Fundamentos de Engenharia Genética

Apresentação em tema: "Fundamentos de Engenharia Genética"— Transcrição da apresentação:

1 Fundamentos de Engenharia Genética
Prof. Ana Rita Rainho

2 Manipulação genómica Genoma humano: 3 mil milhões de pares de bases
Cada molécula contém dezenas de milhão de pares de bases Como encontrar um determinado gene? Como o separar dos restantes?

3 Endonucleases de restrição
Mecanismo natural de defesa de algumas bactérias contra os vírus que as infectam. Actuam em pontos específicos, promovendo o corte da cadeia de DNA viral.

4 Enzimas de Restrição

5 Corte de ADN efectuado pela enzima Eco RI.
Só cortará a molécula se encontrar uma sequência específica de 5’ para 3’. Sequência é igual nas duas cadeias, nos dois sentidos. Repete o procedimento sempre que encontrar a sequência. Em cada cadeia simples ficam pequenas extensões – extremidades coesivas.

6 Formação de um DNA recombinante
Permite a inserção de um gene específico noutro organismo. Utiliza ligases de DNA que unem fragmentos por complementari- dade de bases às extremidades coesivas que ficaram livres depois da acção das endonucleases de restrição.

7 Técnica do DNA recombinante
Permite inserir genes de um organismo noutro, conferindo-lhe novas propriedades. Utiliza vectores que transportam o gene de um organismo para o outro Ex: plasmídeos das bactérias

8 Obtenção de DNA recombinante
Obtenção de um DNA recombinante

9 Obtenção de plantas transgénicas

10 Obtenção de animais transgénicos

11 DNA complementar Permite obter DNA a partir de um mRNA maduro.
Facilita a obtenção de DNA no seu estado mais puro.

12 Reacção de Polimerização em Cadeia (PCR)

13 Aplicações das Técnicas de Engenharia Genética
PCR – permite a ampliação de uma amostra de material genético para aplicar em vários testes sem perder a amostra inicial. Enzimas de Restrição (electroforese) – Diagnóstico genético (doenças, testes de paternidade, investigação forense). DNA recombinante/DNA complementar: OGMs Utilização de microrganismos geneticamente modificados como “fábricas” de substâncias com interesse (ex: antibióticos, insulina, hormona de crescimento); Modificação genética de organismos para adquirir determinadas características com interesse (ex: “arroz dourado”, plantas com capacidade de resistir a infecções). Terapia Génica Somática – substituição (em crianças) de genes que provocam doenças hereditárias num indivíduo adulto.

14 Terapia Génica Somática
Permite a substituição (em crianças pequenas) de genes que provocariam doenças hereditárias quando se tornasse num indivíduo adulto

15 Electroforese em gel Utilização de enzimas de restrição para seccionar cadeias de DNA A aplicação de uma corrente eléctrica provoca a migração dos fragmentos de acordo com o seu tamanho. Como cada indivíduo tem uma sequência genómica única, o resultado são padrões específicos individuais

16 Electroforese em gel Aplicação da corrente eléctrica nas amostras
A semelhança do padrão das bandas indica semelhança no genoma dos indivíduos

17 Aplicações da técnica de Electroforese em gel
(DNA fingerprint)

18 Mais material disponível em: