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Princípios Básicos da Oximetria de Alta Resolução Paulo Silveira Roberta Martins Orientadora: Alexandra Latini UNIVERSIDADE FEDERAL DE SANTA CATARINA DEPARTAMENTO.

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1 Princípios Básicos da Oximetria de Alta Resolução Paulo Silveira Roberta Martins Orientadora: Alexandra Latini UNIVERSIDADE FEDERAL DE SANTA CATARINA DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA Métodos Analíticos em Bioquímica Prof. Alcir Dafré

2 Respiração Mitocondrial

3 Substratos para Respiração Mitocondrial

4 Transporte de Substratos

5

6 Inibidores para Respiração Mitocondrial

7 Oxímetro Oxygraph-2k (Oroborus Instruments)

8 Aula Prática Amostra: Concentrado de Mitocôndrias de Fígado de Ratos Técnica: Reagentes 10µl de piruvato + 10 µl de malato 2mM 25 µl ADP 0,25M 4 µl Rotenona 1mM 20 µl Succinato 25 µl ADP 0,25M 5 µl Cianeto

9 Reagentes Consumo de Oxigênio (Marks Statistics) 10µl de piruvato + 10 µl de malato 2mM 25 µl ADP 0,25M 4 µl Rotenona 1mM 20 µl Succinato 25 µl ADP 0,25M 5 µl Citocromo C Resultados Aula Prática

10 Estágio III: Quantidade de Oxigênio consumido na presença de substratos e ADP. Estágio IV: Quantidade de Oxigênio consumido após a exaustão dos substratos e ADP. Controle Respiratório (RCR): RCR ADP/Pir+Mal = RCR ADP/Succinato= Resultados Aula Prática


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