UBAIII Biologia Molecular e Biologia Molecular 1º Ano 2014/2015.

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1 UBAIII Biologia Molecular e Biologia Molecular 1º Ano 2014/2015

2 Sumário: Capítulo V. Síntese e processamento do RNA mensageiro.  Implicações evolutivas dos intrões e splicing  Capítulo VI. RNAs não codificantes e de interferência  Micro RNAs e a descoberta de novas formas de regulação:  iRNA, miRNA, piwiRNA 29/out/2015MJC-T06

3 Processamento do mRNA 29/out/2015MJC-T06

4 Intrões do grupo II – Self-splicing 29/out/2015MJC-T06

5 Splicing do grupo II 29/out/2015MJC-T06

6 Spliceossoma – Splicing mediado por snRPs Animação 29/out/2015MJC-T06

7 Splicing 29/out/2015MJC-T06

8 Splicing 29/out/2015MJC-T06

9 Splicing 29/out/2015MJC-T06

10 Splicing 29/out/2015MJC-T06

11 Splicing 29/out/2015MJC-T06

12 Splicing 29/out/2015MJC-T06

13 Spliceossoma 29/out/2015MJC-T06

14 Splicing 29/out/2015MJC-T06

15 Splicing 29/out/2015MJC-T06

16 Estrutura de uma snRNP 29/out/2015MJC-T06

17 Síntese e Processamento de mRNA 29/out/2015MJC-T06

18 Processing the ovomucoid pre-mRNA as determined by northern blot Splicing de RNA O RNA é uma molécula que pode assumer as funções estruturais e de catálise. As funções de catálise são assumidas pelas riboenzimas. Estas reações pelas quais se cortam e colam mRNAs pode o denominado “ Exon shuffling” dá origem a novidade genética 29/out/2015MJC-T06

19 Cor das petúnias e siRNA  Tentativa de aumentar pigmento em petúnias  Inserção de cópias do gene para o pigmento  Resultado inesperado de não produção de NENHUM pigmento.  PTGS (Post-transcriptional gene silencing). 29/out/2015MJC-T06

20 siRNA e silenciamento de genes  Greeen Fluorescence Protein.  Injecção de (+) mRNA  Injecção de (-) mRNA  Injecção de ds mRNA  Denominado de RNA de interferência RNAi 29/out/2015MJC-T06

21  RNAi is part of a broader phenomenon of RNA silencing, in which small RNAs inhibit gene expression in various ways.  The steps involved in RNAi include:  dsRNA is cleaved into small interfering RNAs (siRNAs) by an enzyme called Dicer.  The small dsRNAs are loaded into a complex named RISC that bind siRNA to a target RNA. Small Regulatory RNAs & RNA Silencing Pathways Formation & mechanism of action of siRNAs- miRNAs The formation and mechanism of action of siRNAs and miRNAs 29/out/2015MJC-T06

22 Actuação do iRNA nas células 13/nov/2014MJC-T07 Nativo e regulador de expressão Usado laboratorialmente ou inserido por vírus ou transposão

23 Destino do RNAi na célula 13/nov/2014MJC-T07

24 Aplicações terapêuticas de siRNA 13/nov/2014MJC-T07

25 Micro RNA e regulação da expressão génica 13/nov/2014MJC-T07

26 micro RNA 13/nov/2014MJC-T07

27 piRNA (piwiRNA)  Maiores que os mi/siRNA (24-32 pbs)  Codificados por zonas muito extensas do genoma.  Não envolve a formação de dsRNA ou a clivagem por DICER.  Mecanismo de actuação ainda muito desconhecido.  Associado a células de linhas germinativas. 13/nov/2014MJC-T07

28 Bibliografia 13/nov/2014MJC-T07  Capítulo 5 secção 5.4 e 5.5  Capítulo 30 Lippincott’s