QBQ 0102 – Educação Física Carlos Hotta Transcrição 04/06/13

Previously... DNA RNA proteína As fitas de DNA são antiparalelas replicação transcrição tradução DNA RNA proteína As fitas de DNA são antiparalelas A síntese de DNA é feita na direção 5´-> 3´ A DNA polimerase sintetiza uma nova fita a partir de um molde O 3´-OH do DNA se liga ao 5´-PO4 Uma das fitas é duplicada continuamente e a outra é feita de forma descontínua (fragmentos de Okazaki)

Como a informação contida no DNA é usada para gerar uma proteína?

Existem diversos tipos de RNA RNAm codificam novas proteínas RNAr fazem parte do ribossomo RNAt transferem aminoácidos durante a síntese de proteínas RNAnc têm funções regulatórias diversas (antisense, microRNA, etc.)

O RNAm contém as informações necessárias para gerar uma nova proteína Fita codificante Fita molde para a síntese de RNA A fita codificadora contém a sequência similar à sequência do RNAm (com T no lugar de U) A fita molde vai servir de referência para a síntese do RNAm

O que é um gene? “Gene é uma região do DNA que corresponde a uma unidade hereditária associada a regiões reguladoras, regiões transcritas e/ou outras regiões funcionais.” ATENÇÃO!!!! Podem existir genes em ambas direções no DNA!

A RNA polimerase gera uma fita de RNA a partir do DNA Funciona como a DNA polimerase mas: Faz RNA! -> usa ribonucleotídeos Não precisa de primers! Possui uma maior frequência de erros

O ciclo de trancrição tem três fases Iniciação (1) término (3) alongamento (2) A iniciação da transcrição depende de promotores e outros elementos de regulação

A RNA polimerase cria uma bolha de transcrição no DNA Em procariotos, o RNAm está pronto para ser traduzido

Término da transcrição: (2) grampo de terminação

Término da transcrição: (2) fator Rho Rho (46kDa, ativa como hexâmero) move-se ao longo do RNA acompanhando a RNA polimerase Com a pausa da RNA polimerase na sequência de terminação, Rho alcança a enzima Rho desenrola o híbrido RNA-DNA Sequência de Terminação dependente de Rho: rica em C

O RNAm possui regiões não-codificadoras Promotor Região codificadora Início Fim

Em procariotos, o RNAm é traduzido imediatamente Bolha- ~17 pares de bases

Em eucariotes, o RNAm é processado e transportado para o citoplasma para ser traduzido

Em eucariotos, o RNAm precisa ser processado antes de ser traduzido Ativadores upstream Região codificadora Promotor 5´cap Transcrito inicial (no núcleo) Cauda 3´poly-A AAAAAAA RNAm final (citoplasma) AAAAAAA

Modificação pós-transcricionais: 5´-cap O 5´cap é adicionado ao RNA no início da transcrição por um complexo enzimático Regula o transporte de RNA para fora do núcleo Evita degradação

Modificação pós-transcricionais: 3´poli(A) Poliadenilação: Adição da cauda poli (A) na extremidade 3´do RNA primário: ~200 Adeninas Proteínas se ligam à cauda poli(A) e protegem o RNA A poli(A) ajuda no controle do transporte do RNA para o citoplasma

Modificação pós-transcricionais: quebra de RNA e modificações de bases

Modificação pós-transcricionais: splicing

Modificação pós-transcricionais: splicing

Modificação pós-transcricionais: splicing 1 4 2 5 3 5

Um gene pode gerar diverssos RNAm maduros