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O segredo da Vida...
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Watson e Crick
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A=T C=G
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DNA se replica Originando duas moléculas filhas iguais.
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Como copia...
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Replicação de DNA
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Ligação fosfodiester A reação de polimerização é feita pela DNA polimerase e necessita de nucleotídeos trifosfatos, uma extremidade “primer” ou iniciadora, que possui a hidroxila 3’ livre e um molde ou “template” para ser copiado.
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“Bolha” de replicação
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Replicação unidirecional gera fragmentos: Fragmentos de Okazaki
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DNA polimerase I tem função editorial
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Seqüenciamento de DNA Princípios
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Reação com ddNTP
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Produtos da reação
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Leitura da seqüência
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Genoma de S. cerevisae Drosophila melanogaster Caenorhabditis elegans
6200 genes nucleotídios Drosophila melanogaster Caenorhabditis elegans Terminado em 2000
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Fluxo da informação
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Transcrição
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RNA polimerase é a enzima responsável pela transcrição
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Sítios de reconhecimento
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Tradução necessita de adaptador
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Que funciona pela complementariedade
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Complementariedade
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Estrutura do DNA Complementariedade
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Ligação cooperativa quando rompida o efeito é marcante.
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Estrutura da água
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Pontes de hidrogênio
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Evaporação de água ? D no. de bolhas Temperatura oC
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Evaporação de água D no. de bolhas Temperatura oC curva de transição
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Estrutura do DNA Complementariedade
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Desnaturação de DNA % desnaturação T’m Temperatura oC
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Conteúdo de CG
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Desnaturação de DNA % desnaturação Temperatura oC T’m
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Desnaturação em função do conteúdo de GC
%CG T’m
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Hibridação Calor ou pH = desnaturação
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Reassociação Temperatura e força iônica
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Reassociação depende da concentração das seqüências
Cot
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A velocidade de reassociação depende da complexidade do DNA
Cot
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Três classes de seqüências de DNA
Cot % reassociação
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