TRANSCRIÇÃO processo pelo qual são sintetizados todos os RNAs da célula Cópia de uma região específica do DNA = RNA m reflete o estado fisiológico da célula extremamente variável Apenas uma das fitas é utilizada como molde Fita codificante 5’ A T G C C G C G A A T C C C T T G C Fita molde 3’ T A C G G C G C T T A G G G A A C G A U G C C G C G A A U C C C U U G C RNA 5’ RNA polimerases enzimas que catalisam a síntese de RNA atuam sempre no sentido 5’  3’ não necessitam de primer compostas de múltiplas subunidades

Reconhece o sítio de início Ambas SEM exon. 3’ 5’ : + chance de erro! RNA polimerases (RNAPs) procarióticas 2  ’  Reconhece o sítio de início 3 tipos de RNA polimerases (RNAPs) eucarióticas RNAP I  rRNAs RNAP II  hnRNAs (precursores de mRNAs) RNAP III  tRNAs e rRNA 5S Ambas SEM exon. 3’ 5’ : + chance de erro!

 Diminui a afinidade da RNA pol a regiões gerais do DNA Como as RNAPs sabem onde começar a transcrição? sítios promotores Promotores procarióticos - 35 - 10 + 1 TTGACA TATAAT RNA  Diminui a afinidade da RNA pol a regiões gerais do DNA aumenta afinidade aos promotores !

Promotores eucarióticos - 110 - 40 - 25 + 1 GC CAAT GC TATA RNA Promotores FORTES e FRACOS FATORES DE TRANSCRIÇÃO eucariotos Proteínas específicas que reconhecem os promotores eucarióticos e permitem a ligação da RNA polimerase Enhancers aumentam a expressão dos genes podem estar a 5’ do promotor, após o terminador ou até muito distantes sua ação requer proteínas que se expressam apenas em algumas células

HELICASE: separa RNA / DNA (PROC.) Etapas da transcrição reconhecimento do promotor iniciação alongamento término Término - Regiões com SINAIS DE TÉRMINO - região rica em GC GRAMPO DE RNA !! (PROC.) - seq. de A (DNA ) e U (RNA) proteína  HELICASE: separa RNA / DNA (PROC.)

PROCESSAMENTO Próximo passo: Eucariotos Processamento do RNA TRADUÇÃO Procariotos TRADUÇÃO (simultânea) PROCESSAMENTO Revestimento em 5’ (“CAP”) Cauda poli A splicing

Por que exons e introns ? SPLICING ALTERNATIVO 1 2 3 4 5 “CAP”: enzima guanilil-transferase liga um G à 5’ Protege da degradação por nucleases e fosfatases Função da TRADUÇÃO Somente em mRNA Cauda “poli A” Endonuclease reconhece AAUAAA Enzima poli A polimerase adiciona A à ponta 3’ que foi cortada Splicing = retirada de íntrons Exons  região codificadora + seqs. UTR 5’ e 3’ Introns: ~ 40 nt GU A AG Regiões não traduzidas Por que exons e introns ? SPLICING ALTERNATIVO 1 2 3 4 5

35 % dos genes humanos sofrem splicing alternativo!! 1 2 3 4 5 1 3 4 5 1 2 4 5 1 2 3 5 + exons = + tipos de splicing = + tipos de proteínas UM GENE ! 35 % dos genes humanos sofrem splicing alternativo!! Cromossomo 22 tem em média 2.6 transcritos distintos por gene!! Cromossomo 19 tem em média 3.2 transcritos distintos por gene!! Bem mais que em outros organismos!! Proteínas envolvidas na AUDIÇÃO: Cada uma é responsável pelo reconhecimento de uma determinada freqüência de onda 1 gene produz 576 diferentes proteínas !!