Histotécnica - fases 1. Coleta ou Colheita do material 2. Fixação 3. Clivagem 4. Desidratação 5. Diafanização 6. Impregnação 7. Inclusão 8. Microtomia 9. Coloração de rotina 10. Montagem

1. Coleta / Colheita do material Quem realiza esta fase? Tipos: in vivo (biópsia) x post-mortem Biópsia = é a remoção de tecido de pacientes vivos para exame diagnóstico (amostra obtida por biópsia) Acondicionar o material, identificar e colocar a substância fixadora de modo adequado são fundamentais neste momento!

2) Fixação Conceito: É o tratamento dado a um tecido a fim de se evitar a deteriorização do mesmo por suas próprias enzimas (autólise) ou por microrganismos. Preserva a morfologia e a composição química do tecido através da insolubilidade das proteínas. Sangue O2 X Mitocôndrias Bomba Na/K Lisossomos

Fixadores químicos: Formol a 10 % Bicromato de potássio -Simples Bicloreto de mercúrio Etanol Metanol Líquido de Bouin -Compostos Líquido de Zenker Líquido de Helly Fixadores físicos: -Frio (congelamento/câmaras frigoríficas) -Calor (fixação de esfregaços)

Identificação da substância preparada !

Formol a 10% Fórmula: 100ml de formol 40% (solução estoque) 900 ml de água corrente Ou 1 litro de formol 40% (solução estoque) 9 litros de água corrente

Bom fixador - agir rapidamente, matando a célula - não interferir na coloração, aumentando a afinidade do tecido pelo corante - preservar morfologia e composição química teciduais - evitar a autólise e o crescimento de bactérias e fungos - não produzir artefatos ou estruturas artificiais - ter alto poder de penetração - endurecer sem deformar - ser de baixo custo / "atóxico" ter ação conservante

Requisitos para uma boa fixação - intervalo mínimo entre a colheita e a fixação - contato superfícies/ substância fixadora - fixador = 20x o volume da peça - espessura da peça = 1-6 mm boa colheita Cadáver 12h 48h 1 semana Fresco Resfriado Congelado

Descalcificação - Quando realizar esta fase adicional ?

Erros -Coleta: Fragmento não representativo da lesão Diversos fragmentos sem identificação do local Fragmento grande -Fixação: Pouco formol Pote pequeno Pote inadequado Peça muito grande

3) Clivagem Descrição macroscópica de PC 1-Registro 2-Descrição a- Local : lesão ou tumor b- Quantidade: peça única/ retalho/ fragmentos c- Formato: irregular/ arredondado/ ovalado d- Tamanho: ...x...x... cm / .... cm diâmetro

f- Consistência aos cortes e- Superfície externa Tonalidade Lisa / rugosa Recoberta por pele (parcial, total, tricotomizada) Úlcera/ íntegra Envolta por tecido (do tipo adiposo, conjuntivo) Nodular/papilomatosa/deprimida/ulcerada/crostosa Coberta de sujidades/sangue/muco/pus Presença de ectoparasitas f- Consistência aos cortes Friável/ gelatinosa/ bem macia/ macia/ esponjosa Elástica/ firme-elástica/ firme/ rangente/ pétrea Ora macia, ora firme/ deixando fluir líquido

Planos de corte g- Superfície de cortes Tonalidade Irregular/ lisa (compacta)/ fasciculada/ marmóreo/ Aspecto fibroso/ untuosa/ lobada ou multilobada cística ou policística (...cm de diâmetro) Conteúdo dos cistos: consistência (líquido, gelatinoso, caseoso, purulento...) Tonalidade (brancacenta, pardacenta, rósea, enegrecida, ora.... ora...) Odor (pútrido, inodoro, amoniacal...) Material: Navalha, faca, bisturi Tamanho: 2 a 6 mm Finalidade Planos de corte

Outras possibilidades: E se o fragmento for pequeno ? dividir ao meio ou processar inteiro E se a peça for muito grande ? Fazer cortes para a penetração da substância fixadora ou descrever a peça e retirar fragmentos menores para exame, desde que sejam representativos da lesão