Histotécnica - fases 1. Coleta ou Colheita do material 2. Fixação 3. Clivagem 4. Desidratação 5. Diafanização 6. Impregnação 7. Inclusão 8. Microtomia 9. Coloração de rotina 10. Montagem

6) Impregnação pela parafina (2h) - 56 a 58o C 4) Desidratação (6h) Remoção da água do tecido por substâncias miscíveis com a água 5) Diafanização (3h) (clarificação) Remoção do álcool por substâncias miscíveis com o álcool e com a parafina 6) Impregnação pela parafina (2h) - 56 a 58o C

4. Desidratação Erros nesta fase ? Cuidados nesta fase: Desidratação gradual em Álcool etílico... evitar artefatos Substituição periódica do álcool Tempo de permanência do álcool - Obs. Nesta fase ocorre retração tecidual Erros nesta fase ?

5. Diafanização Erros nesta fase ? Cuidados nesta fase: - Substituição periódica do Xilol (xileno) Tempo de permanência no Xilol - Obs. Nesta fase os fragmentos ficam translúcidos (diáfanos) Erros nesta fase ?

6. Impregnação pela parafina Cuidados nesta fase: Substituição periódica da Parafina Tempo de permanência na Parafina - Temperatura adequada Erros nesta fase ?

7) Inclusão em parafina Parafina fundida .... 56o C .... solidificar à temperatura ambiente - molde apropriado - altura = 1,5 cm

7. Inclusão em parafina - Erros nesta fase ? Cuidados nesta fase ? - Obedecer critérios de consistência e tamanho dos fragmentos, de acordo com a lamínula - Erros nesta fase ?

Histotécnica - fases 1. Coleta ou Colheita do material 2. Fixação 3. Clivagem 4. Desidratação 5. Diafanização 6. Impregnação 7. Inclusão 8. Microtomia 9. Coloração de rotina 10. Montagem

“pescar “ o corte com lâmina de vidro Microtomia Cortes 5µm 50oC “pescar “ o corte com lâmina de vidro Estufa 40 min. Criostato criomicrotomia (-30oC)

8. Microtomia Erros nesta fase ? Cuidados nesta fase ? Navalha afiada Espessura dos cortes Técnico com experiência Temperatura do banho-maria Temperatura da estufa Erros nesta fase ?

9) Coloração de rotina: H. E. - corantes: Hematoxilina e Eosina - Hematoxilina ..... corante básico ..... cora estruturas (natural / vegetal) ácidas Por ex. núcleo - Eosina ..... corante ácido ..... cora estruturas (artificial) básicas Por ex. citoplasma

9. Coloração de rotina Erros nesta fase ? Cuidados nesta fase ? Preparo adequado dos corantes Respeitar os tempos de cada sub-fase da coloração Substituição periódica das substâncias utilizadas Erros nesta fase ?

10. Montagem Erros nesta fase ? Cuidados nesta fase ? Cobrir adequadamente os cortes histológicos com as lamínulas Utilizar o Bálsamo na diluição correta – evitar bolhas Erros nesta fase ?

10. Montagem Erros nesta fase ? Cuidados nesta fase ? Cobrir adequadamente os cortes histológicos com as lamínulas Utilizar o Bálsamo na diluição correta – evitar bolhas Erros nesta fase ?