RNA : Transcrição e Processamento Paula de Vasconcellos Golin

Transcrição “a arte de transformar” RNA Transcrição “a arte de transformar”

Conceitos Gerais ribossomos rRNA estrutural DNA mRNA proteínas tRNA acoplador transportador

Transcrição “a arte de transformar” Decisão de iniciar - controle da situação Temporal / Momento - estado fisiológico Específico / Seletivo - privilégio de poucos

Transcrição “a arte de transformar” Complementaridade e antiparalelismo ( T = U) Síntese 5'  3' RNA Polimerase (RNAP)

Transcrição “a arte de transformar” RNAPs: reconhecem e ligam-se desnaturam DNA mantém estável a dupla fita aberta mantém estável DNA:RNA terminam síntese restauram DNA

Transcrição “a arte de transformar” RNAP I rRNAs nucléolo genes um ao lado do outro RNAP II mRNA RNAP III tRNA e outros

Transcrição “a arte de transformar” RNAPs : nunca sozinhas proteínas acessórias = fatores de transcrição sítio de início da transcrição seqüências regulatórias (promotor e enhancer)

Transcrição “a arte de transformar” Iniciação – ligação do complexo RNAP II ao DNA Alongamento – adição de nt ao mRNA crescente Terminação – liberação de mRNA e RNAP II

Complexo de iniciação Promotor Cascata de fatores + RNAP II promotor região transcrita Promotor Cascata de fatores + RNAP II Complexo de iniciação

Transcrição “a arte de transformar” Enhancers em ação

Transcrição “a arte de transformar” Alongamento CIT desfeito Síntese do mRNA propriamente dita Duplex híbrido DNA:RNA Correção de erros

Transcrição “a arte de transformar” 5´ 3´ “bolha de transcrição”

Transcrição “a arte de transformar”

Transcrição “a arte de transformar” Terminação regiões consenso no DNA molde – ricas em T clivagem (corte)

Transcrição “a arte de transformar” Resumindo... CAT Box unidade de transcrição

Transcrição “a arte de transformar” rRNA - RNAP I 3 complexos protéicos acessórios promotores: -2 domínios semelhantes RNAPII tRNA - RNAP III - 1 domínio semelhante RNAPII - 2 regiões controladoras internas (ICRs)

RNA Processamento “a arte de proteger e tornar útil”

Conceitos Gerais DNA mRNA Proteína transcrição tradução mRNA pré-mRNA processamento

Processamento “a arte de proteger e tornar útil” Capping - cap 5' Polyadenylation - cauda poly A Splicing – excisão de introns

Processamento “a arte de proteger e tornar útil” Capping – cap 5' O que é: adição de grupo metil Local: primeiro nucleotídeo 5' Funções: proteção facilitar transporte e splicing Quando: assim que possível

Processamento “a arte de proteger e tornar útil” O Cap

Processamento “a arte de proteger e tornar útil” Capping

Processamento “a arte de proteger e tornar útil” Polyadenylation - cauda poly A O que é: adição de aprox 200 As Local: na extremidade 3' Funções: facilitar transporte e tradução estabilizar Quando: após terminação

Processamento “a arte de proteger e tornar útil” Polyadenylation

Processamento “a arte de proteger e tornar útil” Estrutura protegida

Processamento “a arte de proteger e tornar útil” - Exons porção codificadora presente no mRNA - Introns porção não codificadora não presente no mRNA

Processamento “a arte de proteger e tornar útil” Splicing O que é: retirada de introns, fusão de exons Local: regra GU-AG, sinalizado por branch point A Função: tornar útil Quando: logo após cap e poli A

Processamento “a arte de proteger e tornar útil” DNA molde Pré-mRNA

Processamento “a arte de proteger e tornar útil” Splicing mediado por spliceossomo: spliceossomo = vários snRNPs (U1, U2...) + ptns - ajuda a clivar no sítio de splicing - remove intron - impede afastamento dos exons - une os exons

Processamento “a arte de proteger e tornar útil” Splicing por spliceossomo

Processamento “a arte de proteger e tornar útil” Auto-splicing sem atuação de spliceossomos

Processamento “a arte de proteger e tornar útil” Auto-splicing

Processamento “a arte de proteger e tornar útil” Bases em comum