CINÉTICA DE BIODEGRADAÇÃO: UTILIZAÇÃO DE MICROORGANISMOS SELECIONADOS E IMOBILIZADOS EM BIOMASSA PARA TRATAMENTO DE EFLUENTES. Jair Juarez João (PQ) e Magda Leonidas Batista (IC). Grande área: Ciências Exatas e da Terra; Área de conhecimento: Química Programa PIBIC; Curso: Engenharia Química; Campus Sul - Tubarão INTRODUÇÃO O desenvolvimento de novas metodologias utilizando recursos naturais para tratamento de efluentes, é extremamente relevante, tendo em vista os problemas ambientais inerentes dos recursos hídricos. O presente trabalho foi desenvolvido com objetivo de utilizar a biotecnologia associados aos recursos da biomassa (amido, celulose, bagaço da cana de açúcar, soro do leite, etc), com intuito de buscar uma alternativa natural e barata para tratamento de efluentes em reatores anaeróbios. O processo baseia-se no aumento da eficiência do processo natural,com adição de bactérias previamente selecionadas inoculadas e concentradas. OBJETIVOS Identificar e selecionar microrganismos para utilização em biomassa para tratamento de efluentes . METODOLOGIA Para desenvolvimento dos microorganismos foi utilizado a técnica de propagação de inoculo (Figura 1). Um volume inicial de cultura de microorganismos é alimentada em um meio de crescimento, onde os microorganismos irão se desenvolver mediante o consumo de nutrientes presentes nesse meio. A seguir, o meio formado é transferido para um outro recipiente contendo um volume maior de nutrientes. A cultura final de microorganismos foi quantificada em unidades formadoras de colônias e identificada por métodos de contagem. Figura 1 – Método de propagação de inoculo para seleção e imobilização dos microorganismos. Os microorganismos gerados durante o processo de inoculação foram utilizados para promover a biodegradação de efluentes contendo elevados conteúdos de matéria orgânica. A preparação dos meios de culturas, foi necessário até que se encontre todos os meios adequados para cada bactéria existente na amostra, que foi utilizada como inoculo, tendo aqui uma das maiores dificuldade pois existem vários microrganismos que precisam ser caracterizados. Depois que as bactérias foram colocados em placas, foi feita o isolamento e manutenção das cepas (culturas). RESULTADOS As bactérias presentes no Agar Muller Hinton foram submetidas a técnica da coloração do gram, que consiste no tratamento sucessivo de um esfregaço bacteriano fixado pelo calor, que permite a separação de amostras bacterianas em gram-positivas e gram-negativas, as bactérias presentes no meio acima, foram identificadas, bacilos gram-negativos. Ainda assim, fez-se o teste de oxidase, onde obteve-se resultado negativo. Diante deste resultado procedeu-se com o teste bioquímico, onde a bactéria identificada seria a possivelmente Escherichia Coli. Prepararou-se 24 tubos de ensaio com solução salina, para ser feito a diluição. Após o procedimento acima, foi retirado a amostra na estufa e uma alíquota de 100µl foi diluído quatro vezes, semeado numa placa de MH 10µl da solução diluída 10-4, espalhando com a alça e depois com o swab. Repetir este procedimento por seis vezes a cada 20 min. Foi incubado a 37ºC, feito a contagem após 24hs. As unidades formadoras de colônias serão contadas da seguinte forma: (UFC)/mL=(colônias) x (fator de dilução)-4 x 10 Após 24hs obteve-se os seguintes resultados: Tabela 2 – Velocidade de crescimento de colônias de bactérias ao longo do tempo. O início de gráfico mostra o tempo de adaptação das bactérias no meio. A parte mais alta se caracteriza como o melhor tempo de crescimento, 40min, com 0,567 UFC/ml. O ultimo ponto verifica-se como a taxa de morte, o número de bactéria diminui. É importante lembrar que estes resultados foram obtidos utilizando como meio de cultura o BHI. O microorganismo identificado, selecionado e inoculado em meio liquido, foi utilizado para promover a biodegradação da matéria orgânica, utilizando efluente simulado em laboratório.Os resultados obtidos na biodegradação de matéria orgânica utilizando os microorganismos previamente selecionados são mostrados na figura abaixo. Figura 2 – Resultados obtidos com a biodegradação da matéria orgânica utilizando diferentes concentrações de microorganismos. Os resultados demonstram que existe uma grande variabilidade quando comparamos as diferentes concentrações de inoculo adicionado no efluente, principalmente com relação à remoção de DQO. As elevadas remoções de DQO, após 48 horas, mostra que este microorganismo é eficiente para efluentes com estas características, com eficiência acima de 90% de remoção. Esses valores são muito melhores quando comparados com os resultados observados com outras formas de tratamentos de efluentes. Apesar de existir uma remoção de DBO acima de 90%, o processo ainda necessita de ajustes para ser implementado em fluxo contínuo. Assim trabalhos futuros serão realizados com objetivo de se aprimorar o processo e fazer a implementação de um piloto e fluxo contínuo com diversidade maior de efluentes. CONCLUSÕES Através dos resultados obtidos podemos concluir que: 1 – A bactéria identificada foi Escherichia Coli; 2 - as melhores condições de crescimento bacteriano balanceado, foi com um tempo de 40min, com 0,567 UFC/ml. 3– o melhor resultado para biodegradação da matéria orgânica foi obtido com concentração de inoculo de 5%; 4 - as elevadas remoções de DQO, mostram que estes microorganismos são eficientes para efluentes com estas características, com eficiência acima de 90% de remoção. REFERÊNCIAS Gonçalves, R. F.; Tratamento secundário de esgoto sanitário através da associação em série de reatores UASB e biofiltros aerados submersos. Associação Brasileira de Engenharia Sanitária e Ambiental. Trabalhos técnicos. Rio de Janeiro, ABES, 1997. João, J. J.; Skoronski, E.; Bucco, S.; Bonetti, T. M.; Determinação da atividade hidrolítica de enzimas Lipozyme RM aplicada ao tratamento de efluentes provenientes de industrias de latícinios. Anais 30 RASBQ, 2007. Leal, M. C.;Hydrolytic enzymes as coadjuvants in the anaerobic treatment of dairy watewaters. Brazilian Journal of Chemical Engineering, 19, 175-180, 2002. Apoio Financeiro: Unisul