TRANSCRIÇÃO E TRADUÇÃO DE PROTEÍNAS EM PROCARIOTOS Biologia Molecular 3/25/2017 TRANSCRIÇÃO E TRADUÇÃO DE PROTEÍNAS EM PROCARIOTOS
Replicação Transcrição RNA Tradução Proteína REVISANDO DNA 3/25/2017 REVISANDO DNA RNA Proteína Replicação Transcrição Tradução Trasncrição Reversa
Transcrição 3/25/2017 É o processo pelo qual uma molécula de RNA é sintetizada a partir da informação contida na sequência de nucleotídeos de uma molécula de DNA de fita dupla
3/25/2017 DOGMA
PROCARIOTO X EUCARIOTO 3/25/2017 PROCARIOTO X EUCARIOTO
RNA 3/25/2017 Fita Simples; A,U,C,G; Ribose
3/25/2017 FASES DA TRANSCRIÇÃO INÍCIO – quando ocorre reconhecimento de seqüência específica no DNA; ALONGAMENTO – quando os ribonucleotídeos são sucessivamente incorporados; TERMINAÇÃO – quando seqüências no DNA são reconhecidas e a síntese é interrompida.
RNA POLIMERASE ’ Fator (sigma) Core Haloenzima 3/25/2017 RNA POLIMERASE Fator (sigma) ’ Core Haloenzima
RNA POLIMERASE 3/25/2017
3/25/2017 RNA POLIMERASE Fator sigma
3/25/2017 FATOR SIGMA
Estrutura de um Gene Promotor Região Codificadora Terminador DNA 3/25/2017 Estrutura de um Gene Promotor Região Codificadora Terminador DNA RNA PROTEÍNA Ribossomo
CARACTERISTICAS DE UM PROMOTOR DE E. coli 3/25/2017 -35 -10 +1 TTGACA ...TATAATATCGATTTAGATCCCATGAT PROMOTOR Região – 10: T A T A A T Região – 35: T T G A C A As duas regiões são separadas por 17±1 nucleotídeos O primeiro nucleotídeo (+1) é geralmente uma purina (A ou G)
PROMOTORES DE GENES BACTERIANOS 3/25/2017 PROMOTORES DE GENES BACTERIANOS
3/25/2017 -10 9 nucleotídeos
3/25/2017 TRANSCRIÇÃO
FUNÇÕES DA RNA POLIMERASE 3/25/2017 FUNÇÕES DA RNA POLIMERASE Reconhecer o promotor; Desnaturar o DNA expondo a seqüência a ser copiada; Manter as fitas de DNA separadas na região da síntese; Manter o híbrido DNA:RNA estável; Renaturar o DNA na região imediatamente posterior à síntese; Terminar a síntese do RNA.
