas (suína e ovina)  Transmissão vertical (congênita): * Taquizoítos pasam ao feto em caso de infecção aguda materna

TOXOPLASMOSE BIOLOGIA ESTÁGIOS MORFOLOGIA  Reprodução intracelular (assexuada)  Multiplicação por endodiogenia  Esporozoítos (Oocistos)  Taquizoítos (Pseudocistos e formas livres)  Bradizoítos (cistos tissulares)  Complexo Apical : Organelas do aparelho excretor

T. gondii: Ultraestrutura (Complexo Apical)

Toxoplasma gondii - invasão intracelular extracelular reconhecimento adesão membrana célula hospedeira vacúolo parasitóforo penetração

MOVIE 2 (Entrando na célula...) Lovett & Sibley, J. Cell Science :3006-9

PREVALÊNCIA DA INFECÇÃO  Distribuição universal  Incidência a nível mundial (10-75%) Brasil (50-80%) São Paulo (60-70 % de gestantes soropositivas)  Toxoplasmose congênita no Brasil (subclínica) 1 – 4 / 1000 gestações  Incidem hábitos alimentares, densidade de gatos de rua, situação sócio-econômica e cultural, etc  Aumento com a idade TOXOPLASMOSE: Epidemiologia

Incidência mundial

DADOS DE PREVALÊNCIA MUNDIAL

TOXOPLASMOSE: Aspectos Clínicos HOSPEDEIRO IMUNOCOMPETENTE HOSPEDEIRO IMUNODEPRIMIDO  Toxoplasmose pós-natal: Forma assintomática ( 80 a 90%) 1% Linfadenopatia febril com linfocitose  Toxoplasmose congênita (5-15% aborto/ 8-10% lesões graves): Lesões do sistema nervoso (hidrocefalia ou microcefalia) Lesões da retina (coriorretinite)  Reactivação de formas existentes  Formas graves  Toxoplasmose cerebral com maior frequência  Toxoplasmose pulmonar

Toxoplasmose congênita Lesão na retina Lesão no cérebro

TOXOPLASMOSE: Diagnóstico MÉTODOS DIRETOS MÉTODOS IMUNOLÓGICOS Deteção microscópica de oocistos Coloração de cortes de tecidos Inoculação em camundongos Cultivo celular PCR Técnicas quantitativas: Teste de Sabin-Feldman IFA ELISA AGLUTINAÇÃO Técnicas qualitativas: Western Blot

Toxoplasma gondii : Diagnóstico sorológico Imunofluorescência indireta, ELISA, aglutinação, Western blot: –IgM - fase aguda (podem persistir por longos períodos) –IgG - fase crônica –Avidez IgG – alta avidez indica doença crônica (afasta doença nos últimos 3-4 meses) –No RN: IgA, IgM, IgG por Western blot

TOXOPLASMOSE : Tratamento pirimetamina e sulfonamidas em forma combinada atuam em forma sinérgica bloqueando, respectivamente –as vias do ácido p-aminobenzóico –o ciclo do ácido fólico (presente no Toxoplasma e outros protozoários, mas não em vertebrados)

TOXOPLASMOSE: Controle MEDIDAS PREVENTIVAS  Não comer carne crua ou mal cozida  Lavar as mãos após manipular carne crua  Lavar com água abundante as frutas e verduras cruas  Lavar bem as mãos após contato com gatos ou outros animais  Evitar contato com sustâncias que possam estar contaminadas com fezes de gato  Não alimentar os gatos com carne crua  Acompanhamento sorológico das gestantes

T. gondii: Genômica e Pós-genômica GENÔMICA  Organização genômica  Sequenciamento do genoma  Sequenciamento de ESTs  Bancos de dados  Bioinformática

Bancos de dados

Esporozoários Toxoplasma Cyclospora Isospora Cryptosporidium Plasmodium Protozoários e imunodepressão Trypanosoma Leishmania Giardia Flagelados Amebas Metazoário: Strongyloides Microsporídeos

Parasitoses em pacientes imunodeprimidos Causas de imunodepressão: Congênitas Adquiridas: quimioterapia (tratamento de neoplasias) aplasia de medula tratamento imunossupressivo (doenças auto-imunes) AIDS

Coccídeos intestinais: um só hospedeiro (monoxeno) 4 esporozoítos nus 2 esporocistos com 2esporozoítos cada 2 esporocistos com 4 esporozoítos cada

Cyclospora Recentemente identificado Cyclospora cayetanensis cistos semelhantes aos de Cryptosporidium O oocisto não é esporulado. No meio ambiente a esporulação demora de dias a semanas

Cryptosporidium Inúmeras espécies infectam animais. C. parvum infecta o homem e mamíferos Principalmente intestino delgado Outras localizações: trato respiratório, vias biliares Provavelmente causa muito comum de diarréia “O oocisto é esporulado” Principalmente intestino delgado Outros localizações: trato respiratório, vias biliares

Isospora Isospora belli : parasita homens e animais outras espécies: aves imaturomaturo

Protozoários e imunodepressão Transmissão: Oral-fecal Pessoa-a-pessoa Água e alimentos contaminados Diagnóstico (principalmente nas fezes) Colorações especiais Imunohistoquímica Métodos moleculares Tratamento: Para muitos destes parasitas não há terapêutica eficaz