UPC II – Microbiologia Aula prática /2015 Maria José Correia

Apresentação em tema: "UPC II – Microbiologia Aula prática /2015 Maria José Correia"— Transcrição da apresentação:

1 UPC II – Microbiologia Aula prática 4 2014/2015 Maria José Correia
21/10/2014

2 UPC II - Microbiologia 2014/2015
Sumário P4: Identificação preliminar dos microrganismos isolados na aula anterior: Observação das placas obtidas na aula anterior Coloração de Gram de uma das colonias isoladas. Repicagem da colónia escolhida correspondente a um Streptococcus ou Staphylococcus. 5/01/2014 UPC II - Microbiologia 2014/2015

3 Observação das placas obtidas na aula anterior
Houve crescimento? Houve contaminação? Há colónias isoladas? Registe o seu aspeto e tamanho relativo, Proceda à coloração de uma delas. 7/10/2013 UPC II - Microbiologia 2013/2014

4 UPC II - Microbiologia 2013/2014
Técnicas de coloração Permitem revelar a forma, a dimensão e os componentes das células bacterianas, bem como, os aspetos bioquímicos da sua estrutura. Permitem observar células bacterianas em microscopia de campo claro. Como o índice de refração do protoplasma bacteriano difere muito pouco do meio circundante, é difícil o exame direto de preparações não coradas, a não ser que se utilizem técnicas especiais de iluminação. 7/10/2013 UPC II - Microbiologia 2013/2014

5 UPC II - Microbiologia 2013/2014
Técnicas de coloração Preparação do esfregaço Fixação do esfregaço Coloração Observação ao microscópio 7/10/2013 UPC II - Microbiologia 2013/2014

6 UPC II - Microbiologia 2013/2014
Preparação e fixação do esfregaço Preparado sobre uma gota de água abrangendo uma superfície de 1 cm2 As lâminas usadas devem ser limpas Fixação pelo calor em movimentos circulares. Evitar aquecer demasiado a preparação para não destruir as células 7/10/2013 UPC II - Microbiologia 2013/2014

7 UPC II - Microbiologia 2013/2014
Coloração de Gram Coloração diferencial Distingue bactérias Gram + de bactérias Gram- Indispensável na identificação bacteriana Gram + Gram - 7/10/2013 UPC II - Microbiologia 2013/2014

8 UPC II - Microbiologia 2013/2014
Bactérias Gram+ e Gram- Composição diferente da parede celular Gram+: Parede homogénea e espessa, formada essencialmente por peptidoglucano, baixa percentagem de lipoproteínas. Gram-: Parede fina, camada de peptidoglucano fina, camada externa complexa, formada por lipoproteínas e polissacarídeos 7/10/2013 UPC II - Microbiologia 2013/2014

9 UPC II - Microbiologia 2013/2014
Coloração de Gram dH2O dH2O Violeta de cristal 1 minuto Lugol (iodo) 1 minuto Álcool 30-60 segundos Safranina 30-60 segundos 7/10/2013 UPC II - Microbiologia 2013/2014

10 UPC II - Microbiologia 2013/2014
7/10/2013 UPC II - Microbiologia 2013/2014