3/25/2017 TRANSCRIÇÃO
3/25/2017 TRANSCRIÇÃO
3/25/2017 TRANSCRIÇÃO
TÉRMINO DA TRANSCRIÇÃO 3/25/2017 Independente da proteína rho () (90% dos casos) Dependente da proteína rho () 5’ CCCAGCCCGCCTAAGCGGGCTTTTTTTTGAC 3’ 3’ GGGTCGGGCGGATTCGCCCGAAAAAAACTG 5’ Pareamento A-U
3/25/2017
ENZIMAS DE RESTRIÇÃO 3/25/2017 TRANSCRIÇÃO - RNAm
3/25/2017 DNA fita codificadora DNA fita molde RNA transcrito
Código Genético e Sintese de Proteínas 3/25/2017 Código Genético e Sintese de Proteínas
3/25/2017 CÓDIGO GENÉTICO É a relação entre a seqüência de bases no DNA e a seqüência de aminoácidos na proteína
CÓDIGO GENÉTICO UUU Phe UCU Ser UAU Tyr UGU Cys 3/25/2017 CÓDIGO GENÉTICO UUU Phe UCU Ser UAU Tyr UGU Cys UUC Phe UCC Ser UAC Tyr UGC Cys UUA Leu UCA Ser UAA stop UGA stop UUG Leu UCG Ser UAG stop UGG Trp CUU Leu CCU Pro CAU His CGU Arg CUC Leu CCC Pro CAC His CGC Arg CUA Leu CCA Pro CAA Gln CGA Arg CUG Leu CCG Pro CAG Gln CGG Arg AUU Ile ACU Thr AAU Asn AGU Ser AUC Ile ACC Thr AAC Asn AGC Ser AUA Ile ACA Thr AAA Lys AGA Arg AUG Met ACG Thr AAG Lys AGG Arg GUU Val GCU Ala GAU Asp GGU Gly GUC Val GCC Ala GAC Asp GGC Gly GUA Val GCA Ala GAA Glu GGA Gly GUG Val GCG Ala GAG Glu GGG Gly
CÓDIGO GENÉTICO Características Pareamento códon:anticódon; 3/25/2017 CÓDIGO GENÉTICO Características Pareamento códon:anticódon; Degeneração – um mesmo aminoácido pode ser codificado por vários códons diferentes; Não ambigüidade – cada códon corresponde a somente um aminoácido; Universalidade – o código genético é o mesmo nos mais diversos organismos (exceção: protozoários ciliados e mitocondiras); Utilização preferencial de códons (codon usage).
CÓDIGO GENÉTICO 3/25/2017
3/25/2017 TRADUÇÃO Consiste na transformação da mensagem contida no RNAm, via RNAt, na sequência de aminoácidos que constituem a proteína. Intervenientes: RNAm RNAt Ribossomas (RNAr) Aminoácidos Sistemas enzimáticos
Procariotos Eucariotos ESTRUTURA DOS RIBOSSOMOS 3/25/2017 ESTRUTURA DOS RIBOSSOMOS Procariotos Subunidade 30S (rRNA 16S, 21 proteínas) Subunidade 50S (rRNA 23S e 5S, 31 proteínas) Total 70S Eucariotos Subunidade 40S (rRNA 18S) Subunidade 60S (rRNA 28S, 5,8S e 5S) Total 80S
3/25/2017 ESTRUTURA DOS RIBOSSOMOS Ribossomos
3/25/2017
tRNA -Estrutura secundária com grampos e alças formando um trevo 3/25/2017 tRNA -Estrutura secundária com grampos e alças formando um trevo -Alto número de bases modificadas depois da sua transcrição
tRNA 3/25/2017
tRNA 3/25/2017
3/25/2017 tRNA
3/25/2017 Existem 61 códons e 40 tRNAs. Como é resolvida a questão dos 21 códons restantes?
3/25/2017
3/25/2017 Trasncrição Tradução
Etapas da tradução A síntese proteica ocorre em 3 etapas sucessivas: 3/25/2017 A síntese proteica ocorre em 3 etapas sucessivas: 1. Iniciação 2. Alongamento 3. Finalização
Sítio de ligação do ribossomo e códon de iniciação 3/25/2017 RIBOSSOMAS Sítio de ligação do ribossomo e códon de iniciação 5’ ...AGGAGGxxxxxxxAUG...3’ Códon de iniciação (raramente GUG ou UUG) RBS ou Seqüência Shine-Dalgarno
3/25/2017 Início da tradução
Aminoacil-tRNAsintetase 3/25/2017 Aminoacil-tRNAsintetase Aminoacil- tRNA Met-tRNA
INICIAÇÃO
Tradução ALONGAMENTO
Tradução ALONGAMENTO
TERMINAÇÃO
Antibióticos e Síntese Proteica 3/25/2017 “Substância produzida por um organismo ou obtida sinteticamente que, em soluções diluídas, destrói as bactérias e outros microrganismos ou inibe o seu desenvolvimento.” ANTIBIÓTICOS
Antibióticos e Síntese Proteica 3/25/2017