Lesão em DNA Uma polimerase procariótica erra na faixa de 1 em 107 Taxa de mutação espontânea = 10-7 Observada em E. coli = 10-10 Redução é devida a monitoramento pelo sistema de reparo A mitocondria reduz oxigênio a água Com entrega de 4 elétrons em um único passo Erra em 5% das vezes Gerando EAO = espécies ativas de oxigênio EAO = superóxido e água oxigenada Água oxigenada + Fe II = RADICAL HIDROXILA Lesão de DNA que leva a quebra em fita simples Agentes exógenos físicos e químicos Sistema de reparo Sistema de checkpoint (enquanto o reparo acontece o ciclo celular é bloqueado) Erro em checkpoint = principal causa de câncer 4 mutações cruciais demoram mais que uma vida

Vc sabia que A pode parear com C? É o tautômero raro de A Leva a transição A-T >> C-G BrdU pode tautomerizar E parear com G Leva a transição A-T >> C-G Mudança química de A para H H pareia com C Leva a transição A-T >> C-G + de ácido nitroso C vira U (transição) G vira Xantina (pareia com C)

Acridinas = intercalantes Levam a mudança de fase de leitura Aduto em G7 Dímero de pirimidina Lesão mais comum do UV curto (fotoliase) Nem sempre a droga é mutagênica Aflatoxina do fungo do amendoim é ativada perto do núcleo

Captura a base no sítio ativo Gera um AP-site ou sítio abásico BER NER Excisão da lesão: duas formas, excisão da base ou dos nucleotídeos da região lesada AlkA excisando a base (glicosilase) Captura a base no sítio ativo Gera um AP-site ou sítio abásico (substrato para AP-endonuclease)

Excisão de nucleotídos “Patch” de reparo Citosina desaminada vira U é retirada deixando o sítio abásico (patch de reparo menor)

Reparo de erros de pareamento “Mismatch repair” Expansão de repetições Huntintina expande de 6-31 rep. para 36-82 Teste de AMES 10 bilhões de Salmonella his- Uma reversão de mutação torna-as his+

Defeito em reparo de DNA em humanos Xeroderma pigmentosum Vários grupos de complementação Sensibilidade a luz UV (254 nm) Defeito em incisão junto a dímeros de pirimidina (XPA, TFII H) XPV = defeito de replicação trans-lesão (reparo pós-replicação) Ataxia telangiectasia Sensibilidade a raio X (quebras diretas no DNA) Reparo eficente de quebras em DNA Defeito em bloqueio de ciclo celular Replicação de DNA lesado = instabilidade genômica Síndrome de Cockaine Sensibilidade a UV e EAO (8-oxoG) Manifestação fetal (UV?) Defeito em reparo acoplado a transcrição Normalmente induzido pela RNA Pol II entalada Síndrome de Lynch Defeito em mismatch repair e propensão a câncer coloretal não poliposo