Basofilia e Acidofilia: coloração do Panótico Pós-Graduação em Genética Basofilia e Acidofilia: coloração do Panótico Disciplina: Preparações citológicas e análises citogenéticas Maria Isabel Afonso da Silva

Reações Citoquímicas Mediadas por Ligações Eletrostáticas Afinidade eletrostática: um corante ionizado em uma solução reage com um substrato de carga iônica oposta. Substrato catiônico Acidofilia Corante aniônico Substrato aniônico Basofilia Corante catiônico

Corantes Básicos (Catiônicos) Basofilia Corantes Básicos (Catiônicos) Substrato carregado negativamente (aniônico) reage eletrostaticamente com um corante carregado positivamente (catiônico). Corantes: Azul de metileno Azul de alcian Azul de toluidina

Basofilia

Grupamentos negativos Basofilia Fosfatos (ácidos nucléicos) Sulfatos (Glicosaminoglicanos sulfatados) Carboxilas (Proteínas e açúcares ácidos) Grupamentos negativos

Reação de Acidofilia - Corantes ácidos (Aniônicos) Os corantes reagem com os elementos que possuem cargas positivas na célula Ex: proteínas, que podem apresentar radicais básicos de seus aminoácidos ionizados (NH3+). Orceína Fast green Xilydine Ponceau Sírius Red

Reação de Acidofilia  Grupamentos se ionizam na dependência de pHs diferenciados  Obtidos a partir de solução tampão em que os corantes são diluídos

SUBSTRATO CORANTE EXEMPLOS BASOFILIA ACIDOFILIA - Þ aniônico + catiônico Azul de Toluidina Azul de metileno Azul de alcian Hematoxilina ACIDOFILIA Xylidine ponceau Sirius red Fast Green Eosina Orceína

aminoácidos básicos (lisina, arginina, histidina) Hematoxilina Eosina Eosina (-)  Substratos (+) Citoplasma (grupam/o NH2+) aminoácidos básicos (lisina, arginina, histidina) Rosa Hematoxilina (+)  Substratos (-) Núcleos (grupam/os fostato do DNA e RNA) ácidos nucleicos, aminoácidos ácidos (aspártico, glutâmico). Azul

(Mus muscullus) (ASSIS & AZEREDO-OLIVEIRA, 2002) Hematoxilina Eosin (Mus muscullus) (ASSIS & AZEREDO-OLIVEIRA, 2002) G

Glândulas acessórias de morcego Ep ML V L Normal Próstata Glândulas acessórias de morcego

Panótipo (Hematocor-BiológicaR) Reação de Acidofilia/Basofilia -Mediadas por Ligações Eletrostáticas Coloração de rotina para análise geral da morfologia das células sanguíneas Facilita a identificação e diferenciação dos leucócitos Basofilia: Como a hematoxilina - grupamentos fosfatos dos ácidos nucléicos (Núcleo) Acidofilia: Como a eosina Amino de resíduos protéicos (NH3)- (núcleo e Citoplasma)

PANÓTICO RÁPIDO LB 1)Finalidade: Conjunto para coloração rápida em hematologia. 2) Princípio: A extensão hematológica é submetida à ação de um fixador e duas soluções corantes, por meio de imersões, ao final da última, encontra-se pronto para leitura.

CORANTE RAPIDO PARA HEMATOLOGIA COM 1 FIXADOR-TRIARILMETANO E CORANTES / 2- XANTENO / 3-TIAZINA (de 500 ml) Panótico rápido 1: compõe-se por uma solução de triarilmetano a 0,1%. Panótico rápido 2: compõe-se por uma solução de xantenos a 0,1%. Panótico rápido 3: compõe-se por uma solução de tiazinas a 0,1%. O material deve ser mantido em temperatura ambiente, em local fresco, seco e protegido da incidência direta de luz solar

Phrynops geoffroanus ou “Cágado-de-Barbelas”

Amostras Sanguíneas Punção Cardíaca Seio venoso cervical Descartada a primeira gota – técnica de esfregaço – extensões sangüíneas - fixação.

Contagem de trombócitos Contagem diferencial dos leucócitos: Hemograma Contagem de trombócitos Contagem diferencial dos leucócitos: - monócitos - linfócitos - neutrófilos - azurófilos - heterófilos - eosinófilos - basófilos

Células Vermelhas de Quelônios Atuam na inflamação, promovem fagocitose; como célula hemostática

Células brancas de Quelônios Linfócitos Citoplasma basofílico. Resposta imune - infecção viral. 15% a 90% Monócito Combate a doenças infecciosas. 3% a 20% Azurófilo+Monócito 2% a 5% Neutrófilo Respondem à infecções bacterianas. 0,5% a 10%

Células brancas de Quelônios Eosinófilo+Heterófilo Encontrados em infecções parasitárias. 7% a 20% Heterófilo Combate a infecções bacterianas. 20% a 40% Basófilo Reações imunes. 10% a 25%

Constituem o maior nº de células do sangue Em média 4,5 milhões na mulher e 5,5 milhões no homem. Medem aproximadamente 7,5 um de diâmetro

Agranulócitos: Núcleo sem segmentação e apenas granulações azurofílicas, quase imperceptíveis: linfócitos e monócitos. Granulócitos: Núcleos lobulados de forma variável (polimórficos) grânulos citoplasmáticos proeminentes, cujas características tintoriais diferem conforme a classe à qual pertence o granulócito: neutrófilos, eosinófilos ou basófilos.

Neutrófilo 40-70% Medem 12-15um de diâmetro. O citoplasma é acidófilo, com muitos grânulos finos. O núcleo possui cromatina em grumos, com 2-5 lóbulos distintos Função fagocitária.

Linfócito 20-50% Medem de 6-12 um de diâmetro. Possuem citoplasma basófilo, pequeno, escasso. O núcleo apresenta-se esférico com cromatina bastante condensada. Linfócitos T: imunidade celular Linfócitos B: produção de anticorpos.

Monócito 2-10% diâmetro de 12-20 um. Apresenta um núcleo irregular, frequentemente lobulado, e citoplasma cinza-azulado opaco, com grânulos azurófilos finos. São células precursoras do sistema fagocítico mononuclear.

Eosinófilo 0-8% São ligeiramente maiores do que os neutrófilos: 12-17 um. O núcleo é geralmente bilobulado, mas pode ser trilobulado. Os grânulos são esféricos e maiores, preenchem o citoplasma e coram-se de avermelhado (eosina). São importantes nas doenças alérgicas e parasitárias

Basófilo 0-3% Apresentam o citoplasma com granulações pretas e grandes, irregulares, que têm afinidade por corantes básicos. O núcleo tem dois segmentos, geralmente encobertos pelas granulações. Estão envolvidos nas reações imediatas de hipersensibilidade (asma).

Plaquetas São pequenos fragmentos citoplasmáticos presentes no sangue circulante. Medem 2-4um de diâmetro. Atuam na coagulação sanguínea, na retração e dissolução de coágulos