Prof. Rodrigo Alves do Carmo

Apresentação em tema: "Prof. Rodrigo Alves do Carmo"— Transcrição da apresentação:

1 Prof. Rodrigo Alves do Carmo
Espectrofotometria Prof. Rodrigo Alves do Carmo

2 A espectrofotometria baseia-se na absorção da radiação nos comprimentos de onda entre o ultravioleta e o infravermelho. A chamada radiação luminosa corresponde a uma gama de comprimentos de onda que vai desde o ultravioleta ao infravermelho no espectro da radiação eletromagnética.

3 Espectro da luz visível
UV Infra- vermelho Redução do Conteúdo Energético

4 O espectro do visível está contido essencialmente na zona entre 400 e 800 nm.

5 As substâncias absorvem fotons.
Esta absorção é feita de várias maneiras e se verifica somente em certos l.

6 Objeto líquido translúcido
Um objeto vermelho, por exemplo, aparenta ter esta coloração por absorver fotons de alta energia (menor l), refletindo ou deixando passar fotons de menor energia (maior l), Objeto sólido opaco (reflete a luz) Objeto líquido translúcido (deixa passar a luz)

7 Os fotons de l entre 400 nm e 700 nm sensibilizam as células da retina....

8 Um espectrofotômetro é um aparelho que faz passar um feixe de luz monocromática através de uma solução e mede a quantidade de luz que foi absorvida por essa solução. Usando um prisma o aparelho separa a luz em feixes com diferentes comprimentos de onda.

9 Pode-se assim fazer passar através da amostra um feixe de luz monocromática (de um único comprimento de onda). O espectrofotômetro permite-nos saber que quantidade de luz é absorvida a cada comprimento de onda.

10 Transmitância é a percentagem de luz emitida, enquanto que absorbância é a quantidade de luz absorvida

11 Esquema de um Espectrofotômetro
Porta-tubos Medidor Botão 100 (100% T) Lâmpada Interruptor Botão zero (0% T) Seletor de filtros

12 Princípios de absorção da luz
1. A absorção da luz é tanto maior quanto mais concentrada for a solução por ela atravessada.

13 2. A absorção da luz é tanto maior quanto maior for a distância percorrida pelo feixe luminoso através das amostras.

14 Lei de Lambert-Beer A absorvância da luz a cada comprimento de onda é diretamente proporcional à concentração da solução. Esta linearidade deixa de ocorrer a concentrações muito elevadas da substância. Nesses casos deve-se diluir previamente a amostra.

15 Método + = Substância a ser medida Reativo de cor Composto corado
A intensidade de cor é proporcional à concentração da substância que se quer medir Compara-se a cor dos dois tubos através da medida quantitativa da absorção de luz pelas soluções Solução com concentração desconhecida ????? solução com concentração conhecida

16 Preparação do Tubo Branco
O tubo “branco”contém todos os reativos menos a substância a ser dosada (concentração zero). Ele é fundamental para o ajuste do fotocolorímetro em A = zero e T = 100%, ou seja, ele elimina a interferência indesejável de outros componentes da solução. Este ajuste deve ser feito antes de qualquer medida. Botão 100 (100% T) Botão zero (0% T)

17 Construção da Curva de Calibração
Utiliza-se a curva padrão para evitar o inconveniente do erro de aferição 2. Medem-se as respectivas absorbâncias. 3. 1. Prepara-se uma série de tubos com concentrações crescentes da substância que se quer medir na amostra x Os dados são colocados em um gráfico. Abs. Conc.