Detecção Molecular de Espécies de Riquetsias Circulantes no Sul e Centro de Moçambique Por: Vlademiro Magaia, Nidia Cangi, Elisa Taviani e Luis Neves 5º.

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1 Detecção Molecular de Espécies de Riquetsias Circulantes no Sul e Centro de Moçambique Por: Vlademiro Magaia, Nidia Cangi, Elisa Taviani e Luis Neves 5º Seminário Nacional de Divulgação de Resultados dos Projectos Financiados pelo FNI Maputo, 20-21 de Novembro 2014

2 Estrutura da Apresentação I.. Introdução; II. Objectivos do projecto; III. Metodologia e resultados; IV. O papel da instituição que aloja o projecto; V. Desafios e constrangimentos; VI. Proposta de solução; VII. Sustentabilidade do projecto;

3 I. Introdução Riquétsias são bactérias intracelulares obrigatórias e causam doenças que afectam o Homem e animais bravios e domésticos São transmitidas principalmente por carraças dos géneros Amblyomma, Rhipicephalus, Dermacentor e Ixodes causando uma doença designada riquetsiose. O género Rickettsia divide-se em dois grupos: tifo e febre maculosa. O quadro sintomatológico é moderado, mas a doença pode ser mais grave em idosos, sendo caracterizada por febre, dor de cabeça, náuseas, e mialgia

4 Introdução (2) Em África as espécies R.africae, R.conorii são consideradas as mais importantes. As carraças do género Amblyomma e Rhipicephalus servem simultaneamente como vector e reservatório de R.africae, e R. conorrii respectivamente Nos últimos anos os métodos serológicos contribuíram bastante para o diagnóstico de riquétsias, contudo apresentam algumas limitações relacionadas principalmente com baixa sensibilidade e especificidade, quando comparados aos moleculares baseados em PCR

5 II. Objectivos do projecto Geral: Detectar e caracterizar molecularmente bactérias do género Ricketttsia circulantes na região Sul e Centro de Moçambique, em carraças e sangue humano. Específicos: Optimizar e validar a técnica molecular para a detecção de bactérias do género Rickettsia do grupo da febre maculosa; Caracterizar molecularmente estirpes do género Rickettsia, circulantes na região Sul e Centro de Moçambique; Aferir a consistência de detecção das estirpes do género Rickettsia, circulantes na região Sul e Centro de Moçambique;

6 III. Metodologia e Resultados Extracção de DNA de carraças Detecção por PCR (gltA, ompB e ompA) Sequenciamento (32 amostras) Alinhamento e construção de árvores filogenéticas Colheita de carraças (A.hebraeum=600, A.variegatum=100 e 1000 larvas) em 13 distritos Colheita de sangue humano no INS -150

7 Locais de colheita de amostras

8 Principais resultados alcançados A técnica molecular usada neste estudo (PCR), mostrou ser sensível e eficaz na detecção de riquétsias do grupo da febre maculosa; 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 C- C+ M 650Pb Análise do produto de PCR para o gene ompA, 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 C- C+ M 500Pb Análise do produto de PCR, para o gene ompB,

9 Principais resultados alcançados (2) As riquétsias ocorrem em Moçambique nos locais estudados com homólogia as espécies R.africae e R.conorii.

10 IV. O papel da instituição que aloja o projecto Garantir a plataforma técnica e infraestrutural para a realização do estudo em ambiente apropriado; Acompanhar e supervisionar a realização do estudo.

11 V. Desafios, constrangimentos Detecção de riquétsias em sangue humano Atraso verificado na tranferência e autorização para utilização dos fundos do projecto, por parte do FNI; A dificuldade para aquisição de reagentes de fornecedores no estrangeiros, dada a especificidade da área de estudo e debilidade do mercado Nacional em prover a tempo os mesmos; Morosidade no fornecimento de consumíveis (procurement e entrega) que prende-se fundamentalmente à ineficiência das empresas fornecedoras e aos procedimentos caóticos adoptados pelas Alfândegas de Moçambique.

12 VI. Proposta de solução Optimizar os protocolos para detecção de riquétsias em sangue humano Mais abertura e flexibilidade por parte do FNI na gestão dos fundos, principalmente no que concerne a transferência e comunicação; Melhorar os mecanismos para as excepções na aquisição de produtos de fornecedores no estrangeiros, tornando a investigação em Moçambique mais competitiva e relevante; Proposição concertada inter sectorial de uma “linha verde” para para consumíveis e equipamentos de investigação.

13 VII. Sustentabilidade do projecto O projecto irá contribuir para o estabelecimento de um sistema de vigilância, diagnóstico e controlo de riquetsioses em Moçambique, onde se prevê a colaboração estreita entre o CB-UEM e o INS;

14 Obrigado