Regulação da Glicolise Pontos onde as enzimas catalizam reações irreversíveis ∆G Reações Irreversíveis Hexokinase Glicose + ATP Glicose 6-Fosfato + ADP + H+ * Frutose, 6-Fosfato + ATP Fosfofrutokinase Frutose 1, 6-bifosfato + ADP + H+ Piruvato kinase Piruvato + ATP Fosfoenolpiruvato+ ADP + H+ * Aumento de ATP inibe e diminui a afinidade pelo substrato Aumento de AMP reverte essa inibição Aumento de citrato - inibe Piruvato kinase inibida pelo aumento de ATP Hexokinase inibida por glicose 6 fosfato (exceto no fígado)
Regulação da via glicolítica Hexoquinase X Glicoquinase Phosphofructoquinase Piruvato Kinase
O Respirômetro de Warburg Década de 20 Coloca o substrato Tecido Meio de cultura Fluido com cor Papel de filtro com KOH KOH + CO2 KHCO3 Detecta CO2 Produzido Detecta o O2 Consumido CO2 KHCO3 Pressão no frasco Leitura do líquido Glicose + 6O2 6CO2 + 6 H2O + Energia
Qual o destino do Piruvato na presença de O2 ? A: Piruvato (C3) + 3O2 3CO2 + 3 H2O Músculo de peito de pombo 40 3 2 1 A B Szent – Györg (1930) testa os ácidos C4 Malato Oxalacetato Succinato Fumarato Moles CO2 produzidos B 0 5 10 15 20 Tempo (min) Não eram consumidos na reação Efeito catalítico na respiração dos tecidos
Enzima da respiração citocromo Onde o CO2 esta sendo produzido? Não era na fermentação ... Enzima da respiração citocromo
Não eram consumidos na reação Sir Hans-Krebs (1935) Testa ácidos dicarboxílicos de 5 carbonos - Alfa cetoglutarato 3 2 1 Moles CO2 produzidos Piruvato 0 6 12 18 24 30 Não eram consumidos na reação Efeito catalítico na respiração dos tecidos Sir Hans-Krebs (1937) Testa ácidos dicarboxílicos de 6 carbonos 3 2 1 Citrato Aconitato Isocitrato Moles CO2 produzidos Piruvato 0 6 12 18 24 30 Não eram consumidos na reação Efeito catalítico na respiração dos tecidos
Raciocínio de Krebs 3C piruvato 7C ? 6C citrato 5C α-cetoglutarato 4C malato 4C succinato 4C fumarato 4C oxalacetato CO2 CO2 3C + 4C = 7C Piruvato + ac. dicarboxilicos Não funciona
Raciocínio de Krebs 3C piruvato 2C acetil co-A 6C citrato 5C α-cetoglutarato 4C malato 4C succinato 4C fumarato 4C oxalacetato 3C piruvato CO2 2C acetil co-A
Descarboxilação oxidativa Micrografia eletronica do complexo da piruvato desidrogenase, isoloda de E. coli
Condensação Citrato Sintetase Desidratação Hidratação amarelo - oxalacetato vermelho - carboxymethyl-CoA Desidratação Hidratação
Descarboxilação oxidativa Fosforilação
Desidrogenação Hidratação Desidrogenação
Saldo Energético do Ciclo de Krebs
NADH : ubiquinona oxidoredutase Succinato desidrogenase Complexo I NADH : ubiquinona oxidoredutase Complexo II Succinato desidrogenase
Ubiquinona:citocromo c oxidoredutase Complexo III Ubiquinona:citocromo c oxidoredutase
Complexo IV Citocromo oxidase
Reações de oxi-redução
NAD
FAD